致谢 | 第1-10页 |
摘要 | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-35页 |
1 植物的光周期现象 | 第12-13页 |
·植物的光周期及光周期敏感现象 | 第12页 |
·光周期中光期和暗期的作用 | 第12-13页 |
2 光周期作用分子机制的研究 | 第13-23页 |
·拟南芥光周期作用分子机制的研究 | 第13-21页 |
·光受体 | 第14-15页 |
·生物钟成分 | 第15-17页 |
·下游转录调节因子 | 第17-19页 |
·成花信号综合子 | 第19-21页 |
·开花时间抑制基因 | 第21页 |
·水稻光周期作用分子机理研究进展 | 第21-23页 |
3 玉米光周期敏感现象的研究进展 | 第23-26页 |
·玉米光周期敏感现象及光周期敏感特性 | 第23-24页 |
·玉米光周期敏感时期的研究 | 第24页 |
·玉米光周期敏感相关基因的定位研究 | 第24-25页 |
·玉米光周期敏感相关基因的克隆和研究 | 第25-26页 |
4 植物基因克隆技术的研究进展 | 第26-29页 |
·功能克隆 | 第27页 |
·抑制消减杂交 | 第27页 |
·图位克隆 | 第27-28页 |
·转座子标签法 | 第28页 |
·同源克隆技术 | 第28页 |
·电子克隆 | 第28-29页 |
5 实时荧光定量技术 | 第29页 |
6 亚细胞定位研究 | 第29-30页 |
7 植物转基因方法研究 | 第30-33页 |
·农杆菌介导法 | 第31-32页 |
·基因枪法 | 第32页 |
·花粉管通道法 | 第32-33页 |
8 研究的目的与意义 | 第33-35页 |
第二章 玉米光周期基因 CO-LIKE 的克隆 | 第35-54页 |
1. 材料与方法 | 第35-40页 |
·实验材料 | 第35页 |
·试剂与仪器 | 第35-36页 |
·方法 | 第36-40页 |
·总RNA 的提取与纯化 | 第36页 |
·DNA 的提取与纯化 | 第36-38页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第38页 |
·玉米CO-like 基因片段的克隆 | 第38-39页 |
·CO-like 基因的PCR 扩增 | 第38-39页 |
·CO-like 基因PCR 扩增产物的回收、连接与转化 | 第39页 |
·测序结果分析 | 第39-40页 |
2. 结果与分析 | 第40-52页 |
·RNA 提取、纯化、第一链合成及检测 | 第40页 |
·玉米ZmCOL 基因的克隆与分析 | 第40-52页 |
·玉米ZmCOL 基因的克隆 | 第40页 |
·玉米 ZmCOL 基因序列分析 | 第40-52页 |
·CML288 和黄早4 中ZmCOL 基因cDNA 序列分析比较 | 第40-45页 |
·ZmCOL 基因的DNA 序列分析 | 第45页 |
·玉米 ZmCOL 基因的氨基酸序列分析 | 第45-52页 |
3. 讨论 | 第52-54页 |
·玉米ZmCOL 基因是 CO/Hd1 基因的同源基因 | 第52页 |
·玉米ZmCOL 基因的功能推测 | 第52-53页 |
·玉米ZmCOL 基因的进一步研究 | 第53-54页 |
第三章 玉米ZmCOL 基因及其相关基因的表达分析 | 第54-65页 |
1. 材料与方法 | 第54-55页 |
·供试材料 | 第54-55页 |
·光周期处理与取样 | 第55页 |
·试剂与仪器 | 第55页 |
·方法 | 第55页 |
·总RNA 的提取与纯化 | 第55页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第55页 |
·荧光定量PCR 引物的设计 | 第55页 |
·标准品的制备和标准曲线的建立 | 第55页 |
·样品检测与数据处理 | 第55页 |
2. 结果与分析 | 第55-61页 |
·基因标准曲线的建立 | 第55-56页 |
·基因表达模式的研究 | 第56-61页 |
·ZmCOL 基因周期表达模式的研究 | 第56-57页 |
·ZmCOL 基因在叶片和茎尖中的表达研究 | 第57-59页 |
·ZmCOL 基因与 ZmGI 基因间的表达关系 | 第59-60页 |
·ZmCOL 基因与 ZmFT 基因在玉米不同发育时期的表达研究 | 第60-61页 |
·光周期敏感材料中ZmCOL 基因与ZmFT 基因在不同生育时期的表达研究 | 第60-61页 |
·光周期钝感材料黄早4 中ZmCOL 基因与 ZmFT 基因在不同生育时期的表达研究 | 第61页 |
3. 讨论 | 第61-65页 |
·ZmCOL 基因周期表达模式探讨 | 第61-62页 |
·ZmCOL 基因调控玉米的光周期诱导过程 | 第62-63页 |
·ZmCOL 基因与ZmGI 基因的关系 | 第63-64页 |
·ZmCOL 基因与 ZmFT 在玉米光周期诱导中的表达关系 | 第64-65页 |
第四章 玉米ZmCOL 基因功能的初步验证 | 第65-90页 |
1. 材料与方法 | 第65-76页 |
·材料 | 第65页 |
·酶、试剂及菌株等 | 第65-66页 |
·主要仪器设备 | 第66页 |
·实验方法 | 第66-76页 |
·亚细胞定位实验方法 | 第66-71页 |
·融合表达表达载体的构建 | 第66-69页 |
·轰击前洋葱表皮的培养 | 第69页 |
·金粉悬液制备 | 第69页 |
·微弹制备(6 枪量) | 第69页 |
·基因枪轰击前操作 | 第69-70页 |
·基因枪轰击操作步骤(PDS-1000/He 型基因枪) | 第70页 |
·轰击后洋葱表皮的培养 | 第70页 |
·GUS 染色 | 第70-71页 |
·微镜观察 | 第71页 |
·拟南芥超量表达实验 | 第71-76页 |
·超量表达载体的构建 | 第71-73页 |
·拟南芥转化 | 第73-74页 |
·转基因拟南芥的筛选鉴定 | 第74-76页 |
2. 结果与分析 | 第76-88页 |
·融合表达表达载体的构建 | 第76-79页 |
·洋葱表皮瞬时表达结果 | 第79-80页 |
·植物超表达载体的构建 | 第80-86页 |
·转基因拟南芥的筛选 | 第86-88页 |
·转化株除草剂浓度敏感性实验 | 第86-87页 |
·转基因拟南芥的PCR 验证 | 第87-88页 |
3. 讨论 | 第88-90页 |
·玉米ZmCOL 基因其 CCT 结构域是核定位信号,具有核定位功能 | 第88页 |
·玉米ZmCOL 基因的功能预测及研究前景 | 第88-90页 |
第五章 不同玉米自交系光周期相关性状与 ZmCOL 基因变异的相关性分析 | 第90-101页 |
1 材料与方法 | 第90-92页 |
·试验材料 | 第90页 |
·试验设计、田间性状调查及统计、聚类分析 | 第90-91页 |
·玉米叶片的提取、SSR 扩增及序列差异分析 | 第91-92页 |
2 结果与分析 | 第92-98页 |
·不同种质类群玉米自交系光周期敏感程度的划分 | 第92-95页 |
·21 份玉米自交系的 ZmCOL 基因的PCR 扩增及序列分析 | 第95-98页 |
·ZmCOL 基因的 PCR 扩增 | 第95页 |
·ZmCOL 基因的序列分析 | 第95-98页 |
3 讨论 | 第98-101页 |
·不同玉米自交系的光周期敏感性研究 | 第98-99页 |
·21 份玉米自交系材料的ZmCOL 基因序列分析 | 第99页 |
·ZmCOL 基因主要序列变异与玉米光周期相关性状的相关性分析 | 第99-101页 |
参考文献 | 第101-111页 |
英文摘要 | 第111-113页 |