中文摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-30页 |
·BST-2 蛋白 | 第13-18页 |
·BST-2 蛋白的发现 | 第13页 |
·BST-2 的研究现状: | 第13-18页 |
·BST-2 基因: | 第13页 |
·BST-2 分子结构: | 第13-14页 |
·BST-2 的表达: | 第14-15页 |
·BST-2 抗病毒机制: | 第15-16页 |
·BST-2 的其它特征: | 第16-18页 |
·BST-2 研究前景: | 第18页 |
·禽流感 | 第18-24页 |
·禽流感病毒病原学特征 | 第19页 |
·禽流感流行病学 | 第19-20页 |
·禽流感的流行状况 | 第20-21页 |
·禽流感跨种间传播 | 第21-23页 |
·H9N2 禽流感病毒基因的演化 | 第23-24页 |
·猪繁殖与呼吸综合症 | 第24-27页 |
·猪繁殖与呼吸综合症病毒病原学特征 | 第24-25页 |
·猪繁殖与呼吸综合症病毒基因结构 | 第25页 |
·猪繁殖与呼吸综合症防治措施 | 第25页 |
·猪繁殖与呼吸综合症免疫治疗法 | 第25-27页 |
·水泡性口炎病毒 | 第27-30页 |
·水泡性口炎病毒病原学特征 | 第27-28页 |
·水泡性口炎流行病学 | 第28页 |
·水泡性口炎病毒的应用 | 第28-29页 |
·水泡性口炎病毒的检测 | 第29-30页 |
2 材料与方法 | 第30-48页 |
·试验材料 | 第30-34页 |
·菌株、病毒、细胞 | 第30页 |
·载体 | 第30页 |
·实验动物 | 第30页 |
·实验试剂及耗材 | 第30页 |
·试验所用溶液及其配制 | 第30-33页 |
·主要仪器 | 第33-34页 |
·试验方法 | 第34-48页 |
·BST-2 基因的克隆 | 第34-36页 |
·设计引物 | 第34页 |
·BST-2 蛋白的诱导 | 第34页 |
·样品的 RNA 提取 | 第34-35页 |
·BST-2 基因的 RT-PCR 扩增 | 第35-36页 |
·BST-2 基因片段 PCR 产物的纯化回收 | 第36页 |
·目的基因的连接、转化及鉴定 | 第36-40页 |
·目的基因与 pMD18-T 载体的连接体系 | 第36-37页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备: | 第37页 |
·连接产物转化 | 第37页 |
·重组质粒 DNA 的提取 | 第37-38页 |
·重组质粒的鉴定 | 第38-39页 |
·阳性克隆序列测序 | 第39页 |
·BST-2 基因片段的回收 | 第39页 |
·重组 pcDNA3.1-BST-2 质粒的构建及鉴定 | 第39-40页 |
·BST-2 蛋白的表达 | 第40-43页 |
·重组 pcDNA3.1-BST-2 质粒转染 HEK293T 细胞 | 第40-41页 |
·IFA 检测猪重组 BST-2 蛋白的瞬时表达 | 第41页 |
·融合蛋白的纯化 | 第41页 |
·BST-2 蛋白浓度的测定 | 第41-42页 |
·纯化后的的重组 BST-2 蛋白的 SDS-PAGE 鉴定 | 第42-43页 |
·纯化后的的重组 BST-2 蛋白的 Western blot 鉴定 | 第43页 |
·生物学活性的检测 | 第43-48页 |
·微量细胞病变抑制法测定抗病毒活性: | 第43-44页 |
·CCK-8 测定细胞存活 | 第44页 |
·禽流感病毒增殖抑制实验 | 第44-45页 |
·BST-2 协同干扰素抗病毒活性的测定 | 第45页 |
·中和试验 | 第45-48页 |
·重组 BST-2 蛋白免疫小鼠 | 第45-46页 |
·检测三免后血清抗体效价 | 第46-47页 |
·活性测定 | 第47-48页 |
3 结果 | 第48-56页 |
·BST-2 基因的 RT-PCR 扩增 | 第48页 |
·重组质粒 PCDNA-BST-2 的构建与鉴定 | 第48-49页 |
·重组质粒 PCDNA-BST-2 瞬时表达的检测 | 第49页 |
·重组 BST-2 蛋白的提取及鉴定 | 第49-50页 |
·生物学活性鉴定 | 第50-56页 |
·抗病毒功能检测 | 第50-52页 |
·CCK-8 检测 BST-2 抗病毒功能 | 第52页 |
·BST-2 对鸡胚中禽流感病毒增殖抑制实 | 第52-53页 |
·BST-2 协同干扰素抗病毒活性 | 第53-54页 |
·中和试验 | 第54-56页 |
4 讨论 | 第56-58页 |
5 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-70页 |
附录 | 第70-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
研究生期间发表论文 | 第72页 |