| 目录 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-12页 |
| ABSTRACT | 第12-16页 |
| 缩略语 | 第16-17页 |
| 前言 | 第17-18页 |
| 第一篇 文献综述 | 第18-54页 |
| 第一章 芽孢杆菌属细菌分类、鉴定及其工业常用菌 | 第18-36页 |
| 1 芽孢杆菌属的分类 | 第18-20页 |
| 2 芽孢杆菌属细菌的鉴定 | 第20-26页 |
| ·形态特征描述 | 第20页 |
| ·培养及生理、生化特征 | 第20页 |
| ·核酸特征 | 第20-26页 |
| 3 芽孢杆菌属工业常见细菌 | 第26-31页 |
| ·地衣芽孢杆菌 | 第26-27页 |
| ·枯草芽孢杆菌 | 第27-29页 |
| ·短小芽袍杆菌 | 第29页 |
| ·苏云金芽孢杆菌 | 第29-31页 |
| 参考文献 | 第31-36页 |
| 第二章 微生物碱性蛋白酶的研究进展 | 第36-46页 |
| 1 蛋白酶的分类 | 第36-38页 |
| ·丝氨酸蛋白酶 | 第36-38页 |
| ·糜蛋白酶类 | 第38页 |
| ·枯草杆菌蛋白酶类 | 第38页 |
| ·小麦丝氨酸羧肽酶Ⅱ型蛋白酶 | 第38页 |
| 2 碱性蛋白酶基因序列同源性比较 | 第38-39页 |
| 3 蛋白酶的发酵生产和产量的提高 | 第39-40页 |
| ·发酵过程的优化 | 第39页 |
| ·克隆和过表达碱性蛋白酶 | 第39-40页 |
| ·蛋白质工程 | 第40页 |
| 4 新的蛋白酶的开发(土壤宏基因组克隆) | 第40-41页 |
| 5 碱性蛋白酶的应用 | 第41-43页 |
| ·食品与饲料工业 | 第41页 |
| ·皮革工业 | 第41页 |
| ·医药领域 | 第41页 |
| ·固体废弃物的处理 | 第41-42页 |
| ·洗涤剂工业 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-46页 |
| 第三章 原生质体育种的研究进展 | 第46-54页 |
| 1 原生质体育种在生物工程中的地位 | 第46页 |
| 2 原生质体融合和原生质体技术的优越性 | 第46-47页 |
| 3 原生质体融合的程序和方法 | 第47-51页 |
| ·原生质体的制备与形成的阶段 | 第47-48页 |
| ·原生质体的融合与融合子形成阶段 | 第48-50页 |
| ·原生质体或融合子再生细胞壁,形成普通营养体细胞的阶段 | 第50页 |
| ·正变融合子的筛选与保藏阶段 | 第50-51页 |
| 4 原生质体转化的程序和方法 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-54页 |
| 第二篇 试验研究 | 第54-124页 |
| 第四章 短小芽孢杆菌NJM4和WHK4生物学特性的比较研究 | 第54-70页 |
| 1 材料与方法 | 第54-58页 |
| ·材料 | 第54-56页 |
| ·方法 | 第56-58页 |
| 2 结果 | 第58-64页 |
| ·NJM4与WHK4形态、培养及生理生化特性的比较 | 第58-60页 |
| ·培养基对NJM4和WHK4产蛋白酶的影响的比较 | 第60页 |
| ·NJM4和WHK4粗酶液对底物蛋白酶活力的比较 | 第60-62页 |
| ·NJM4和WHK4碱性蛋白酶基因序列比较分析 | 第62页 |
| ·NJM4和WHK4碱性蛋白酶基因启动子区域基因序列比较分析 | 第62-64页 |
| 3 讨论 | 第64-67页 |
| ·NJM4和WHK4培养特性的差异 | 第64-65页 |
| ·NJM4和WHK4产酶及酶活力的差异 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-68页 |
| 附录 | 第68-70页 |
| 第五章 短小芽孢杆菌WHK4以羽毛粉为底物产蛋白酶条件的优化 | 第70-80页 |
| 1 材料与方法 | 第70-72页 |
| ·材料 | 第70-71页 |
| ·方法 | 第71-72页 |
| 2 结果 | 第72-76页 |
| ·初始pH对WHK4产蛋白酶活力的影响 | 第72页 |
| ·底物浓度对WHK4产蛋白酶活力的影响 | 第72-73页 |
| ·接种量对WHK4产蛋白酶活力的影响 | 第73-74页 |
| ·外加碳源和氮源对WHK4产蛋白酶活力的影响 | 第74页 |
| ·正交试验设计优化WHK4产蛋白酶条件 | 第74-75页 |
| ·WHK4产蛋白酶进程 | 第75-76页 |
| 3 讨论 | 第76-78页 |
| ·培养基初始pH对产蛋白酶活力的影响 | 第76-77页 |
| ·接种量对产蛋白酶活力的影响 | 第77页 |
| ·培养基产蛋白酶活力的影响 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-79页 |
| 附录 | 第79-80页 |
| 第六章 短小芽孢杆菌WHK4蛋白酶的分离、纯化及酶学特性的研究 | 第80-92页 |
| 1 材料与方法 | 第80-83页 |
| ·材料 | 第80-81页 |
| ·方法 | 第81-83页 |
| 2 结果 | 第83-87页 |
| ·硫酸铵盐析结果 | 第83-84页 |
| ·凝胶过滤层析曲线 | 第84-85页 |
| ·蛋白酶SDS-PAGE酶谱分析 | 第85页 |
| ·蛋白酶酶学特性 | 第85-87页 |
| 3 讨论 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-90页 |
| 附录 | 第90-92页 |
| 第七章 短小芽孢杆菌NJM4碱性蛋白酶基因的表达及其重组蛋白生物活性的研究 | 第92-106页 |
| 1 材料与方法 | 第92-97页 |
| ·材料 | 第92-93页 |
| ·方法 | 第93-97页 |
| 2 结果 | 第97-102页 |
| ·碱性蛋白酶基因的PCR扩增及克隆序列分析 | 第97-101页 |
| ·碱性蛋白酶基因在大肠杆菌中的表达 | 第101-102页 |
| 3 讨论 | 第102-104页 |
| 参考文献 | 第104-105页 |
| 附录 | 第105-106页 |
| 第八章 短小芽孢杆菌NJM4原生质体转化研究 | 第106-116页 |
| 1 材料与方法 | 第106-108页 |
| ·材料 | 第106-107页 |
| ·方法 | 第107-108页 |
| 2 结果 | 第108-111页 |
| ·镜检原生质体形成 | 第108页 |
| ·酶的浓度对原生质体形成的影响 | 第108-109页 |
| ·酶的作用时间对原生质体形成的影响 | 第109-110页 |
| ·酶的作用温度对原生质体形成的影响 | 第110-111页 |
| ·转化子的筛选、蛋白酶活力的测定 | 第111页 |
| 3 讨论 | 第111-113页 |
| 参考文献 | 第113-114页 |
| 附录 | 第114-116页 |
| 第九章 分光光度计法监测原生质体形成过程的初步研究 | 第116-124页 |
| 1 材料与方法 | 第116-118页 |
| ·材料 | 第116-117页 |
| ·方法 | 第117-118页 |
| 2 结果 | 第118-120页 |
| ·镜检计数测定原生质体形成率 | 第118页 |
| ·分光光度计监测原生质体形成 | 第118-119页 |
| ·OD_(600nm)和原生质形成率相关性分析 | 第119-120页 |
| 3 讨论 | 第120-121页 |
| 参考文献 | 第121-122页 |
| 附录 | 第122-124页 |
| 全文总结 | 第124-126页 |
| 论文创新之处 | 第126-128页 |
| 致谢 | 第128-130页 |
| 攻读博士期间发表论文及专利申请 | 第130页 |
