| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-28页 |
| ·帕金森症的发病机制 | 第16-24页 |
| ·α-syn蛋白异常是PD发病的成因 | 第16-19页 |
| ·线粒体缺陷与PD | 第19-23页 |
| ·氧化应激与PD | 第23-24页 |
| ·PD治疗现状及进展 | 第24-26页 |
| ·积雪草酸的结构与药理活性 | 第26-27页 |
| ·本课题研究思路 | 第27-28页 |
| 第二章 低剂量鱼藤酮诱导细胞线粒体变化的机制研究 | 第28-40页 |
| ·实验材料 | 第29-31页 |
| ·细胞株 | 第29页 |
| ·药品与试剂 | 第29-30页 |
| ·实验仪器 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-33页 |
| ·人神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y)培养 | 第31页 |
| ·鱼藤酮处理SH-SY5Y细胞 | 第31页 |
| ·MitoTracker Red法检测线粒体数量 | 第31页 |
| ·Clark氧电极法检测细胞耗氧量 | 第31-32页 |
| ·Western Blot法检测PGC-1α和SIRT1的表达 | 第32页 |
| ·DCFHDA法检测线粒体ROS生成 | 第32-33页 |
| ·分光光度法检测细胞内还原型GSH含量和总GSH/GSSG | 第33页 |
| ·统计方法 | 第33页 |
| ·实验结果 | 第33-37页 |
| ·低剂量鱼藤酮刺激线粒体增殖 | 第33-34页 |
| ·低剂量鱼藤酮诱导线粒体呼吸的增强 | 第34页 |
| ·低剂量鱼藤酮对细胞内PGC-1α和SIRT1表达的影响 | 第34-35页 |
| ·低剂量鱼藤酮刺激细胞内ROS生成 | 第35-36页 |
| ·低剂量鱼藤酮对细胞内GSH含量和GSH/GSSG比值的影响 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| ·本章小结 | 第38-40页 |
| 第三章 鱼藤酮诱导细胞线粒体损伤的机制研究 | 第40-52页 |
| ·实验材料 | 第40-41页 |
| ·细胞株 | 第40页 |
| ·药品与试剂 | 第40-41页 |
| ·实验仪器 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-44页 |
| ·鱼藤酮诱导SH-SY5Y细胞急性损伤模型的建立 | 第41页 |
| ·鱼藤酮诱导SH-SY5Y细胞慢性损伤模型建立 | 第41页 |
| ·MTT法检测细胞活性 | 第41-42页 |
| ·Annexin V-FITC染色法检测细胞凋亡 | 第42页 |
| ·DCFH-DA探针法检测胞内ROS含量 | 第42页 |
| ·MitoTracker Red法检测线粒体数量 | 第42页 |
| ·JC-1染色法测定线粒体膜电位 | 第42-43页 |
| ·胞浆和线粒体蛋白分离方法 | 第43页 |
| ·Western Blot法检测VDAC、BAX、α-syn和Cyto C的表达水平 | 第43页 |
| ·化学交联法检测VDAC的聚集 | 第43-44页 |
| ·统计方法 | 第44页 |
| ·实验结果 | 第44-50页 |
| ·鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞存活率下降 | 第44-45页 |
| ·鱼藤酮诱导SH-SY5Y细胞凋亡 | 第45页 |
| ·鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞内线粒体膜电位降低 | 第45-47页 |
| ·鱼藤酮诱导SH-SY5Y细胞内ROS的生成 | 第47页 |
| ·鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞中线粒体数目的降低 | 第47-48页 |
| ·鱼藤酮诱导细胞内BAX量的增加,VDAC量的下降和Cyto C的释放 | 第48-49页 |
| ·鱼藤酮诱导SH-SY5Y细胞内VDAC聚集 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| ·本章小结 | 第51-52页 |
| 第四章 AA保护线粒体对抗急性PD样细胞损伤的作用 | 第52-60页 |
| ·实验材料 | 第52页 |
| ·细胞株 | 第52页 |
| ·药品与试剂 | 第52页 |
| ·实验仪器 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-53页 |
| ·AA对鱼藤酮诱导的线粒体损伤的治疗作用 | 第52-53页 |
| ·实验结果 | 第53-57页 |
| ·AA对鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞损伤的神经保护作用 | 第53-54页 |
| ·AA对抗鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞凋亡 | 第54-55页 |
| ·AA抑制鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞内线粒体膜电位降低 | 第55-56页 |
| ·AA抑制鱼藤酮诱导的BAX表达水平的增加,逆转VDAC表达水平的下降 | 第56页 |
| ·AA对抗鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞内VDAC聚集 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| ·本章小结 | 第58-60页 |
| 第五章 AA保护线粒体对抗慢性PD样细胞损伤的作用 | 第60-70页 |
| ·实验材料 | 第60-61页 |
| ·细胞株 | 第60页 |
| ·药品与试剂 | 第60页 |
| ·实验仪器 | 第60-61页 |
| ·实验方法 | 第61页 |
| ·AA对鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞慢性损伤模型的处理 | 第61页 |
| ·Western Blot法检测细胞内蛋白的翻译水平 | 第61页 |
| ·结果 | 第61-66页 |
| ·AA对抗鱼藤酮诱导的ROS生成 | 第61-62页 |
| ·AA对抗鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞中线粒体膜电位的降低 | 第62-64页 |
| ·AA对抗鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞中线粒体数目的降低 | 第64-65页 |
| ·AA对抗鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞中α-syn过表达 | 第65页 |
| ·AA对抗鱼藤酮诱导的α-syn线粒体转位 | 第65-66页 |
| ·AA对抗鱼藤酮诱导的线粒体中Cyto C的释放 | 第66页 |
| ·讨论 | 第66-67页 |
| ·本章小结 | 第67-70页 |
| 第六章 AA对抗α-syn诱导的PD样神经损伤的作用和线粒体机制 | 第70-90页 |
| ·实验材料 | 第71-73页 |
| ·实验动物 | 第71-72页 |
| ·药品与试剂 | 第72页 |
| ·实验仪器 | 第72-73页 |
| ·实验方法 | 第73-76页 |
| ·PD果蝇模型的建立 | 第73页 |
| ·AA对果蝇模型PD样损伤的作用 | 第73页 |
| ·分光光度法检测细胞内还原型GSH含量 | 第73-74页 |
| ·分光光度法检测细胞内MDA含量 | 第74页 |
| ·离体线粒体的制备 | 第74页 |
| ·JC-1法检测线粒体膜电位 | 第74页 |
| ·荧光素酶法测定线粒体ATP生成 | 第74-75页 |
| ·DCFHDA法检测线粒体ROS生成 | 第75页 |
| ·线粒体肿胀度的检测 | 第75页 |
| ·Western Blot法检测线粒体中Cyto C的释放和α-syn在线粒体中的定位 | 第75页 |
| ·荧光标记AA的合成 | 第75-76页 |
| ·荧光显微镜观察荧光AA在细胞中的定位 | 第76页 |
| ·分子模拟法检测AA与VDAC的结合 | 第76页 |
| ·统计方法 | 第76页 |
| ·实验结果 | 第76-86页 |
| ·AA提高PD果蝇的攀爬能力 | 第76-78页 |
| ·AA延长PD果蝇的寿命 | 第78页 |
| ·AA对抗PD果蝇氧化还原的损伤 | 第78-79页 |
| ·AA对抗α-syn诱导的线粒体功能的损伤 | 第79-81页 |
| ·AA对抗α-syn诱导的线粒体肿胀 | 第81页 |
| ·AA对抗α-syn诱导的线粒体ROS的过量生成 | 第81-83页 |
| ·AA阻止α-syn诱导的线粒体中Cyto C的释放 | 第83页 |
| ·AA阻止α-syn的线粒体转位 | 第83-84页 |
| ·AA线粒体作用靶点的初步分析 | 第84-85页 |
| ·分子模拟法检测AA与VDAC的结合 | 第85-86页 |
| ·讨论 | 第86-88页 |
| ·本章小结 | 第88-90页 |
| 第七章 全文结论与展望 | 第90-92页 |
| ·全文总结 | 第90-91页 |
| ·展望 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-108页 |
| 致谢 | 第108-110页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第110-111页 |
