| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-26页 |
| ·丛枝菌根概述 | 第10-11页 |
| ·丛枝菌根的形成 | 第11-13页 |
| ·丛枝菌根与植物营养 | 第13-16页 |
| ·植物与磷营养 | 第16-18页 |
| ·宿主诱导的基因沉默 | 第18-20页 |
| ·营养转运受体 | 第20-22页 |
| ·营养转运受体简介 | 第20-21页 |
| ·酵母磷酸盐转运子PHO84 | 第21-22页 |
| ·酵母中磷酸盐调控系统PHO | 第22-24页 |
| ·本研究目的与意义 | 第24-25页 |
| ·技术路线 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-43页 |
| ·实验材料 | 第26-31页 |
| ·植物材料与AM真菌 | 第26页 |
| ·质粒和菌株 | 第26-27页 |
| ·主要分子生物学试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27页 |
| ·主要培养基 | 第27-28页 |
| ·缓冲液和反应试剂 | 第28-31页 |
| ·方法 | 第31-43页 |
| ·紫云英盆栽试验 | 第31页 |
| ·孢子RNA的抽提与反转录 | 第31-32页 |
| ·TA克隆及测序分析 | 第32-34页 |
| ·发根农杆菌K599介导的紫云英转化 | 第34页 |
| ·基因表达分析 | 第34-36页 |
| ·Nouthern Blots | 第36-38页 |
| ·酵母功能验证实验 | 第38-40页 |
| ·海藻糖酶活的测定 | 第40页 |
| ·AMF侵染率的检测 | 第40-41页 |
| ·AM真菌SDH和ALP酶活性测定 | 第41页 |
| ·土壤中AM真菌菌丝密度的测定 | 第41-42页 |
| ·生物量及磷含量的测定 | 第42-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-59页 |
| ·宿主诱导的基因沉默体系的建立 | 第43-52页 |
| ·GigmPT RNAi载体的构建 | 第43-44页 |
| ·紫云英转化株中GigmPT干扰载体表达的检测 | 第44-45页 |
| ·RNAi分析及siRNA的检测 | 第45-47页 |
| ·GigmPT功能缺失影响AM真菌根内外菌丝发育 | 第47-49页 |
| ·GigmPT沉默后影响AM共生途径中Pi吸收 | 第49-51页 |
| ·GigmPT沉默后导致积累多聚磷酸盐 | 第51-52页 |
| ·低亲和力的磷酸盐转运子GiPT4在酵母中功能研究 | 第52-56页 |
| ·GiPT4的cDNA获得 | 第52-53页 |
| ·酵母功能验证 | 第53-56页 |
| ·GigmPT及GiPT4磷转运受体功能的验证 | 第56-59页 |
| ·PKA信号途径有机磷酸盐同系物的筛选 | 第57页 |
| ·GigmPT可以激活Gly3P诱导的PKA信号途径 | 第57-59页 |
| 4 总结与讨论 | 第59-64页 |
| ·AM真菌HIGS技术 | 第59-60页 |
| ·GigmPT对AM共生体正常发育必不可少 | 第60-61页 |
| ·AM真菌中的磷酸盐转运受体 | 第61-62页 |
| ·GiPT4是一个低亲和力的磷转运蛋白 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 附录一 本实验所用引物 | 第73-74页 |
| 附录二 GiPT4的cDNA | 第74-75页 |
| 附录三 培养基与染色液 | 第75-77页 |
| MS培养基 | 第75-76页 |
| Hoagland营养液 | 第76-77页 |
| SDH染液配方 | 第77页 |
| ALP染液配方 | 第77页 |