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番茄中BR相关基因的遗传转化研究

摘要第1-9页
Abstract第9-10页
0 前言第10-11页
1 文献综述第11-22页
   ·BR信号转导研究进展第11-14页
     ·BRI1介导的BR信号转导途径第11-13页
       ·BR信号的感知第11-12页
       ·BR信号从细胞膜到细胞质的转导第12页
       ·BR信号在细胞核中对诱导基因表达的调控第12-13页
     ·不依赖于BRI1的BR信号转导途径第13页
     ·BR与其它信号的相互作用第13页
     ·小结与展望第13-14页
   ·番茄遗传转化研究进展第14-18页
     ·农杆菌介导的番茄遗传转化研究第15-17页
       ·延缓成熟与衰老的研究第15页
       ·抗病毒研究第15页
       ·抗真菌、抗细菌研究第15-16页
       ·抗虫研究第16页
       ·抗除草剂研究第16页
       ·抗逆研究第16页
       ·改良品质的研究第16-17页
       ·雄性不育性的研究第17页
       ·其它方面的研究第17页
     ·利用花粉管导入法进行的番茄遗传转化研究第17页
     ·番茄基因工程展望第17-18页
   ·根癌农杆菌Ti质粒介导的遗传转化机理研究进展第18-22页
     ·根癌农杆菌Ti质粒第18页
     ·Ti质粒介导的遗传转化机理第18-21页
       ·植物创伤细胞分泌酚类化合物诱导Vir区基因的表达第19页
       ·Vir区基因的活化导致T-DNA的加工和转移第19-20页
       ·T-DNA进入植物细胞后整合到核DNA上第20页
       ·T-DNA在植物细胞中的表达第20-21页
     ·Ti质粒介导的遗传转化的应用和展望第21-22页
2 番茄离体培养植株再生体系的建立第22-28页
   ·材料与方法第22-23页
     ·无菌苗的获得第22页
     ·芽分化培养基的组成第22页
     ·外植体的离体再生(即不定芽的分化)第22页
     ·不定芽(苗)的继代培养第22-23页
     ·不定芽(苗)的生根培养与移栽第23页
   ·结果与分析第23-26页
     ·番茄子叶、下胚轴外植体的芽分化第23-25页
     ·不定芽(苗)的生根培养与再生苗的移栽第25-26页
   ·讨论第26-28页
     ·关于番茄种子发芽第26页
     ·关于番茄外植体愈伤组织的诱导和不定芽的分化第26-28页
3 BZR1/bzr1基因植物表达载体的鉴定与工程菌液的制备第28-36页
   ·菌株与质粒第28页
   ·LB培养基与抗生素第28-29页
     ·LB培养基(Luria-Bertani)第28页
     ·抗生素母液的配制与保存第28-29页
   ·含bzr1 基因表达质粒35S-BZR1-CFP的鉴定第29-32页
     ·菌株的活化与菌液的培养第29页
     ·质粒DNA的少量抽提第29-30页
     ·限制性内切核酸酶酶切鉴定阳性克隆第30-32页
   ·含bzr1 基因表达质粒35S-BZR1-CFP的鉴定第32-33页
     ·菌株的活化与菌液的培养第32页
     ·质粒DNA的少量抽提第32页
     ·限制性内切酶酶切鉴定阳性克隆第32-33页
   ·农杆菌的三亲杂交转化第33页
     ·农杆菌LBA4404菌液的培养第33页
     ·含辅助质粒pRK2013的HB101菌液的培养第33页
     ·含目的基因表达质粒的大肠杆菌DH5α菌液的培养第33页
     ·三亲杂交转化第33页
   ·农杆菌中质粒的鉴定第33-34页
     ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备第33-34页
       ·受体菌的培养第33页
       ·感受态细胞的制备第33-34页
     ·三亲杂交转化的农杆菌培养液中质粒DNA的少量制备第34页
     ·质粒DNA转化大肠杆菌DH5α感受态细胞及其筛选培养第34页
     ·转化的感受态细胞中目的质粒的抽提与鉴定第34页
       ·转化的大肠杆菌菌液的培养第34页
       ·转化的感受态细胞质粒DNA的抽提第34页
       ·限制性内切酶酶切鉴定第34页
   ·小结第34-35页
   ·讨论第35-36页
4 番茄遗传转化体系的建立第36-45页
   ·材料与方法第36-37页
     ·植物材料、菌株及抗生素第36页
     ·培养基第36页
     ·子叶、下胚轴不定芽分化的Kan筛选浓度的确定第36页
     ·抗生素Amp的抑菌浓度的确定第36-37页
     ·不同预培养时间与共培养时间的比较第37页
     ·番茄转化植株的获得第37页
   ·结果与分析第37-42页
     ·番茄子叶、下胚轴不定芽分化的Kan筛选浓度的确定第37-38页
     ·不同浓度Amp的抑菌效果及其对番茄子叶、下胚轴不定芽分化的影响第38-40页
     ·预培养和共培养时间组合对番茄子叶、下胚轴外植体不定芽分化的影响第40-41页
     ·转基因植株的获得第41-42页
   ·讨论第42-45页
     ·褐变第42-43页
     ·抑菌剂Amp对番茄外植体分化的影响第43页
     ·预培养和共培养影响植物遗传转化第43-44页
     ·番茄外植体子叶和下胚轴遗传转化效率的比较第44-45页
5 番茄BR相关基因转化植株的PCR快速检测第45-49页
   ·材料与方法第45-47页
     ·植物材料第45页
     ·植物总DNA提取(SDS法微量提取及纯化)第45-46页
     ·转化植株的PCR检测第46-47页
   ·结果与分析第47-48页
     ·植物基因组DNA的提取第47页
     ·转化植株的PCR检测第47-48页
   ·讨论第48-49页
6 后续研究第49-50页
参考文献第50-55页
缩略词第55-57页
致谢第57页

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