| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1 木聚糖内切酶的分子催化机理及结构域多态性 | 第14-27页 |
| ·木聚糖种类的划分 | 第14-15页 |
| ·木聚糖内切酶的特征及应用 | 第15-16页 |
| ·木聚糖内切酶催化结构域的家族分布 | 第16-20页 |
| ·GH10木聚糖酶 | 第17-18页 |
| ·GH11木聚糖酶 | 第18页 |
| ·GH5木聚糖酶 | 第18-19页 |
| ·GH8木聚糖酶 | 第19页 |
| ·GH30木聚糖酶 | 第19-20页 |
| ·GH43木聚糖酶 | 第20页 |
| ·木聚糖内切酶的催化机理 | 第20-21页 |
| ·木聚糖内切酶非催化结构域特征及多态性 | 第21-25页 |
| ·碳水化合物结合结构域CBM | 第22-24页 |
| ·S-层同源结构域SLH | 第24-25页 |
| ·连接肽Linker | 第25页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| ·本研究的研究内容 | 第26-27页 |
| 2 一种新型携带有CBM6耐热GH11木聚糖酶的生化性质分析 | 第27-53页 |
| 引言 | 第27页 |
| ·实验材料 | 第27-32页 |
| ·菌种和质粒 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27-28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·培养基及试剂的配制 | 第28-32页 |
| ·实验方法 | 第32-40页 |
| ·C. kronotskyensis的培养及基因克隆 | 第32-34页 |
| ·嗜热酶Xyn11A和其截断体的表达与纯化 | 第34-35页 |
| ·Xyn11A对不同底物的活性筛选 | 第35-36页 |
| ·酶学性质分析 | 第36-38页 |
| ·水解榉木木聚糖和低聚木糖产物分析 | 第38-39页 |
| ·底物亲和分析 | 第39-40页 |
| ·结果 | 第40-47页 |
| ·蛋白纯化 | 第40-41页 |
| ·不同底物的活性筛选 | 第41页 |
| ·酶学表征 | 第41-44页 |
| ·金属离子和化学试剂对活性的影响 | 第44-45页 |
| ·BWX和XOS水解产物分析 | 第45-47页 |
| ·底物亲和分析 | 第47页 |
| ·讨论 | 第47-51页 |
| ·模块结构和同源性分析 | 第47-50页 |
| ·GH11为小分量木聚糖酶 | 第50页 |
| ·金属离子和化学试剂对活性的影响 | 第50页 |
| ·Xyn11A的酶学性质及CBM6对Xyn11A的关系 | 第50-51页 |
| ·小结 | 第51-53页 |
| 3 GH10木聚糖酶Xyn10A和Xyn10B酶学性质研究 | 第53-73页 |
| 引言 | 第53页 |
| ·实验材料 | 第53-54页 |
| ·菌株和质粒 | 第53页 |
| ·主要试剂 | 第53-54页 |
| ·主要仪器 | 第54页 |
| ·试剂配置 | 第54页 |
| ·实验方法 | 第54-57页 |
| ·基因克隆 | 第54-55页 |
| ·Xyn10A与其截断体及Xyn10B的表达与纯化 | 第55页 |
| ·酶学性质分析 | 第55-56页 |
| ·水解BWX、OSX及XOS产物分析 | 第56页 |
| ·底物亲和分析 | 第56页 |
| ·作用于天然底物和与商业纤维素酶协同实验 | 第56页 |
| ·关键氨基酸定点突变 | 第56-57页 |
| ·结果 | 第57-68页 |
| ·蛋白表达与纯化 | 第57-59页 |
| ·酶学表征 | 第59-62页 |
| ·水解BWX、OSX和XOS分析 | 第62-63页 |
| ·底物亲和分析 | 第63-64页 |
| ·作用于天然底物和与商业纤维素酶协同实验 | 第64-65页 |
| ·关键氨基酸定点突变 | 第65-68页 |
| ·讨论 | 第68-72页 |
| ·Xyn10A可应用于降解天然生物质 | 第68-70页 |
| ·CBM与木聚糖酶热稳定性的关系 | 第70-71页 |
| ·水解过程中非催化结构的作用 | 第71-72页 |
| ·木聚糖酶的关键催化残基 | 第72页 |
| ·小结 | 第72-73页 |
| 4 结论与展望 | 第73-75页 |
| ·结论 | 第73-74页 |
| ·C. kronotskyensis木聚糖酶可用于天然生物质降解 | 第73页 |
| ·非催化结构域对木聚糖酶具有重要影响 | 第73-74页 |
| ·GH具有底物结合能力 | 第74页 |
| ·论文创新点 | 第74页 |
| ·展望 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 攻读学位论文期间发表文章 | 第90页 |
