| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-26页 |
| ·禽流感病毒的研究进展 | 第12-20页 |
| ·流感病毒的生物性质 | 第12-13页 |
| ·流感病毒的形态与结构 | 第13-14页 |
| ·临床症状和病理变化 | 第14页 |
| ·流感病毒蛋白的功能 | 第14-17页 |
| ·流感病毒的变异 | 第17-18页 |
| ·H5N1亚型流感病毒在我国的起源、分布和扩散 | 第18-20页 |
| ·基因工程抗体的研究进展 | 第20-25页 |
| ·单链抗体的产生 | 第20-21页 |
| ·单链抗体的结构特点 | 第21-22页 |
| ·单链抗体的来源 | 第22-23页 |
| ·单链抗体研究进展 | 第23-25页 |
| ·研究目的和意义 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-40页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·质粒与菌株 | 第26页 |
| ·试验动物及细胞系 | 第26页 |
| ·试验所用毒株 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-40页 |
| ·流感病毒株的选择 | 第28页 |
| ·DNA疫苗的制备 | 第28-29页 |
| ·Balb/c小鼠的免疫程序 | 第29页 |
| ·抗原制备 | 第29页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第29-33页 |
| ·鼠单抗轻链和重链可变区的克隆 | 第33-36页 |
| ·3F7 ScFv基因构建 | 第36-37页 |
| ·pET30a-3F7-HL重组质粒构建 | 第37-38页 |
| ·单链抗体蛋白的表达 | 第38-39页 |
| ·3F7 ScFv蛋白的HI效价测定 | 第39页 |
| ·3F7 ScFv蛋白中和活性测定 | 第39-40页 |
| 3 结果 | 第40-53页 |
| ·杂交瘤细胞株的制备 | 第40-44页 |
| ·H5N1亚型免疫毒株的选择 | 第40页 |
| ·纯化抗原的蛋白含量测定 | 第40-41页 |
| ·HA基因的PCR扩增和测序结果 | 第41页 |
| ·重组质粒pCI-HA双酶切鉴定结果 | 第41-42页 |
| ·重组质粒pCI-HA瞬时表达结果 | 第42页 |
| ·杂交瘤细胞的制备 | 第42-43页 |
| ·3F7杂交瘤细胞间接ELISA结果 | 第43页 |
| ·3F7杂交瘤细胞培养上清及腹水效价 | 第43页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第43-44页 |
| ·杂交瘤细胞株分泌单克隆抗体的稳定性 | 第44页 |
| ·单克隆抗体的亚类 | 第44页 |
| ·单克隆抗体细胞染色体分析 | 第44页 |
| ·pCI-3F7-HL表达系统的构建 | 第44-53页 |
| ·VH和VL基因的PCR扩增 | 第44-45页 |
| ·重组质粒pMD18T-3F7-VH和pMD18T-3F7-VL酶切鉴定结果 | 第45页 |
| ·pMD18T-3F7 VH和pMD18T-3F7 VL基因序列分析 | 第45-49页 |
| ·3F7 ScFv构建结果 | 第49页 |
| ·pET30a-3F7-HL重组质粒的酶切鉴定结果 | 第49-50页 |
| ·pET30a-3F7-HL重组质粒基因序列分析 | 第50-51页 |
| ·3F7 ScFv表达及纯化结果 | 第51页 |
| ·3F7 ScFv血凝抑制试验结果 | 第51-52页 |
| ·3F7 ScFv病毒中和实验结果 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| ·关于杂交瘤细胞株的建立 | 第53-54页 |
| ·3F7-HL-pET单链抗体原核表达系统的构建 | 第54-55页 |
| ·ScFv基因序列的分析 | 第54页 |
| ·3F7ScFv免疫学活性 | 第54-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 附录 | 第61-68页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第68页 |
