摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-47页 |
1 褐飞虱对水稻的取食行为 | 第14-17页 |
2 植物对虫害的反应 | 第17-21页 |
3 植物昆虫互作的分子机理 | 第21-33页 |
4 挥发物:诱导直接和间接的防御反应 | 第33-36页 |
5 植物对昆虫反应的分子研究进展 | 第36-39页 |
6 植物功能基因组学中的基因表达研究 | 第39-44页 |
·基于mRNA水平上的基因表达研究 | 第39-43页 |
·基于蛋白质水平上的基因表达研究 | 第43页 |
·基于突变体基础上的基因表达研究 | 第43-44页 |
·生物信息学与基因表达研究 | 第44页 |
7 本研究的目的和意义 | 第44-47页 |
第二章 SSH库的构建及抗褐飞虱相关基因的筛选 | 第47-74页 |
1 材料与方法 | 第48-53页 |
2 结果与分析 | 第53-70页 |
·RNA的提取及电泳 | 第53页 |
·mRNA的提取 | 第53-54页 |
·抑制差减杂交文库随机克隆的PCR分析 | 第54页 |
·用Tester和Driver mRNA筛选差减文库 | 第54-56页 |
·褐飞虱诱导的基因分类及定位 | 第56-58页 |
·Northern杂交验证 | 第58-68页 |
·基因表达的时间段分析 | 第68-69页 |
·特异基因对不同处理的反应 | 第69-70页 |
3 讨论 | 第70-74页 |
第三章 褐飞虱诱导的水稻cDNA文库的构建及锌指蛋白基因的分离 | 第74-84页 |
1 材料与方法 | 第75-78页 |
2 结果与分析 | 第78-82页 |
·总RNA和cDNA的的鉴定 | 第78-79页 |
·cDNA文库的质量 | 第79页 |
·cDNA文库插入片段的酶切分析 | 第79-80页 |
·BPHiw001 cDNA克隆的筛选及相关特性分析 | 第80页 |
·Os-Bi2全长cDNA的分离 | 第80-82页 |
·Northern杂交结果分析 | 第82页 |
3 讨论 | 第82-84页 |
第四章 褐飞虱诱导的水稻RH3基因的克隆及其表达特性研究 | 第84-97页 |
1 材料 | 第85页 |
2 方法 | 第85-86页 |
3 mRNA 原位杂交 | 第86-90页 |
4 结果与分析 | 第90-95页 |
·Southern杂交分析 | 第90-91页 |
·RH3基因的全长的分离 | 第91-92页 |
·褐飞虱取食和各种处理对RH3表达的影响 | 第92-94页 |
·RH3在组织中的表达情况 | 第94-95页 |
5 讨论 | 第95-97页 |
第五章 含CBS域且受褐飞虱诱导的OsBi1基因的分离及相关特性分析 | 第97-106页 |
1 材料 | 第97页 |
2 方法 | 第97-98页 |
3 结果与分析 | 第98-105页 |
·Os-Bi1基因的拷贝数 | 第98页 |
·Os-Bi1的染色体定位 | 第98-100页 |
·Os-Bi1 cDNA全长的分离 | 第100-102页 |
·基因Os-Bi1的表达模式分析 | 第102页 |
·激素与胁迫处理 | 第102-103页 |
·Os-Bi1在组织中的表达情况 | 第103-105页 |
4 讨论 | 第105-106页 |
第六章 Os-nc1基因全长的分离及相关特性 | 第106-118页 |
1 材料与方法 | 第107-111页 |
2 结果与分析 | 第111-117页 |
·BPHiw119基因来源的分析 | 第111页 |
·全长Os-nc1基因的获得及序列分析 | 第111-113页 |
·Os-nc1基因的表达分析 | 第113页 |
·激素及非生物胁迫处理 | 第113-114页 |
·接虫与否对Os-nc1基因表达的影响 | 第114-116页 |
·包含Os-nc1序列的RNAi载体的构建 | 第116-117页 |
3 农杆菌介导的遗传转化 | 第117-118页 |
第七章 总讨论 | 第118-124页 |
1 探索B5抗褐飞虱机理的意义 | 第118-119页 |
2 差减抑制杂交(SSH)获得目的基因的可行性 | 第119-120页 |
3 关于cDNA点阵杂交技术 | 第120-121页 |
4 B5抗褐飞虱的机理推测 | 第121-122页 |
5 关于本实验获得的差异表达克隆的进一步研究和利用 | 第122-124页 |
参考文献 | 第124-143页 |
附录Ⅰ 实验室常用Protocol及所用溶液配方 | 第143-154页 |
附录Ⅱ 在读期间待发表的文章 | 第154-157页 |
致谢 | 第157页 |