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木糖发酵酵母Scheffersomyces stipitis的转录本测序、磷酸化蛋白质组及基因关联性分析

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
表索引第13-14页
图索引第14-16页
英文缩略表第16-18页
第一章 绪论第18-42页
   ·燃料乙醇生产第18-23页
     ·能源消耗与石油资源的矛盾第18-19页
     ·生物质能源第19-20页
     ·木质纤维素乙醇生产第20-23页
   ·五碳糖的利用第23-28页
     ·五碳糖发酵第24-25页
     ·作为研究木糖发酵模式生物的S.stipitis第25-28页
   ·高通量基因组学研究技术第28-38页
     ·高通量测序技术第28-33页
     ·蛋白质组学研究技术第33-38页
   ·研究意义、目标和内容第38-42页
第二章 建立生物信息学分析平台第42-50页
   ·方法第42-44页
     ·硬件系统第42-43页
     ·配置运算环境第43页
     ·数据集第43-44页
     ·构建数据库管理系统第44页
   ·结果和讨论第44-49页
     ·分析平台的硬件规划第44-45页
     ·数据库结构第45-47页
     ·结合数据库和R软件开发分析程序第47-49页
   ·结论第49-50页
第三章 转录本测序和转录组分析第50-76页
   ·材料和方法第50-57页
     ·培养和处理酵母细胞第50-51页
     ·提取总RNA和纯化mRNA第51-52页
     ·构建cDNA文库和RNA-Seq测序第52页
     ·RNA-Seq数据基因组作图和归一化处理第52-53页
     ·发现新的转录本第53页
     ·差异转录分析第53页
     ·GO和代谢途径分析第53-54页
     ·实时荧光定量反转录PCR第54-57页
   ·结果和讨论第57-75页
     ·细胞培养第57-59页
     ·提取RNA第59页
     ·RNA-Seq结果概述第59-63页
     ·不同碳源下的转录组转录水平比较分析第63-65页
     ·GO注释的比较分析第65-69页
     ·转录本在染色体上的分布第69页
     ·糖代谢第69-72页
     ·qPCR验证RNA-Seq结果第72-75页
   ·结论第75-76页
第四章 预测蛋白质相互作用第76-84页
   ·方法第76-79页
     ·提取酿酒酵母蛋白质相互作用信息第76页
     ·酿酒酵母和S.stipitis本地BLASTP第76-77页
     ·基于基因的直系同源预测蛋白质相互作用第77页
     ·基于基因本体论注释预测蛋白质相互作用第77页
     ·整合转录组数据预测蛋白质相互作用第77页
     ·蛋白质互作网络中hub蛋白的聚类分析第77-78页
     ·蛋白质相互作用网络分析第78-79页
   ·结果和讨论第79-82页
     ·酿酒酵母和S.stipitis比较基因组分析第79页
     ·S.stipitis蛋白质相互作用第79-81页
     ·S.stipitis蛋白质相互作用的hub蛋白分类和作用规律第81-82页
     ·蛋白质相互作用倾向性分析第82页
   ·结论第82-84页
第五章 无标记定量磷酸化蛋白质组研究第84-103页
   ·材料和方法第84-89页
     ·菌株和培养条件第84页
     ·制备细胞总蛋白第84页
     ·蛋白质分级沉淀和胶内酶切第84-85页
     ·液内酶切和富集磷酸化多肽第85页
     ·nanoLC-MS/MS质谱条件第85-86页
     ·蛋白质数据库搜索和统计学分析第86-87页
     ·蛋白质组的蛋白质丰度定量第87-88页
     ·确定磷酸化修饰位点第88-89页
   ·结果和讨论第89-101页
     ·实验流程第89-90页
     ·蛋白质鉴定和丰度定量分析第90-94页
     ·提出改进的鉴定磷酸化修饰位点的算法Psco re第94-96页
     ·鉴定潜在磷酸化修饰位点第96-100页
     ·葡萄糖和木糖对磷酸化蛋白质磷酸化修饰水平的影响第100-101页
   ·结论第101-103页
第六章 基因关联性分析第103-124页
   ·方法第103-104页
     ·测定游离氨基酸和脂肪酸含量第103页
     ·提取KEGG代谢和蛋白质互作信息以及图形化展示第103-104页
   ·结果和讨论第104-122页
     ·参与糖利用的基因关联性分析第104-109页
     ·呼吸链和氧化磷酸化第109-111页
     ·参与氨基酸代谢的编码基因关联性分析第111-114页
     ·参与脂肪酸β-氧化、细胞组成和合成乙醇的编码基因关联性分析第114-120页
     ·S.stipitis的转录组和蛋白质组数据比较第120-122页
   ·结论第122-124页
第七章 全文结论第124-128页
   ·全文结论第124-126页
   ·论文研究创新点第126-128页
参考文献第128-134页
附录(培养基和溶液的配制)第134-135页
致谢第135-137页
作者简历第137页

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