中文摘要 | 第1-12页 |
Abstract | 第12-14页 |
1 前言 | 第14-40页 |
·大肠杆菌的抗原特性 | 第14-15页 |
·大肠杆菌的生长培养特性及生化特点 | 第15-16页 |
·大肠杆菌的生长培养特性 | 第15-16页 |
·生化特点 | 第16页 |
·大肠杆菌的致病性 | 第16-21页 |
·猪大肠杆菌致病性 | 第16-17页 |
·仔猪黄痢的临床症状及剖检变化 | 第16-17页 |
·仔猪白痢的临床症状及剖检变化 | 第17页 |
·猪水肿病的临床症状及剖检变化 | 第17页 |
·大肠杆菌致病机理 | 第17-21页 |
·外毒素 | 第17-18页 |
·内毒素 | 第18页 |
·黏附素 | 第18-19页 |
·外膜蛋白(OMP) | 第19-20页 |
·铁转运系统 | 第20-21页 |
·ColV 质粒 | 第21页 |
·大肠杆菌检测方法 | 第21-27页 |
·分离培养法 | 第21-22页 |
·免疫血清学检测技术 | 第22-24页 |
·间接血凝试验 | 第22页 |
·微量凝集试验 | 第22页 |
·酶免疫分析技术 | 第22-23页 |
·荧光免疫测定技术 | 第23页 |
·免疫胶体金标记技术 | 第23页 |
·免疫磁珠分离法 | 第23-24页 |
·分子生物学技术 | 第24-27页 |
·DNA 探针技术 | 第24页 |
·聚合酶链反应技术 | 第24-25页 |
·多重 PCR | 第25页 |
·荧光定量 PCR | 第25-26页 |
·基因芯片技术 | 第26页 |
·DNA 探针技术 | 第26页 |
·免疫胶体金技术 | 第26-27页 |
·大肠杆菌耐药性 | 第27-35页 |
·耐药性的产生 | 第27页 |
·耐药性产生的遗传机制 | 第27-29页 |
·基因突变产生的耐药机制 | 第28页 |
·耐药基因的捕获 | 第28-29页 |
·细菌产生耐药性的生化机制 | 第29-31页 |
·产生灭活酶 | 第29-30页 |
·改变细菌细胞壁的通透性 | 第30页 |
·菌体内抗菌药物作用的靶位结构改变 | 第30页 |
·细菌主动外排机制 | 第30-31页 |
·代谢途径或代谢状态改变 | 第31页 |
·抗菌药物的不恰当使用 | 第31页 |
·大肠杆菌耐药性现状及耐药性检测意义 | 第31-35页 |
·检测方法 | 第31-32页 |
·近年来大肠埃希氏菌药敏试验情况 | 第32-35页 |
·体外联合药敏试验 | 第35-40页 |
·体外联合药敏试验的目的及意义 | 第35-36页 |
·体外联合药敏试验的方法 | 第36页 |
·体外联合药敏试验中各种药物的介绍 | 第36-40页 |
2 材料和方法 | 第40-55页 |
·材料 | 第40页 |
·材料来源 | 第40页 |
·主要仪器 | 第40页 |
·主要试剂 | 第40页 |
·方法 | 第40-55页 |
·分离菌的纯化鉴定 | 第40-41页 |
·分离菌生化鉴定 | 第41页 |
·16s rRNA 方法鉴定 | 第41-44页 |
·细菌 DNA 提取 | 第41-42页 |
·PCR 扩增条件 | 第42页 |
·胶回收 PCR 产物 | 第42-43页 |
·PCR 产物连接 | 第43页 |
·连接产物转化 | 第43页 |
·质粒 DNA 提取 | 第43-44页 |
·阳性质粒酶切鉴定 | 第44页 |
·大肠杆菌耐药性分析 | 第44-48页 |
·大肠杆菌药物敏感性试验 | 第44-45页 |
·耐药基因引物设计 | 第45页 |
·细菌 DNA 组提取 | 第45-46页 |
·耐药基因 PCR 反应体系 | 第46页 |
·耐药基因反应条件 | 第46-48页 |
·大肠杆菌耐药性与质粒关系研究 | 第48-50页 |
·大肠杆菌耐药质粒提取 | 第48页 |
·耐药质粒转化 | 第48-49页 |
·转化菌耐药性分析 | 第49页 |
·转化细菌质粒提取 | 第49-50页 |
·转化细菌耐药基因检测 | 第50页 |
·提取质粒酶切 | 第50页 |
·体外最低抑菌浓度(MIC)测定 | 第50-53页 |
·抗菌药物储备液配制 | 第50-51页 |
·大肠杆菌对数生长期的测定 | 第51页 |
·加替沙星最小抑菌浓度(MIC)值测定 | 第51页 |
·盐酸左旋氧氟沙星最小抑菌浓度(MIC)值测定 | 第51-52页 |
·头孢噻肟钠最小抑菌浓度(MIC)值测定 | 第52页 |
·庆大霉素最小抑菌浓度(MIC)值测定 | 第52页 |
·丁胺卡那最小抑菌浓度(MIC)值测定 | 第52页 |
·磷霉素最小抑菌浓度(MIC)值测定 | 第52-53页 |
·两药的体外联合药敏试验 | 第53-55页 |
·加替沙星与磷霉素联合药敏 | 第53页 |
·加替沙星与丁胺卡那联合药敏 | 第53页 |
·加替沙星与庆大霉素联合药敏 | 第53-54页 |
·加替沙星与盐酸左旋氧氟沙星联合药敏 | 第54-55页 |
3 试验结果 | 第55-62页 |
·分离菌培养特性 | 第55页 |
·分离菌生化特性 | 第55-56页 |
·分离菌 16s rRNA 鉴定结果 | 第56-57页 |
·PCR 扩增结果 | 第56页 |
·重组质粒的构建与鉴定 | 第56-57页 |
·16s rRNA 测序结果 | 第57页 |
·大肠杆菌耐药试验结果 | 第57-58页 |
·大肠杆菌药物敏感性试验结果 | 第57页 |
·大肠杆菌耐药基因扩增结果 | 第57-58页 |
·转化菌耐药性研究 | 第58-60页 |
·分离株大肠杆菌质粒提取与转化 DH5α大肠杆菌质粒提取结果 | 第58页 |
·转化细菌质粒上面耐药基因检测 | 第58-59页 |
·转化菌药敏试验结果 | 第59-60页 |
·药物最小抑菌浓度结果 | 第60页 |
·加替沙星与 5 种抗生素联合应用效果 | 第60-62页 |
4 讨论 | 第62-64页 |
·分离鉴定 | 第62页 |
·大肠杆菌耐药性分析 | 第62-63页 |
·加替沙星与 5 种抗生素联合应用效果 | 第63-64页 |
5 结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
研究生期间发表论文 | 第75页 |