| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-26页 |
| 1. 昆虫胆固醇及甾醇载体蛋白(Sterol carrier protein,SCP) | 第12-14页 |
| ·昆虫胆固醇的生理功能 | 第12页 |
| ·胆固醇的运输 | 第12-13页 |
| ·甾醇载体蛋白 | 第13-14页 |
| 2. 埃及伊蚊(Aedes aegypti)SCP-2蛋白及其转录调控的研究 | 第14-16页 |
| ·埃及伊蚊(Aedes aegypti) | 第14页 |
| ·埃及伊蚊甾醇载体蛋白(AeSCP-2) | 第14-15页 |
| ·SCP-2转录调控的研究 | 第15-16页 |
| 3. 营养靶标-SCPIS | 第16-17页 |
| 4. 垂直的DNA载体导入法(vertical DNA vector delivery method) | 第17-20页 |
| 5. 研究目的和意义 | 第20-21页 |
| 参考文献 | 第21-26页 |
| 第二章 蚊虫垂直DNA载体导入法的建立和应用 | 第26-46页 |
| 1. 材料 | 第27-28页 |
| ·实验动物及饲养 | 第27页 |
| ·实验试剂及试剂盒 | 第27-28页 |
| ·质粒 | 第28页 |
| ·主要实验仪器 | 第28页 |
| 2. 方法 | 第28-32页 |
| ·质粒DNA的制备 | 第28-29页 |
| ·In vivo-jetPEI/DNA复合体(In vivo-JetPEI/DNA complexes)溶液的制备 | 第29-30页 |
| ·显微注射(Microinjection) | 第30-31页 |
| ·F0代蚊子β-gal活性测定 | 第31-32页 |
| 3. 结果 | 第32-37页 |
| ·台盼蓝显微注射的结果 | 第32-34页 |
| ·外源DNA质粒在F0代蚊子中的导入 | 第34-35页 |
| ·可诱导的过表达(Over-expression)DNA质粒在F0代蚊子中的导入 | 第35-37页 |
| 4. 讨论 | 第37-40页 |
| 附录 | 第40-43页 |
| 参考文献 | 第43-46页 |
| 第三章 埃及伊蚊甾醇载体蛋白-2(AeSCP-2)生理功能的研究 | 第46-77页 |
| 1. 材料 | 第46-50页 |
| ·实验动物及饲养 | 第46页 |
| ·所用质粒 | 第46-47页 |
| ·所用菌株 | 第47页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第47-48页 |
| ·常用试剂及培养基的配制 | 第48-49页 |
| ·实验仪器 | 第49-50页 |
| 2. 方法 | 第50-62页 |
| ·重组质粒pBS-hsp70-SV40 Poly(A)的构建 | 第50-53页 |
| ·pBS-hsp70-AeSCP-2-siRNA表达质粒的构建 | 第53-55页 |
| ·pBS-hsp70-AeSCP-2-siRNA表达质粒的显微注射 | 第55-56页 |
| ·F0代蚊子中AeSCP-2 siRNA的诱导 | 第56-57页 |
| ·F0代蚊子中AeSCP-2表达水平检测 | 第57-61页 |
| ·siRNA干扰AeSCP-2的表达对F0代蚊子生长发育的影响 | 第61-62页 |
| ·实验数据的统计学分析 | 第62页 |
| 3. 结果 | 第62-72页 |
| ·可诱导的表达抑制(expression knockdown)质粒在F0代蚊子中的导入 | 第62-66页 |
| ·导入的DNA质粒在F0代蚊子中的表达抑制效率 | 第66-68页 |
| ·siRNA干扰AeSCP-2的表达对蚊子生长和发育的影响 | 第68-70页 |
| ·siRNA干扰AeSCP-2的表达对败子繁殖力的影响 | 第70-72页 |
| 4. 讨论 | 第72-75页 |
| 附录 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-77页 |
| 第四章 埃及伊蚊甾醇载体蛋白-2(AeSCP-2)基因的转录调控 | 第77-123页 |
| 1. 材料 | 第79-82页 |
| ·实验动物 | 第79页 |
| ·研究所用的质粒 | 第79-80页 |
| ·所用的试剂及试剂盒 | 第80-81页 |
| ·主要实验仪器与设备 | 第81页 |
| ·常用试剂配制 | 第81-82页 |
| 2. 方法 | 第82-95页 |
| ·埃及伊蚊(Aedes aegypti)的饲养 | 第82页 |
| ·short hsp70启动子表达载体的构建 | 第82-84页 |
| ·转录因子siRNA表达质粒的构建 | 第84-86页 |
| ·AeSCP-2 siRNA表达质粒的构建 | 第86页 |
| ·pBS-hsp70-siAeSCP-2质粒抑制AeSCP-2表达的分析 | 第86页 |
| ·pBS-1.6kb-siAeSCP-2质粒的构建 | 第86-88页 |
| ·DNA质粒载体的显微注射 | 第88页 |
| ·CAT报告基因的检测分析 | 第88页 |
| ·核蛋白的提取和Pull-down Assay | 第88-90页 |
| ·结合蛋白的LC-MS鉴定 | 第90-91页 |
| ·逆转录RT-PCR反应 | 第91-93页 |
| ·Western Blotting分析 | 第93-95页 |
| ·统计学分析 | 第95页 |
| 3. 结果 | 第95-113页 |
| ·AeSCP-2启动子重要调控区域的鉴定 | 第95-99页 |
| ·与AeSCP-2启动子调控区域相结合的转录因子 | 第99-105页 |
| ·转录因子对AeSCP-2表达进行调控的体内研究 | 第105-107页 |
| ·THAP和ATF-2表达抑制对蚊子生长发育和繁殖的影响 | 第107-113页 |
| 4. 讨论 | 第113-117页 |
| 附录 | 第117-120页 |
| 参考文献 | 第120-123页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第123-124页 |
| 致谢 | 第124页 |
