匍枝根霉抑制性消减杂交差异文库的构建及分析
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 目录 | 第10-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-22页 |
| ·纤维素研究现状 | 第13-15页 |
| ·纤维素类物质及其结构组成 | 第13-14页 |
| ·纤维素的应用 | 第14-15页 |
| ·纤维素酶研究现状 | 第15-19页 |
| ·产纤维素酶的微生物 | 第15-16页 |
| ·纤维素酶结构与功能 | 第16页 |
| ·纤维素酶的表达机制和协同作用 | 第16-18页 |
| ·纤维素酶的应用 | 第18页 |
| ·纤维素酶研究的新思路 | 第18-19页 |
| ·抑制性消减杂交技术概述 | 第19-21页 |
| ·抑制性消减杂交技术的原理 | 第19-20页 |
| ·抑制性消减杂交技术的应用 | 第20-21页 |
| ·本课题研究目的及研究内容 | 第21-22页 |
| ·研究目的 | 第21页 |
| ·研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 匍枝根霉高质量总RNA的制备 | 第22-29页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·菌种 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-24页 |
| ·匍枝根霉菌体的培养 | 第23页 |
| ·匍枝根霉总RNA的提取 | 第23-24页 |
| ·实验结果与讨论 | 第24-28页 |
| ·小结 | 第28-29页 |
| 第三章 匍枝根霉抑制性消减杂交cDNA文库的构建 | 第29-47页 |
| ·实验材料 | 第29-31页 |
| ·菌种及载体 | 第29页 |
| ·培养基 | 第29页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第29-31页 |
| ·实验方法 | 第31-43页 |
| ·菌体的预处理 | 第31页 |
| ·实验组和对照组总RNA的提取 | 第31页 |
| ·实验组和对照组mRNA的分离与浓缩 | 第31-32页 |
| ·cDNA第一条链的合成 | 第32-33页 |
| ·cDNA第二条链的合成 | 第33-34页 |
| ·RsaI酶切 | 第34-35页 |
| ·接头的连接 | 第35-36页 |
| ·接头效率检测 | 第36页 |
| ·第一轮杂交 | 第36-38页 |
| ·第二轮杂交 | 第38-39页 |
| ·两轮PCR扩增 | 第39-40页 |
| ·PCR扩增产物的纯化 | 第40页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
| ·T载体的连接与转化 | 第41-42页 |
| ·阳性克隆的筛选与测序 | 第42-43页 |
| ·实验结果与讨论 | 第43-46页 |
| ·总RNA的提取 | 第43页 |
| ·mRNA的提取 | 第43-44页 |
| ·双链cDNA的RsaI酶切 | 第44页 |
| ·抑制性消减杂交PCR | 第44-45页 |
| ·差异文库的筛选 | 第45-46页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| 第四章 匍枝根霉差异表达基因的生物信息学分析 | 第47-68页 |
| ·差异表达基因的生物信息学分析方法 | 第47页 |
| ·差异表达基因的生物信息学分析结果与讨论 | 第47-67页 |
| ·第一组差异表达基因的生物信息学分析结果与讨论 | 第58-62页 |
| ·第二组差异表达基因的生物信息学分析结果与讨论 | 第62-64页 |
| ·第三组差异表达基因的生物信息学分析结果与讨论 | 第64-67页 |
| ·小结 | 第67-68页 |
| 第五章 结论与展望 | 第68-70页 |
| ·结论 | 第68页 |
| ·展望 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-81页 |
| 本人在攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |