摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-15页 |
第一部分 文献综述 | 第15-52页 |
1. 中华鳖概述 | 第16-19页 |
·中华鳖生物学特性 | 第16-17页 |
·我国中华鳖养殖现状及存在的主要问题 | 第17-19页 |
2. 爬行动物免疫学研究进展 | 第19-26页 |
·爬行动物的淋巴组织 | 第20页 |
·爬行动物的天然免疫反应 | 第20-23页 |
·发热对爬行动物的免疫学意义 | 第23-24页 |
·爬行动物的获得性免疫 | 第24-26页 |
3. TLRs分子及其信号转导和免疫激活 | 第26-35页 |
·Toll样受体 | 第26-27页 |
·TLRs结构及其配体 | 第27-31页 |
·TLRs分子信号传导 | 第31-32页 |
·TLRs与获得性免疫 | 第32-35页 |
4. 热休克蛋白70与免疫调节 | 第35-41页 |
·热休克蛋白的发现及分类 | 第35-36页 |
·热休克蛋白70的结构 | 第36页 |
·热休克蛋白的转录调控 | 第36-38页 |
·热休克蛋白70的免疫调节功能 | 第38-40页 |
·热休克蛋白在变温动物中的作用 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-52页 |
第二部分 试验研究 | 第52-144页 |
第一章 中华鳖tMyD88全长cDNA克隆及其组织表达差异分析 | 第53-78页 |
摘要 | 第53-54页 |
1. 材料与方法 | 第54-67页 |
·中华鳖处理和样品收集 | 第54页 |
·总RNA抽提 | 第54-55页 |
·tMyD88部分序列克隆 | 第55-59页 |
·tMyD88的3’RACE | 第59-60页 |
·tMyD88的5’RACE | 第60-64页 |
·tMyD88 ORF的Nested PCR扩增 | 第64-65页 |
·tMyD88序列分析 | 第65页 |
·tMyD88功能分析 | 第65-67页 |
·荧光定量PCR检测tMyD88 mRNA在不同组织中的表达 | 第67页 |
·数据处理与统计分析 | 第67页 |
2. 结果 | 第67-74页 |
·tMyD88部分序列克隆及其同源性和相似性分析 | 第67-69页 |
·tMyD88全长cDNA克隆 | 第69页 |
·tMyD88的序列分析 | 第69-72页 |
·tMyD88的生物学功能 | 第72-73页 |
·嗜水气单胞菌感染中华鳖后组织tMyD88mRNA表达差异分析 | 第73-74页 |
3. 讨论 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-78页 |
第二章 中华鳖热休克蛋白基因tHsc70、tGRP78和tHsp72鉴定及热应激对其表达的影响 | 第78-120页 |
摘要 | 第78-80页 |
1. 材料与方法 | 第80-92页 |
·中华鳖处理和样品收集 | 第80页 |
·总RNA抽提 | 第80页 |
·tHsc70、tGRP78和tHsp72基因克隆 | 第80-86页 |
·tHsc70、tGRP78和tHsp72序列分析 | 第86页 |
·tHsc70和tHsp72原核表达载体构建及重组蛋白纯化和免疫反应性分析 | 第86-90页 |
·组织蛋白提取及蛋白浓度测定 | 第90页 |
·中华鳖组织中tHsc70、tGRP78蛋白表达的SDS-PAGE和Western blotting分析 | 第90页 |
·中华鳖组织中tHsc70、tGRP78和tHsp72 mRNA表达差异分析 | 第90-92页 |
·数据处理和统计分析 | 第92页 |
2. 结果 | 第92-113页 |
·tHsc70全长cDNA克隆及序列分析 | 第92-97页 |
·tGRP78全长cDNA克隆及序列分析 | 第97-100页 |
·tHsp72全长cDNA克隆及序列分析 | 第100-103页 |
·tHsc70、tGRP78和tHsp72分子进化分析 | 第103页 |
·热激后中华鳖组织中tHsc70 mRNA转录和蛋白表达差异分析 | 第103-108页 |
·热激后中华鳖组织中tGRP78 mRNA转录和蛋白表达差异分析 | 第108-111页 |
·热激后中华鳖组织中tHsp72 mRNA表达差异分析 | 第111-113页 |
3. 讨论 | 第113-116页 |
参考文献 | 第116-120页 |
第三章 病原相关模式分子对中华鳖Toll样受体及其免疫相关基因表达的影响 | 第120-144页 |
摘要 | 第120-122页 |
1. 材料与方法 | 第122-125页 |
·中华鳖处理和样品收集 | 第122页 |
·总RNA抽提 | 第122页 |
·中华鳖tlr2、tlr3、tlr4和il-1β部分序列克隆 | 第122-123页 |
·中华鳖tlr2、tlr3、tlr4和il-1β序列分析 | 第123-124页 |
·中华鳖tlr2、tlr3、tlr4和il-1βmRNA荧光定量PCR分析 | 第124页 |
·病原相关模式分子刺激对中华鳖Toll样受体激活及其免疫相关基因表达分析 | 第124-125页 |
·数据处理与统计分析 | 第125页 |
2. 结果 | 第125-136页 |
·中华鳖tlr2、tlr3、tlr4和il-1β部分序列克隆 | 第125-128页 |
·中华鳖tlr2、tlr3和tlr4部分cDNA及其推断的氨基酸序列与其他脊椎动物相应分子序列相似性分析 | 第128-130页 |
·中华鳖tlr2、tlr3和tlr4分子进化分析 | 第130-131页 |
·中华鳖il-1β部分序列克隆及同源性分析 | 第131页 |
·中华鳖il-1β分子进化分析 | 第131-133页 |
·病原相关模式分子刺激对中华鳖Toll样受体、il-1β和tMyD88mRNA表达的影响 | 第133-135页 |
·不同浓度Poly(I:C)刺激对中华鳖热休克蛋白70分子mRNA表达的影响 | 第135-136页 |
·热激结合Poly(I:C)刺激对中华鳖外周血免疫相关基因表达的影响 | 第136页 |
3. 讨论 | 第136-140页 |
参考文献 | 第140-144页 |
全文结论 | 第144-145页 |
创新点 | 第145-146页 |
展望 | 第146-147页 |
作者简介 | 第147-148页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第148-150页 |
致谢 | 第150页 |