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水稻无孢子生殖相关基因的研究

中文摘要第1-12页
英文摘要第12-15页
第1章 植物无融合生殖研究进展第15-47页
   ·什么是无融合生殖?第15页
   ·无融合生殖现象的普遍性第15-17页
   ·无融合生殖的分类第17-18页
   ·无融合生殖在农业生产上潜在的应用价值第18-21页
   ·无融合生殖性状的研究方法第21-22页
   ·绿毛山柳菊属植物,无孢子生殖和自发配子体单性生殖的模式植物第22-23页
   ·兼性无融合生殖植物的不同后代类型第23-25页
   ·无融合生殖植物细胞类型同一性的早期线索第25-26页
   ·有性生殖和无融合生殖途径间的分子学联系第26-29页
   ·来自胚珠其它组织的信号第29-30页
   ·无融合生殖现象的遗传学基础第30-33页
   ·为什么配子体无融合生殖植物都是多倍体?第33-35页
   ·无融合生殖基因的识别第35-37页
   ·诱导无融合生殖突变体策略第37-38页
   ·作物中导入无融合生殖性状的发展前景第38页
 参考文献(Reference):第38-47页
第2章 MSP1编码蛋白配体的识别、时空表达及功能研究第47-87页
   ·前言第47-49页
   ·材料与方法第49-58页
     ·材料的种植和取样第49-50页
     ·显微镜操作第50页
     ·BLAST和系统进化树的构建第50页
     ·RNA提取、RT-PCR和离体转录第50-52页
     ·RNA原位杂交第52-53页
     ·酵母双杂交(Y2H)和双分子荧光互补分析(BiFC)第53-55页
       ·入门载体的构建第53页
       ·酵母双杂交第53-54页
       ·双分子荧光互补分析(BiFC)第54-55页
     ·水稻OsTDL1A基因的RNA干扰第55-58页
       ·RNA干扰载体的构建第55-56页
       ·农杆菌介导的水稻遗传转化第56-57页
       ·RNA干扰材料的筛选第57-58页
   ·结果第58-74页
     ·水稻中存在着两个拟南芥TPD1同源基因:OsTDL1A和OsTDL1B第58-60页
     ·OsTDL1A,OsTDL1B同MSP1在部分组织中共表达第60-63页
     ·MSP1,OsTDL1A和OsTDL1B在幼穗中的转录部位研究第63-65页
     ·OsTDL1A与MSP1富亮氨酸重复区域存在直接的互作关系第65-68页
       ·亚细胞定位的预测第65-66页
       ·酵母双杂交分析第66-67页
       ·洋葱表皮细胞内的双分子荧光互补分析第67-68页
     ·RNA干扰抑制OsTDL1A在幼穗中的转录水平第68-71页
       ·OsTDL1A RNA干扰载体的构建第68-69页
       ·RNA干扰植株的分子生物学检测第69-71页
     ·OsTDL1A RNAi植株胚珠内产生与msp1突变体相同的表现型第71-74页
   ·讨论第74-79页
     ·大孢子母细胞和无孢子生殖起始细胞的比较第74-75页
     ·OsTDL1A干扰植株能恢复雄性可育第75页
     ·MSL1基因的识别第75-76页
     ·OsTDL1A同MSP1基因富亮氨酸重复区域在植物体内互作第76-77页
     ·水稻无孢子生殖的诱导第77-79页
 附加信息第79-82页
 参考文献(Reference)第82-87页
第3章 MSP1基因起始密码子上游序列及其激酶域调控功能的研究第87-109页
   ·引言第87-88页
   ·材料与方法第88-93页
     ·小量基因组DNA的提取第88-89页
       ·化学试剂的准备第88页
       ·小量基因组DNA的提取第88-89页
     ·日本晴和7个野生稻MSP1基因启动子的克隆第89页
     ·Southern杂交第89-90页
     ·MSP1转录起始位点的识别第90页
     ·双向电泳第90-93页
       ·总蛋白质的提取第90-91页
       ·第一向和第二向电泳第91-92页
       ·胶的染色第92页
       ·蛋白质的定量与定性分析第92-93页
   ·结果第93-103页
     ·聚合酶链式反应(PCR)扩增假定的启动子区域第93-95页
     ·MSP1假定启动子区域的克隆及Southern杂交验证第95-97页
     ·不同基因组野生稻MSP1假定启动子区域的序列比较分析第97-98页
     ·MSP1上游基因转录起始位点的确定第98-101页
     ·MSP1纯合突变体及野生型的蛋白表达分析第101-103页
   ·讨论第103-107页
     ·不同基因组野生稻msp1启动子区域的进化第103-104页
     ·MSP1基因结构的预测第104-106页
     ·野生型和突变体蛋白表达的差异第106-107页
 参考文献(Reference)第107-109页
第4章 水稻腈水解酶基因的识别、表达和细胞学定位第109-122页
   ·引言第109-110页
   ·材料与方法第110-111页
     ·材料第110页
     ·BLAST搜索和DNA序列鉴定第110页
     ·系统进化树的构建和基因结构画图第110页
     ·RNA提取和RT-PCR第110-111页
   ·结果第111-117页
     ·水稻腈水解酶基因的识别第111-112页
     ·水稻腈水解酶基因的结构分析第112-114页
     ·水稻腈水解酶基因的表达分析第114-115页
     ·水稻腈水解酶基因mRNA的细胞学定位:RNA原位杂交第115-117页
   ·讨论第117-119页
 参考文献(References):第119-122页
附录A插图目录第122-124页
附录B插图目录第124页

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