豇豆胰蛋白酶抑制剂基因及几丁质酶基因转化欧美杨的研究
| 英文缩略表 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第13-31页 |
| ·杨树的组织培养 | 第14-16页 |
| ·组织培养在杨树上的应用 | 第14页 |
| ·杨树组织培养技术 | 第14-16页 |
| ·杨树基因工程育种 | 第16-21页 |
| ·外源基因转化技术 | 第16-18页 |
| ·基因工程在杨树中的应用 | 第18-21页 |
| ·抗虫育种 | 第18-19页 |
| ·抗病及其它 | 第19-21页 |
| ·植物蛋白酶抑制剂研究进展 | 第21-25页 |
| ·植物蛋白酶抑制剂的作用与分类 | 第21-23页 |
| ·植物蛋白酶抑制剂在基因工程中的应用 | 第23-25页 |
| ·几丁质酶研究进展 | 第25-27页 |
| ·植物几丁质酶的特性 | 第25-26页 |
| ·几丁质酶与植物的防卫反应机制 | 第26页 |
| ·植物转几丁质酶基因工程的研究 | 第26-27页 |
| ·选题依据 | 第27-31页 |
| ·转化基因的选择 | 第28-29页 |
| ·植物受体的选择 | 第29页 |
| ·基因转化方法的选择 | 第29-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-43页 |
| ·材料 | 第31-36页 |
| ·植物材料 | 第31页 |
| ·昆虫材料 | 第31页 |
| ·菌株与质粒 | 第31-32页 |
| ·细菌培养基 | 第32页 |
| ·植物激素和植物培养基 | 第32-33页 |
| ·植物激素 | 第33页 |
| ·植物培养基 | 第33页 |
| ·试剂 | 第33-35页 |
| ·抗生素 | 第33页 |
| ·植物基因组 DNA 提取液 | 第33-34页 |
| ·大肠杆菌质粒提取液 | 第34页 |
| ·提取农杆菌双元载体质粒试剂 | 第34页 |
| ·电泳缓冲液配制 | 第34-35页 |
| ·Southern 杂交试剂 | 第35页 |
| ·GUS 染色液的配制 | 第35页 |
| ·酶与生化试剂 | 第35页 |
| ·PCR 引物 | 第35页 |
| ·仪器 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-43页 |
| ·欧美107 杨高频再生体系的建立 | 第36-37页 |
| ·组培苗的初步获得 | 第36页 |
| ·最佳激素培养体系的确立 | 第36-37页 |
| ·单一激素敏感性试验 | 第36-37页 |
| ·激素对叶片芽分化的影响 | 第37页 |
| ·激素对茎尖生长的影响 | 第37页 |
| ·组培苗根的诱导 | 第37页 |
| ·农杆菌介导法转基因 | 第37-38页 |
| ·CpTI 基因的转化 | 第37-38页 |
| ·几丁质酶基因的转化 | 第38页 |
| ·抗生素筛选 | 第38页 |
| ·抑菌性抗生素(头孢霉素)敏感性试验 | 第38页 |
| ·选择性抗生素(卡那霉素、潮霉素)敏感性试验 | 第38页 |
| ·转化植株的分子检测 | 第38-42页 |
| ·大肠杆菌 DH5α感受态细胞的制备及转化 | 第38-39页 |
| ·碱法提取少量质粒DNA | 第39页 |
| ·提取农杆菌双元载体质粒 | 第39-40页 |
| ·植物基因组 DNA 的提取 | 第40页 |
| ·PCR 检测 | 第40-41页 |
| ·PCR-Southern 检测 | 第41-42页 |
| ·GUS 基因稳定表达的组织化学染色 | 第42页 |
| ·抗虫生物活性测试 | 第42-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-60页 |
| ·欧美107 杨高频再生体系的建立 | 第43-53页 |
| ·最佳激素培养体系的确立 | 第43-50页 |
| ·单一激素的影响 | 第43-44页 |
| ·激素对叶片芽再生的影响 | 第44-47页 |
| ·激素对茎尖生长的影响 | 第47-49页 |
| ·激素对根的诱导 | 第49-50页 |
| ·其他理化因素的影响 | 第50-51页 |
| ·玻璃化问题的解决 | 第51-52页 |
| ·苗龄对107 杨生长和分化的影响 | 第52-53页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化体系的初步建立 | 第53-60页 |
| ·转CpTI 基因抗虫植株的获得 | 第53-58页 |
| ·卡那霉素(Km)选择压的确定 | 第53-54页 |
| ·抑菌性抗生素的选择 | 第54页 |
| ·叶片的预培养 | 第54页 |
| ·卡那抗性植株的获得 | 第54-55页 |
| ·Km抗性植株的分子生物学鉴定 | 第55-56页 |
| ·转基因植株的室内饲虫试验 | 第56-58页 |
| ·几丁质酶基因的转化 | 第58-60页 |
| ·潮霉素(Hyg)对欧美107 杨的影响 | 第58-59页 |
| ·GUS 染色筛选转化植株 | 第59-60页 |
| 4. 讨论 | 第60-64页 |
| ·欧美 107 杨基因转化受体系统的建立 | 第60-61页 |
| ·多价基因的转化 | 第61-62页 |
| ·单基因的多功能 | 第62-63页 |
| ·下一步工作设想 | 第63-64页 |
| 5. 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第79页 |
