| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第11-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-23页 |
| ·FcRn研究进展 | 第13-18页 |
| ·FcRn的发现 | 第13页 |
| ·FcRn的结构 | 第13-14页 |
| ·IgG的结构 | 第14-16页 |
| ·FcRn与IgG的相互作用 | 第16-17页 |
| ·FcRn-IgG胞转作用(transcytosis) | 第17-18页 |
| ·FcRn在哺乳动物中的表达 | 第18页 |
| ·禽流感研究进展 | 第18-21页 |
| ·禽流感的危害 | 第18-19页 |
| ·禽流感病毒的结构 | 第19-20页 |
| ·禽流感的致病机制 | 第20页 |
| ·禽流感疫苗的研究进展 | 第20-21页 |
| ·重组杆状病毒表达载体简介 | 第21-23页 |
| 2 目的与意义 | 第23-24页 |
| 3 材料方法 | 第24-48页 |
| ·材料 | 第24-31页 |
| ·菌株及细胞 | 第24页 |
| ·载体与质粒 | 第24-26页 |
| ·主要药品与试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·主要抗生素与培养基的配制 | 第26-27页 |
| ·主要溶液配制 | 第27-31页 |
| ·实验方法 | 第31-48页 |
| ·引物设计 | 第31-32页 |
| ·HA1、wFc基因的扩增 | 第32页 |
| ·HA1-wFc基因的扩增 | 第32-33页 |
| ·重组质粒pMD18-T-HA1-wFc的构建 | 第33-35页 |
| ·HA1-mFc基因的扩增 | 第35-37页 |
| ·重组质粒pMD18-T-HA1-mFc的构建 | 第37页 |
| ·pET-32a-HA1-wFc原核表达载体的构建 | 第37-38页 |
| ·重组原核表达质粒pET-32a-HA1-wFc和pGEX-KG-HA1的诱导表达及鉴定 | 第38-40页 |
| ·原核表达融合蛋白的纯化 | 第40-41页 |
| ·pFASTBAC HTb-HA1-wFc、pFASTBAC HTb-HA1-mFc真核表达载体的构建 | 第41页 |
| ·pFASTBAC HTb-HA1-wFc、pFASTBAC HTb-HA1-mFc重组质粒的转座 | 第41-42页 |
| ·杆粒Bacmid的提取与鉴定 | 第42-44页 |
| ·重组阳性杆粒Bacmid转染Sf9细胞 | 第44-45页 |
| ·重组阳性杆状病毒的扩增 | 第45-46页 |
| ·重组HA1-wFc与HA1-mFc蛋白的表达与鉴定 | 第46-48页 |
| 4 实验结果 | 第48-60页 |
| ·PCR扩增结果 | 第48-50页 |
| ·HA1-Linker片段与Linker-Fc片段PCR扩增结果 | 第48-49页 |
| ·HA1-wFc片段与HA1-mFc片段PCR扩增结果 | 第49-50页 |
| ·克隆载体的构建和鉴定 | 第50-52页 |
| ·表达载体的构建和鉴定 | 第52-54页 |
| ·HA1-wFc原核表达载体的构建与鉴定 | 第52页 |
| ·HA1-wFc真核表达载体的构建与鉴定 | 第52-53页 |
| ·HA1-Linker-mFc真核表达载体的构建和鉴定 | 第53-54页 |
| ·重组杆粒Bacmid的鉴定 | 第54-55页 |
| ·目的引物鉴定 | 第54页 |
| ·M13引物鉴定 | 第54-55页 |
| ·阳性杆粒Bacmid转染Sf9细胞 | 第55-56页 |
| ·融合蛋白表达与鉴定 | 第56-60页 |
| ·KG-HA1蛋白的原核表达与鉴定 | 第56页 |
| ·32a-HA1-wFc融合蛋白的原核表达与鉴定 | 第56-57页 |
| ·HA1-wFc融合蛋白的真核表达与鉴定 | 第57页 |
| ·HA1-mFc融合蛋白的真核表达与鉴定 | 第57-60页 |
| 5 讨论 | 第60-62页 |
| ·引物设计 | 第60页 |
| ·重组HA1-mFc融合蛋白的表达 | 第60页 |
| ·阳性重组杆状病毒的扩增 | 第60-62页 |
| 6 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
