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蓝藻中乙醇代谢途径的构建

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-5页
前言第5-9页
第一章 文献综述第9-27页
   ·藻类生物能源的发展第9-12页
     ·微藻柴油的发展第9-10页
     ·微藻柴油发展的瓶颈第10-11页
     ·蓝藻生物能源的兴起第11-12页
   ·合成生物学第12-16页
     ·合成生物学的理念第12-13页
     ·应用合成生物学思想解决能源问题的重要性以及必要性第13-14页
     ·合成生物学的思想在生物能源生产中的运用的“基座”第14-16页
   ·蓝藻第16-24页
     ·概述第16-17页
     ·蓝藻的光合自养方式第17-18页
     ·蓝藻工程菌株的发展第18-24页
   ·乙醇脱氢酶(ADH)和丙酮酸脱羧酶(PDC)第24-25页
     ·乙醇工程生产菌株第24-25页
     ·由乙醇脱氢酶和丙酮酸脱羧酶组成的乙醇生产途径的应用第25页
   ·本研究的目的和内容第25-27页
第二章 材料与方法第27-34页
   ·实验材料第27-29页
     ·蓝藻藻种、菌株以及质粒第27页
     ·主要试剂第27-28页
     ·主要仪器第28-29页
   ·实验方法第29-34页
     ·蓝藻的培养方法第29-30页
     ·大肠杆菌的培养第30页
     ·ADH,PDC 基因的PCR 反应第30-31页
     ·大肠杆菌的的转化和筛选第31-32页
     ·蓝藻的转化第32页
     ·转基因藻的筛选与纯化第32页
     ·基因水平检测第32-33页
     ·蛋白水平检测第33页
     ·乙醇脱氢酶和丙酮酸脱羧酶的酶活检测第33页
     ·乙醇检测第33-34页
第三章 蓝藻中乙醇代谢途径的设计和构建第34-47页
   ·乙醇生产途径的设计第34-37页
     ·乙醇生产途径设计的主要思路第34-36页
     ·乙醇生产途径基因片段的选择第36-37页
   ·穿梭表达载体在大肠杆菌中的构建第37-40页
     ·目标片段的获取第37-38页
     ·大肠杆菌蓝藻穿梭表达载体的构建第38-40页
   ·乙醇生产途径对鱼腥藻7120 的转化第40-45页
     ·三亲接合转移和转基因藻的筛选第41-44页
     ·转基因藻的质粒的凝胶电泳检测第44页
     ·转基因藻的形态观察第44-45页
   ·小结第45-47页
第四章 乙醇代谢途径的初步检测第47-57页
   ·大肠杆菌中乙醇代谢途径的检测第47-53页
     ·大肠杆菌的生长曲线第47-48页
     ·代谢物乙醇的检测第48-49页
     ·大肠杆菌中乙醇脱氢酶和丙酮酸脱羧酶的酶活检测第49-52页
     ·讨论第52-53页
   ·乙醇生产途径在鱼腥藻7120 中的检测第53-57页
     ·生长曲线第53页
     ·代谢物乙醇的检测第53-54页
     ·乙醇脱氢酶和丙酮酸脱羧酶的酶活检测第54-55页
     ·讨论第55-57页
第五章 结论与展望第57-59页
   ·结论第57页
   ·展望第57-59页
参考文献第59-66页
发表论文和科研情况说明第66-67页
致谢第67-68页
附录第68-71页

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