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近江牡蛎抗类立克次体感染天然免疫分子的生物学研究

致谢第1-7页
摘要第7-10页
Abstract第10-14页
目录第14-20页
本博士论文主要仪器设备第20-21页
缩略语第21-23页
引言第23-25页
第一部分 文献综述、研究内容与技术路线第25-44页
 第一章 同种异体移植炎症因子(AIF1)的研究进展第26-34页
  1 AIF1的基因定位和结构特点第26-27页
  2 AIF1的表达和组织分布第27页
  3 AIF1的同系物第27-28页
  4 AIF1的变异体第28-29页
  5 AIF1的生物学功能第29-33页
   ·AIF1在免疫移植排斥中的作用第29-30页
   ·AIF1在损伤和炎症反应中的作用第30-33页
  6 结语第33-34页
 第二章 高迁移率族蛋白B1(HMGB1)结构、生物学特性及其在炎症反应中的作用第34-42页
  1 HMGB1的结构第34-35页
  2 HMGB1的释放第35-36页
   ·主动分泌第35-36页
   ·被动释放第36页
  3 HMGB1的受体和信号传导第36-37页
  4 HMGB1细胞核内的功能第37-38页
  5 HMGB1与炎症反应第38-40页
  6 结语第40-42页
 第三章 研究内容与技术路线第42-44页
  1 研究内容第42-43页
  2 技术路线第43-44页
第二部分 广西近江牡蛎类立克次体病原鉴定及cDNA文库构建第44-72页
 第四章 广西近江牡蛎类立克次体病原生物学研究及其分离纯化和鸡胚培养第45-57页
  1 材料和方法第45-48页
   ·材料第45-46页
   ·方法第46-48页
  2 结果第48-55页
   ·现场调查第48页
   ·患病牡蛎主要症状第48-49页
   ·超微病理学第49-52页
   ·组织病理学第52-53页
   ·类立克次体的纯化第53-54页
   ·鸡胚培养第54-55页
  3 讨论第55-57页
 第五章 类立克次体刺激后近江牡蛎血淋巴细胞cDNA文库构建第57-72页
  1 材料和方法第57-64页
   ·材料第57-58页
   ·方法第58-64页
  2 结果第64-65页
   ·总RNA的制备第64页
   ·双链cDNA合成第64页
   ·文库滴度测定第64-65页
   ·测序结果分析第65页
  3 讨论第65-72页
第三部分 近江牡蛎AIF1的鉴定、表达及其功能与机制的探索性研究第72-105页
 第六章 近江牡蛎AIF1的序列分析和组织表达第73-85页
  1 材料和方法第73-79页
   ·材料第73-75页
   ·方法第75-79页
  2 结果第79-83页
   ·AIF1序列结构分析第79-80页
   ·AIF1序列同源性比较和进化树分析第80-82页
   ·AIF1 mRNA组织分布第82-83页
  3 讨论第83-85页
 第七章 近江牡蛎AIF1的原核表达、抗体制备及其组织细胞定位第85-96页
  1 材料和方法第85-93页
   ·方法第88-93页
  2 结果第93-95页
   ·原核表达载体的构建第93页
   ·近江牡蛎AIF1的原核表达、纯化及多克隆抗体制备第93-95页
   ·组织免疫荧光第95页
  3 讨论第95-96页
 第八章 Ca-AIF1及其抗体在近江牡蛎抗感染免疫反应中的作用第96-105页
  1 材料和方法第96-99页
   ·试验动物第96-97页
   ·方法第97-99页
  2 结果第99-102页
   ·LPS和RLO刺激下Ca-AIF1 mRNA表达量变化第99页
   ·重组Ca-AIF1蛋白诱导近江牡蛎其它细胞因子mRNA表达量变化第99-101页
   ·抗AIF1血清对近江牡蛎LITAF表达量的变化第101-102页
   ·流式细胞仪第102页
  3 讨论第102-105页
第四部分 近江牡蛎HMGB的鉴定、表达及其功能与机制的探索性研究第105-130页
 第九章 近江牡蛎HMGB的序列分析和组织表达第106-107页
  1 材料和方法第106-107页
   ·材料第106-107页
   ·方法第107页
 2 结果第107-114页
   ·近江牡蛎HMGB序列分析第107-109页
   ·Ca-HMGB序列同源性比较和进化树分析第109-111页
   ·Ca-HMGB mRNA组织分布第111-112页
  3 讨论第112-114页
 第十章 近江牡蛎HMGB的原核表达、抗体制备及亚细胞定位第114-120页
  1 材料和方法第114-116页
   ·材料第114页
   ·方法第114-116页
  2 结果第116-119页
   ·原核表达载体的构建第116-117页
   ·HMGB的原核表达、纯化及多克隆抗体制备第117页
   ·亚细胞定位第117-119页
  3 讨论第119-120页
 第十一章 Ca-HMGB及其抗体在近江牡蛎抗感染免疫反应中的作用第120-130页
  1 材料和方法第121-123页
   ·试验动物第121-122页
   ·方法第122-123页
  2 结果第123-127页
   ·LPS和RLO刺激下Ca-HMGB mRNA表达量的变化第123页
   ·Western-blot检测RLO刺激单层血淋巴细胞培养液中HMGB蛋白水平第123-124页
   ·重组Ca-HMGB蛋白诱导近江牡蛎其它细胞因子mRNA表达量的变化第124-125页
   ·抗HMGB血清对近江牡蛎LITAF表达量的变化第125-126页
   ·流式细胞仪第126-127页
  3 讨论第127-130页
第五部分 近江牡蛎三个亲环蛋白的鉴定、表达及功能研究第130-150页
 第十二章 近江牡蛎三个亲环蛋白(Ca-CyPA,Ca-CyPB和Ca-PPIL3)的序列分析、原核表达及抗体制备第131页
 1 材料和方法第131-143页
   ·材料第132页
   ·方法第132-134页
  2 结果第134-142页
   ·Ca-CyPA,Ca-CyPB,Ca-PPIL3序列分析第134-137页
   ·同源性比较和进化树构建第137-140页
   ·原核表达载体的构建第140页
   ·原核表达、纯化及多克隆抗体制备第140-142页
  3 讨论第142-143页
 第十三章 Ca-CyPA,Ca-CyPB和Ca-PPIL3的组织表达及其在抗RLO感染中的作用第143-150页
  1 材料和方法第143-146页
   ·材料第143-144页
   ·方法第144-146页
  2 结果第146-148页
   ·Ca-CyPA、Ca-CyPB和Ca-PPIL3的组织分布第146页
   ·Ca-CyPA、Ca-CyPB、Ca-PPIL3在RLO刺激后的表达变化第146-148页
  3 讨论第148-150页
第六部分 近江牡蛎三个补体相关蛋白片段的序列分析、组织表达及功能研究第150-167页
 第十四章 近江牡蛎三个补体相关分子的序列分析第151-159页
  1 材料和方法第151-152页
   ·材料第151页
   ·方法第151-152页
  2 结果第152-157页
   ·序列结构分析第152-154页
   ·序列同源性比较和进化树分析第154-157页
  3 讨论第157-159页
 第十五章 CaClq1,CaClq2,CaC3的组织表达及其在抗RLO感染中的作用第159-167页
  1 材料和方法第159-162页
   ·材料第159-160页
   ·方法第160-162页
  2 结果第162-164页
   ·CaClq1,CaClq2,CaC3的组织分布第162页
   ·CaClq1,CaClq2和CaC3在RLO刺激后的表达变化第162-164页
  3 讨论第164-167页
全文小结第167-174页
 1 本研究的主要成果和结论第167-172页
 2 本研究的主要创新点第172-173页
 3 进一步研究方向第173-174页
参考文献第174-197页
附录 攻读博士学位期间发表的学术论文和专利第197页

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