摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7页 |
第一章 引言 | 第12-24页 |
1.1 猪链球菌病 | 第12-16页 |
1.1.1 猪链球菌病概述 | 第12页 |
1.1.2 病原学与流行病学 | 第12-13页 |
1.1.3 猪链球菌血清型鉴定 | 第13-14页 |
1.1.4 猪链球菌毒力因子 | 第14-15页 |
1.1.5 猪链球菌致病机制 | 第15-16页 |
1.2 副猪嗜血杆菌病 | 第16-18页 |
1.2.1 副猪嗜血杆菌病概述 | 第16页 |
1.2.2 病原学与流行病学 | 第16-17页 |
1.2.3 副猪嗜血杆菌的毒力因子 | 第17页 |
1.2.4 副猪嗜血杆菌致病机制 | 第17-18页 |
1.3 猪链球菌病和副猪嗜血杆菌病的预防、控制和治疗 | 第18-19页 |
1.3.1 一般防治方法 | 第18页 |
1.3.2 疫苗在细菌病防治中的作用 | 第18页 |
1.3.3 猪链球菌病和副猪嗜血杆菌病疫苗的研究进展 | 第18-19页 |
1.4 细菌表面展示 | 第19-23页 |
1.4.1 表面展示系统简介 | 第19页 |
1.4.2 阳性菌表面展示系统 | 第19页 |
1.4.3 阴性菌表面展示系统 | 第19-21页 |
1.4.4 细菌表面展示在疫苗研发中的应用 | 第21-23页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
第二章 抗原蛋白的筛选 | 第24-32页 |
2.1 材料 | 第24页 |
2.1.1 菌株、质粒和动物 | 第24页 |
2.1.2 主要试剂 | 第24页 |
2.1.3 主要仪器 | 第24页 |
2.2 方法 | 第24-27页 |
2.2.1 猪链球菌基因组提取 | 第24页 |
2.2.2 重组质粒构建及验证 | 第24-26页 |
2.2.3 重组目的蛋白的表达纯化 | 第26页 |
2.2.4 小鼠易感品系及攻毒菌株的选择 | 第26-27页 |
2.2.5 攻毒用菌株的验证 | 第27页 |
2.2.6 免疫保护攻毒试验 | 第27页 |
2.3 结果 | 第27-30页 |
2.3.1 SS目的基因PCR扩增 | 第27页 |
2.3.2 SS重组质粒双酶切鉴定 | 第27-28页 |
2.3.3 SS蛋白诱导表达验证 | 第28-29页 |
2.3.4 SS蛋白纯化结果 | 第29页 |
2.3.5 SS小鼠易感品系和攻毒菌株的确定 | 第29-30页 |
2.3.6 SS2 攻毒菌株的验证 | 第30页 |
2.3.7 SS2 免疫保护攻毒试验结果 | 第30页 |
2.4 讨论 | 第30-32页 |
第三章 表面展示载体的构建及验证 | 第32-39页 |
3.1 材料 | 第32页 |
3.1.1 所需的菌株、质粒 | 第32页 |
3.1.2 主要试剂 | 第32页 |
3.1.3 主要仪器 | 第32页 |
3.2 方法 | 第32-35页 |
3.2.1 相关引物设计 | 第32-33页 |
3.2.2 表面展示载体构建 | 第33-34页 |
3.2.3 表面展示菌株的表达验证 | 第34页 |
3.2.4 亚细胞组分分离 | 第34-35页 |
3.2.5 免疫电镜 | 第35页 |
3.3 结果 | 第35-37页 |
3.3.1 载体测序验证 | 第35页 |
3.3.2 表面展示菌株的Western验证 | 第35-36页 |
3.3.3 重组蛋白亚细胞组分定位 | 第36页 |
3.3.4 免疫电镜定位 | 第36-37页 |
3.4 讨论 | 第37-39页 |
第四章 动物试验 | 第39-46页 |
4.1 材料 | 第39页 |
4.1.1 菌株和动物 | 第39页 |
4.1.2 主要试剂 | 第39页 |
4.1.3 主要仪器 | 第39页 |
4.2 方法 | 第39-41页 |
4.2.1 疫苗制备 | 第39-40页 |
4.2.2 小鼠免疫试验 | 第40-41页 |
4.2.3 小鼠血清中抗体水平检测 | 第41页 |
4.2.4 攻毒试验 | 第41页 |
4.3 结果 | 第41-43页 |
4.3.1 细胞因子检测结果 | 第41-42页 |
4.3.2 抗体水平检测结果 | 第42页 |
4.3.3 攻毒试验结果 | 第42-43页 |
4.4 讨论 | 第43-46页 |
第五章 全文结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
作者简历 | 第56页 |