摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第14-27页 |
1.1 烟草赤星病 | 第14-15页 |
1.1.1 烟草赤星病病原 | 第14页 |
1.1.2 烟草赤星病菌致病机理 | 第14-15页 |
1.1.3 烟草赤星病流行规律及防治 | 第15页 |
1.2 烟草抗赤星病机理研究 | 第15-18页 |
1.2.1 烟草抗赤星病生理机制研究进展 | 第15-17页 |
1.2.2 烟草抗赤星病生化机制研究进展 | 第17-18页 |
1.2.3 信号传导途径与烟草赤星病抗性 | 第18页 |
1.3 烟草抗赤星病分子育种研究进展 | 第18-21页 |
1.3.1 抗赤星病烟草种质 | 第18-19页 |
1.3.2 烟草分子标记遗传连锁图构建 | 第19-20页 |
1.3.3 烟草抗赤星病基因定位及分子标记开发 | 第20页 |
1.3.4 抗赤星病功能基因挖掘及利用 | 第20-21页 |
1.4 MLP蛋白研究进展 | 第21-23页 |
1.4.1 MLP蛋白结构及分类 | 第21页 |
1.4.2 MLP蛋白响应生物胁迫研究进展 | 第21-22页 |
1.4.3 MLP蛋白响应非生物胁迫研究进展 | 第22页 |
1.4.4 MLP蛋白激素响应研究进展 | 第22-23页 |
1.5 PR10 蛋白研究进展 | 第23-24页 |
1.6 iTRAQ技术及其应用 | 第24-25页 |
1.7 研究内容及目的意义 | 第25-27页 |
1.7.1 目的意义 | 第25页 |
1.7.2 主要内容 | 第25-26页 |
1.7.3 技术路线 | 第26-27页 |
第二章 烟草抗赤星病品种蛋白质组分析 | 第27-44页 |
2.1 试验材料 | 第27页 |
2.1.1 材料 | 第27页 |
2.1.2 仪器和试剂 | 第27页 |
2.2 试验方法 | 第27-33页 |
2.2.1 赤星病菌孢子悬浮液制备 | 第27-28页 |
2.2.2 抗、感亲本池及群体池构建 | 第28页 |
2.2.3 iTRAQ技术流程 | 第28-30页 |
2.2.4 蛋白定量和定性分析 | 第30-31页 |
2.2.5 差异蛋白基因表达分析 | 第31-33页 |
2.3 结果与分析 | 第33-41页 |
2.3.1 抗、感亲本及群体池构建 | 第33-34页 |
2.3.2 iTRAQ鉴定结果 | 第34-35页 |
2.3.3 差异表达蛋白筛选 | 第35页 |
2.3.4 差异蛋白生物信息分析 | 第35-37页 |
2.3.5 抗病相关蛋白筛选 | 第37-40页 |
2.3.6 差异蛋白基因表达分析 | 第40-41页 |
2.4 讨论 | 第41-44页 |
第三章 烟草MLP423蛋白编码基因克隆与表达分析 | 第44-60页 |
3.1 试验材料 | 第44页 |
3.1.1 材料 | 第44页 |
3.1.2 仪器和试剂 | 第44页 |
3.2 试验方法 | 第44-51页 |
3.2.1 烟草MLP423蛋白编码基因ORF扩增 | 第44-46页 |
3.2.2 生物信息分析 | 第46页 |
3.2.3 NbMLP423组织特异性表达 | 第46-47页 |
3.2.4 NbMLP432亚细胞定位 | 第47-49页 |
3.2.5 NbMLP423对烟草赤星病菌侵染的响应 | 第49-50页 |
3.2.6 NbMLP423响应非生物胁迫反应 | 第50页 |
3.2.7 荧光定量PCR | 第50-51页 |
3.3 结果分析 | 第51-58页 |
3.3.1 烟草MLP423蛋白编码基因克隆 | 第51页 |
3.3.2 烟草MLP423蛋白生物信息分析 | 第51页 |
3.3.3 MLP423蛋白序列分析 | 第51-53页 |
3.3.4 MLP423蛋白系统进化树构建 | 第53页 |
3.3.5 烟草MLP423蛋白结构预测 | 第53-54页 |
3.3.6 NbMLP423组织特异性表达分析 | 第54-55页 |
3.3.7 NbMLP423亚细胞定位结果 | 第55-56页 |
3.3.8 NbMLP423对赤星病菌侵染的响应 | 第56-57页 |
3.3.9 NbMLP423对非生物胁迫的响应 | 第57-58页 |
3.4 讨论 | 第58-60页 |
第四章 NbMLP423抗烟草赤星病功能研究 | 第60-74页 |
4.1 试验材料 | 第60页 |
4.1.1 材料 | 第60页 |
4.1.2 仪器和试剂 | 第60页 |
4.2 实验方法 | 第60-66页 |
4.2.1 本氏烟培养 | 第60页 |
4.2.2 NbMLP423瞬时沉默载体构建及侵染 | 第60-63页 |
4.2.3 NbMLP423过表达载体构建及侵染 | 第63页 |
4.2.4 荧光定量检测过表达及瞬时沉默效率 | 第63-64页 |
4.2.5 病情指数统计 | 第64-65页 |
4.2.6 DAB染色 | 第65-66页 |
4.3 结果与分析 | 第66-72页 |
4.3.1 NbMLP423瞬时沉默对烟草赤星病抗性的影响 | 第66-70页 |
4.3.2 NbMLP423过表达对烟草赤星病抗性的影响 | 第70-72页 |
4.3.3 DAB染色反应 | 第72页 |
4.4 讨论 | 第72-74页 |
第五章 NbMLP423响应外源激素诱导反应 | 第74-79页 |
5.1 试验材料 | 第74页 |
5.1.1 材料 | 第74页 |
5.1.2 仪器和试剂 | 第74页 |
5.2 试验方法 | 第74-75页 |
5.2.1 本氏烟培养 | 第74页 |
5.2.2 外源激素处理 | 第74-75页 |
5.2.3 荧光定量PCR检测 | 第75页 |
5.3 结果与分析 | 第75-77页 |
5.3.1 NbMLP423应答外源喷施水杨酸反应 | 第75-76页 |
5.3.2 NbMLP423应答外源喷施茉莉酸甲酯反应 | 第76-77页 |
5.3.3 NbMLP423应答外源喷施乙烯利反应 | 第77页 |
5.4 讨论 | 第77-79页 |
第六章 全文结论 | 第79-80页 |
6.1 全文结论 | 第79页 |
6.2 创新点 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-90页 |
附录 | 第90-108页 |
致谢 | 第108-109页 |
作者简历 | 第109页 |