| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 部分英文缩略词 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-40页 |
| 1 环境激素污染物 | 第15-32页 |
| ·引言 | 第15页 |
| ·环境激素污染物的来源 | 第15-17页 |
| ·环境激素污染物的种类 | 第17-18页 |
| ·环境激素污染物的危害 | 第18-19页 |
| ·对生殖和发育系统的影响 | 第18页 |
| ·对神经系统的影响 | 第18-19页 |
| ·对免疫系统的影响 | 第19页 |
| ·对肿瘤发生的影响 | 第19页 |
| ·环境激素污染物的分析方法 | 第19-32页 |
| ·环境激素污染物的GC-MS分析 | 第20页 |
| ·环境激素污染物的HPLC及LC-MS分析 | 第20-21页 |
| ·环境激素污染物的免疫分析技术 | 第21-32页 |
| 2 液相悬浮芯片免疫分析的研究进展 | 第32-39页 |
| ·液相悬浮芯片免疫分析的发展历史 | 第32页 |
| ·液相悬浮芯片免疫分析原理 | 第32-34页 |
| ·液相悬浮芯片免疫分析的优点及面临的问题 | 第34-35页 |
| ·液相悬浮芯片技术的发展方向 | 第35-36页 |
| ·样品中检测目标分子的数量将会有所突破 | 第35页 |
| ·各检测评价指标仍有很大提升空间 | 第35页 |
| ·微球性能的提升 | 第35页 |
| ·微球的回收和再利用 | 第35-36页 |
| ·检测仪器的小型化 | 第36页 |
| ·液相悬浮芯片技术的应用 | 第36-38页 |
| ·生物医学领域的应用 | 第36-37页 |
| ·环境监测及食品检测领域的应用 | 第37-38页 |
| ·结论 | 第38-39页 |
| 3 本研究的目的意义与内容 | 第39-40页 |
| ·研究目的和意义 | 第39页 |
| ·研究内容 | 第39-40页 |
| 第二章 完全抗原与抗体的制备 | 第40-64页 |
| 1 材料和方法 | 第41-45页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41-42页 |
| ·主要溶液的配制 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-45页 |
| ·BPA完全抗原的制备 | 第42页 |
| ·2,4-D完全抗原的制备 | 第42-43页 |
| ·CHI完全抗原的制备 | 第43页 |
| ·完全抗原的表征 | 第43-44页 |
| ·抗BPA抗体的制备与鉴定 | 第44-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-60页 |
| ·BPA完全抗原的制备与鉴定 | 第45-53页 |
| ·BVA-BSA的制备与鉴定 | 第45-47页 |
| ·cBSA的制备与鉴定 | 第47-50页 |
| ·BPA-cBSA的制备与鉴定 | 第50-53页 |
| ·2,4-D蛋白偶联物的制备与鉴定 | 第53-55页 |
| ·CHI蛋白偶联物的制备与鉴定 | 第55-57页 |
| ·抗体的鉴定 | 第57-60页 |
| ·抗体产生进程 | 第57-58页 |
| ·抗血清的灵敏度分析 | 第58-59页 |
| ·抗血清的特异性分析 | 第59-60页 |
| 3 讨论 | 第60-64页 |
| ·关于阳离子载体蛋白的作用 | 第60-61页 |
| ·小分子蛋白偶联物的制备与鉴定 | 第61-62页 |
| ·载体蛋白的选择 | 第61-62页 |
| ·生物偶联方法的选择 | 第62页 |
| ·抗体的特异性研究 | 第62-64页 |
| 第三章 ELISA研究 | 第64-82页 |
| 1 材料和方法 | 第64-69页 |
| ·材料 | 第64-66页 |
| ·主要仪器与器材 | 第64-65页 |
| ·主要试剂 | 第65页 |
| ·主要溶液的配制 | 第65-66页 |
| ·方法 | 第66-69页 |
| ·常规间接竞争ELISA研究 | 第66-67页 |
| ·半抗原直接偶联ELISA研究 | 第67-69页 |
| 2 结果和分析 | 第69-79页 |
| ·常规ELISA研究 | 第69-76页 |
| ·封闭液的选择 | 第69页 |
| ·包被原与抗体浓度的确定 | 第69-71页 |
| ·常规ELISA标准曲线的绘制 | 第71-73页 |
| ·抗体交叉反应性的测定 | 第73-74页 |
| ·常规ELISA添加回收率的测定 | 第74-76页 |
| ·总结 | 第76页 |
| ·半抗原直接偶联ELISA研究 | 第76-79页 |
| ·封闭方式的选择 | 第76-77页 |
| ·包被原与抗体浓度的确定 | 第77页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第77-78页 |
| ·添加回收率的测定 | 第78-79页 |
| ·两种ELISA的比较研究 | 第79页 |
| 3 小节与讨论 | 第79-82页 |
| ·影响ELISA参数的因素 | 第79-80页 |
| ·包被原与抗体浓度因素 | 第79-80页 |
| ·物化因素 | 第80页 |
| ·半抗原直接偶联ELISA | 第80-82页 |
| 第四章 液相芯片检测方法的研究 | 第82-119页 |
| 1 材料和方法 | 第83-91页 |
| ·材料 | 第83-84页 |
| ·主要仪器与器材 | 第83页 |
| ·主要试剂 | 第83-84页 |
| ·主要溶液的配制 | 第84页 |
| ·方法 | 第84-91页 |
| ·生物素化抗体的制备 | 第84-85页 |
| ·包被原与羧基荧光微球的偶联 | 第85-86页 |
| ·荧光微球光镜及扫描电镜观察 | 第86页 |
| ·蛋白质偶联微球的确证 | 第86-87页 |
| ·检测条件的优化 | 第87-88页 |
| ·环境激素污染物Luminex标准曲线的绘制 | 第88-90页 |
| ·检测的特异性实验 | 第90页 |
| ·有机溶剂对微球的荧光漂白实验 | 第90页 |
| ·悬浮芯片多通道检测 | 第90页 |
| ·加标回收实验 | 第90-91页 |
| 2 结果与分析 | 第91-115页 |
| ·荧光微球的形态观察 | 第91-93页 |
| ·包被原与羧基荧光微球的偶联确证 | 第93-94页 |
| ·液相芯片检测条件的优化 | 第94-105页 |
| ·激活缓冲液的选择 | 第95页 |
| ·液相芯片检测模式的选择 | 第95-98页 |
| ·生物素化二抗加样方式的选择 | 第98-99页 |
| ·生物素化二抗加入量的选择 | 第99页 |
| ·SA-PE加入量的选择 | 第99-100页 |
| ·SA-PE作用时间的选择 | 第100页 |
| ·最佳抗体加入量的优化 | 第100-101页 |
| ·最佳抗原抗体反应时间的选择 | 第101页 |
| ·最佳抗原抗体反应容积的选择 | 第101-102页 |
| ·抗原抗体反应缓冲液离子强度的选择 | 第102-103页 |
| ·抗原抗体反应缓冲液类型的选择 | 第103页 |
| ·孵育时间的选择 | 第103-105页 |
| ·小结 | 第105页 |
| ·环境激素污染物检测的悬浮芯片标准曲线 | 第105-108页 |
| ·特异性实验 | 第108-109页 |
| ·有机溶剂对微球的荧光漂白实验 | 第109-111页 |
| ·多通道检测实验 | 第111-112页 |
| ·加标回收实验 | 第112-115页 |
| 3 讨论 | 第115-119页 |
| ·抗体及SA-PE的浓度 | 第115-116页 |
| ·一抗浓度因素 | 第115-116页 |
| ·生物素化二抗及SA-PE浓度因素 | 第116页 |
| ·检测模式 | 第116页 |
| ·理化因素对IC50值的影响 | 第116-119页 |
| ·离子强度因素 | 第117页 |
| ·抗原抗体反应缓冲液类型 | 第117页 |
| ·时间因素 | 第117-118页 |
| ·反应容积因素 | 第118-119页 |
| 第五章 方法比对研究 | 第119-129页 |
| 1 材料和方法 | 第119-121页 |
| ·材料 | 第119-120页 |
| ·主要仪器与器材 | 第119页 |
| ·主要试剂 | 第119页 |
| ·主要溶液的配制 | 第119-120页 |
| ·方法 | 第120-121页 |
| ·HPLC检测标准曲线绘制 | 第120页 |
| ·加标回收率的测定 | 第120-121页 |
| 2 结果和分析 | 第121-127页 |
| ·环境激素污染物HPLC检测 | 第121-125页 |
| ·加标回收率 | 第125-126页 |
| ·环境激素污染物高通量悬浮芯片检测法与其它方法的比较 | 第126-127页 |
| 3 小结和讨论 | 第127-129页 |
| 第六章 结论与展望 | 第129-134页 |
| 1 主要结论 | 第129-132页 |
| ·制备了BPA的抗体,建立了检测环境中BPA残留的ELISA | 第129页 |
| ·建立了检测环境中BPA残留的半抗原直接偶联ELISA | 第129页 |
| ·制备了2,4-D的包被原,建立了检测环境中2,4-D残留的ELISA | 第129-130页 |
| ·制备了CHI的包被原,建立了检测环境中CHI残留的ELISA | 第130页 |
| ·制备了BPA包被原与荧光微球的偶联物,建立了检测环境中BPA残留的Luminex方法 | 第130页 |
| ·制备了2,4-D包被原与荧光微球的偶联物,建立了检测环境中2,4-D残留的Luminex方法 | 第130-131页 |
| ·制备了CHI包被原与荧光微球的偶联物,建立了检测环境中CHI残留的Luminex方法 | 第131页 |
| ·建立了同时检测环境中BPA、2,4-D及CHI残留的Luminex方法 | 第131页 |
| ·方法比对研究 | 第131-132页 |
| 2 展望 | 第132-133页 |
| ·在抗体制备方面 | 第132页 |
| ·在ELISA研究方面 | 第132-133页 |
| ·在Luminex免疫分析研究方面 | 第133页 |
| 3 创新点 | 第133-134页 |
| 参考文献 | 第134-144页 |
| 致谢 | 第144-145页 |
| 附 攻读博士学位期间发表的论文 | 第145-146页 |
