| 致谢 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 目次 | 第12-16页 |
| 引言 | 第16-18页 |
| 第一部分 文献综述与技术路线 | 第18-46页 |
| 第一章 蛋白质泛素化及其生物学功能 | 第20-24页 |
| 1 蛋白质泛素化的基本过程 | 第20-21页 |
| 2 泛素—蛋白酶体降解系统的组成 | 第21-22页 |
| 3 泛素链形成方式对标记蛋白功能的影响 | 第22-24页 |
| 第二章 泛素偶联酶E2的结构与主要生物学功能 | 第24-32页 |
| 1 泛素偶联酶的结构特征 | 第24-26页 |
| ·泛素偶联催化支架(UBCc fold) | 第24-25页 |
| ·泛素偶联酶N/C端延伸与分类 | 第25页 |
| ·泛素偶联酶的进化特征与命名 | 第25-26页 |
| 2. 泛素偶联酶的主要生物学功能 | 第26-32页 |
| ·细胞周期调控 | 第27-28页 |
| ·肿瘤形成 | 第28-29页 |
| ·神经系统功能异常 | 第29-30页 |
| ·其它生物学功能 | 第30-32页 |
| 第三章 泛素连接酶E3的结构与生物学功能 | 第32-44页 |
| 1 HECT结构域家族连接酶 | 第32-35页 |
| ·HECT结构域的结构特征 | 第33-34页 |
| ·HECT结构域家族连接酶的功能 | 第34-35页 |
| 2 RING结构域家族连接酶 | 第35-39页 |
| ·RING结构域家族连接酶的结构特征 | 第36-38页 |
| ·RING结构域家族连接酶的功能 | 第38-39页 |
| 3. U-box结构域家族连接酶 | 第39-44页 |
| ·U-box结构域家族连接酶的结构特征 | 第40-42页 |
| ·U-BOX蛋白的主要生物学功能 | 第42-44页 |
| 技术路线图 | 第44-46页 |
| 第二部分 九孔鲍泛素偶联酶UBE2D的分子生物学及功能研究 | 第46-92页 |
| 第四章 九孔鲍UBE2D cDNA序列的克隆与分析 | 第48-62页 |
| 1. 材料和方法 | 第49-55页 |
| ·材料 | 第49-51页 |
| ·实验方法 | 第51-55页 |
| 2 结果 | 第55-59页 |
| ·总RNA的制备 | 第55页 |
| ·Ab-UBE2D cDNA片段的克隆与鉴定 | 第55-56页 |
| ·Ab-UBE2D cDNA的序列分析 | 第56-59页 |
| 3. 讨论 | 第59-62页 |
| 第五章 九孔鲍UBE2D的原核表达、鉴定 | 第62-74页 |
| 1. 材料和方法 | 第62-69页 |
| ·材料 | 第62-64页 |
| ·方法 | 第64-69页 |
| 2. 结果 | 第69-73页 |
| ·Ab-UBE2D原核表达载体的构建与酶切鉴定 | 第69-70页 |
| ·重组蛋白的表达与纯化 | 第70-71页 |
| ·多克隆抗体制备与检测 | 第71页 |
| ·Western blot分析 | 第71-72页 |
| ·重组蛋白的质谱鉴定 | 第72-73页 |
| 3. 讨论 | 第73-74页 |
| 第六章 九孔鲍UBE2D的组织表达分布与亚细胞定位 | 第74-84页 |
| 1. 材料和方法 | 第74-78页 |
| ·材料 | 第74-75页 |
| ·方法 | 第75-78页 |
| 2 结果 | 第78-81页 |
| ·Ab-UBE2D基因在正常组织中表达的实时定量RT-PCR检测 | 第78-79页 |
| ·Ab-UBE2D在正常组织中表达的Western blot检测 | 第79-80页 |
| ·Ab-UBE2D在鲍血淋巴细胞中的亚细胞定位 | 第80-81页 |
| 3. 讨论 | 第81-84页 |
| 第七章 Ab-UBE2D的泛素偶联酶活性及在免疫反应中的作用 | 第84-92页 |
| 1. 材料和方法 | 第84-87页 |
| ·材料 | 第84-85页 |
| ·方法 | 第85-87页 |
| 2 结果 | 第87-89页 |
| ·Ab-UBE2D的体外泛素化反应 | 第87-88页 |
| ·Ab-UBE2D在LPS及PolyI：C诱导刺激后的表达变化 | 第88-89页 |
| 3. 讨论 | 第89-92页 |
| 第三部分 近江牡蛎泛素连接酶UIP5的分子生物学与功能研究 | 第92-129页 |
| 第八章 近江牡蛎UIP5 cDNA序列的克隆与分析 | 第94-104页 |
| 1. 材料和方法 | 第94-97页 |
| ·材料 | 第94-95页 |
| ·方法 | 第95-97页 |
| 2 结果 | 第97-101页 |
| ·总RNA的制备 | 第97页 |
| ·Ca-UIP5 cDNA片段的克隆与鉴定 | 第97-98页 |
| ·Ca-UIP5 cDNA序列分析 | 第98-101页 |
| 3. 讨论 | 第101-104页 |
| 第九章 近江牡蛎UIP5的原核表达、鉴定 | 第104-114页 |
| 1. 材料和方法 | 第104-107页 |
| ·材料 | 第104页 |
| ·方法 | 第104-107页 |
| 2. 结果 | 第107-110页 |
| ·Ca-UIP5及Ca-UD原核表达载体的构建与酶切鉴定 | 第107-108页 |
| ·重组蛋白的表达与纯化 | 第108-109页 |
| ·多克隆抗体制备与检测 | 第109页 |
| ·Western blot分析 | 第109-110页 |
| ·重组蛋白的质谱鉴定 | 第110页 |
| 3 讨论 | 第110-114页 |
| 第十章 近江牡蛎UIP5的组织表达与亚细胞分布 | 第114-121页 |
| 1. 材料和方法 | 第114-116页 |
| ·材料 | 第114页 |
| ·方法 | 第114-116页 |
| 2 结果 | 第116-120页 |
| ·Ca-UIP5基因在正常组织中表达的实时定量RT-PCR检测 | 第116-117页 |
| ·Ca-UIP5在牡蛎组织中的亚细胞分布情况 | 第117-120页 |
| 3. 讨论 | 第120-121页 |
| 第十一章 Ca-UIP5的泛素连接酶活性及在免疫反应中的作用 | 第121-129页 |
| 1. 材料和方法 | 第121-123页 |
| ·材料 | 第121页 |
| ·方法 | 第121-123页 |
| 2 结果 | 第123-127页 |
| ·Ca-UD的体外泛素化反应 | 第123-125页 |
| ·Ab-UBE2D介导的Ca-UD体外泛素化反应 | 第125-126页 |
| ·Ca-UIP5在LPS及PolyI：C诱导刺激后的表达变化 | 第126-127页 |
| 3. 讨论 | 第127-129页 |
| 全文小结 | 第129-131页 |
| 1 本研究的主要成果和结论 | 第129-130页 |
| 2 本研究的主要创新点 | 第130页 |
| 3 进一步研究方向 | 第130-131页 |
| 参考文献 | 第131-141页 |
| 作者简历 | 第141页 |
