| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 文献综述 | 第11-22页 |
| 第一章 鸡球虫病的研究概况 | 第11-22页 |
| ·鸡球虫病研究概况 | 第11-13页 |
| ·鸡球虫病病原概述 | 第11-12页 |
| ·鸡球虫生活史 | 第12-13页 |
| ·鸡球虫基因的研究概况 | 第13-16页 |
| ·虫体的表面抗原基因 | 第14-15页 |
| ·管家基因 | 第15页 |
| ·细胞器抗原基因 | 第15-16页 |
| ·鸡球虫病的疫苗研究进展 | 第16-20页 |
| ·活体疫苗 | 第17-19页 |
| ·亚单位疫苗 | 第19页 |
| ·重组疫苗 | 第19页 |
| ·核酸疫苗 | 第19-20页 |
| ·展望 | 第20-22页 |
| 试验研究 | 第22-51页 |
| 第二章 鸡柔嫩艾美耳球虫杨凌株RB1-a 基因的克隆及序列分析 | 第22-33页 |
| ·材料 | 第22-24页 |
| ·实验所用虫株和试验动物 | 第22页 |
| ·菌株、载体和所用分子试剂 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·培养基及配制 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳所需材料 | 第23-24页 |
| ·方法 | 第24-27页 |
| ·引物的设计与合成 | 第24页 |
| ·球虫卵囊的复苏与纯化 | 第24页 |
| ·E. tenella 杨凌株子孢子总RNA 的提取 | 第24-25页 |
| ·RB1-a 基因的 RT-PCR | 第25页 |
| ·RT-PCR 产物的回收纯化 | 第25-26页 |
| ·RT-PCR 产物与pMD18-T simple Vector 的连接 | 第26页 |
| ·连接产物转化E.coli DH5α | 第26页 |
| ·转化克隆的PCR 鉴定 | 第26-27页 |
| ·质粒的双酶切鉴定 | 第27页 |
| ·阳性克隆的序列测定及分析 | 第27页 |
| ·结果 | 第27-31页 |
| ·RB1-a 的 RT-PCR 结果 | 第27-28页 |
| ·转化菌落的PCR 鉴定 | 第28页 |
| ·转化克隆的双酶切鉴定 | 第28页 |
| ·RB1-a 基因的序列分析 | 第28-31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| ·小结 | 第32-33页 |
| 第三章 鸡柔嫩艾美耳球虫杨凌株RB1-a 基因在大肠埃希菌中的表达 | 第33-44页 |
| ·材料 | 第33-35页 |
| ·菌株、载体和所用分子试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33页 |
| ·常规化学试剂 | 第33-34页 |
| ·SDS-PAGE 所需材料 | 第34页 |
| ·免疫印迹所需材料 | 第34页 |
| ·融合蛋白纯化所用溶液 | 第34-35页 |
| ·方法 | 第35-39页 |
| ·RB1-a 基因片段的扩增 | 第35页 |
| ·载体的制备 | 第35-36页 |
| ·pET-32a(+)与RB1-a 的连接 | 第36页 |
| ·连接产物转化入E. coli BL21 | 第36页 |
| ·转化克隆的PCR 鉴定 | 第36页 |
| ·质粒的酶切鉴定 | 第36-37页 |
| ·RB1-a 在E.coli BL21 的诱导表达 | 第37页 |
| ·重组蛋白的SDS-PAGE 检测 | 第37页 |
| ·重组蛋白表达产物的可溶性分析 | 第37-38页 |
| ·重组蛋白的大量表达和纯化 | 第38-39页 |
| ·蛋白质浓度的检测 | 第39页 |
| ·结果 | 第39-42页 |
| ·RB1-a 基因片段的扩增结果 | 第39-40页 |
| ·转化菌落的PCR 鉴定和质粒的酶切鉴定 | 第40页 |
| ·RB1-a 重组大肠埃希菌的诱导表达纯化和Western blot 鉴定 | 第40-42页 |
| ·蛋白质浓度检测 | 第42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 第四章 RB1-a 融合蛋白的免疫保护性试验 | 第44-51页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·所需材料及仪器 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-46页 |
| ·试验动物及分组 | 第44页 |
| ·试验设计 | 第44页 |
| ·抗球虫效果的判定 | 第44-46页 |
| ·结果 | 第46-49页 |
| ·临床症状观察结果 | 第46页 |
| ·鸡只增重变化 | 第46页 |
| ·盲肠病变计分 | 第46-48页 |
| ·OPG 值测定结果 | 第48-49页 |
| ·重组蛋白免疫对球虫感染的综合保护效果 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 缩略语英汉对照表 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
