| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-21页 |
| ·淀粉 | 第10-11页 |
| ·淀粉的性质和形态 | 第10-11页 |
| ·淀粉的用途及其深加工 | 第11页 |
| ·淀粉酶 | 第11-12页 |
| ·生淀粉酶 | 第12-16页 |
| ·生淀粉酶的定义及水解原理 | 第12-14页 |
| ·生淀粉葡萄糖淀粉酶的研究进展 | 第14-16页 |
| ·生淀粉葡萄糖淀粉酶的应用及其优势 | 第16页 |
| ·混合酶系水解的优势与应用 | 第16-17页 |
| ·不同发酵方式对酶系组成的影响 | 第17-19页 |
| ·本课题研究目的与意义 | 第19页 |
| ·本课题研究思路与内容 | 第19-21页 |
| 第二章 生淀粉酶产生菌的筛选及固态发酵产酶条件的优化 | 第21-32页 |
| ·引言 | 第21页 |
| ·材料与方法 | 第21-24页 |
| ·主要仪器设备 | 第21-22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-24页 |
| ·结果与分析 | 第24-31页 |
| ·微生物资源库的建立及菌株筛选结果 | 第24-25页 |
| ·菌株鉴定结果 | 第25-26页 |
| ·利用单因素法确定固态发酵主要参数 | 第26-28页 |
| ·利用响应面法设计确定培养基组成 | 第28-30页 |
| ·Native-PAGE活性染色法初步确定酶系组成 | 第30-31页 |
| ·本章小结 | 第31-32页 |
| 第三章 固、液态发酵所产生淀粉酶系的分离纯化 | 第32-48页 |
| ·引言 | 第32页 |
| ·材料与方法 | 第32-37页 |
| ·主要仪器设备 | 第32-33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·菌种 | 第33页 |
| ·溶液配制 | 第33-34页 |
| ·研究方法 | 第34-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-47页 |
| ·固态发酵淀粉酶系的纯化 | 第37-44页 |
| ·液态发酵淀粉酶系的纯化 | 第44-46页 |
| ·固、液态发酵产生淀粉酶系纯化方法的比较 | 第46-47页 |
| ·本章小结 | 第47-48页 |
| 第四章 固、液态发酵产生淀粉酶系酶学性质的比较 | 第48-61页 |
| ·引言 | 第48页 |
| ·材料与方法 | 第48-50页 |
| ·主要仪器设备 | 第48-49页 |
| ·主要试剂 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-59页 |
| ·最适反应pH及pH稳定性的测定 | 第50-51页 |
| ·最适反应温度及温度稳定性的测定 | 第51-53页 |
| ·金属离子和化学试剂的影响 | 第53页 |
| ·薄层层析分析酶水解产物 | 第53-55页 |
| ·苯酚-硫酸法测定糖含量 | 第55页 |
| ·对生淀粉底物的水解效果 | 第55-56页 |
| ·质谱分析及蛋白质鉴定 | 第56-59页 |
| ·本章小结 | 第59-61页 |
| 第五章 葡萄糖淀粉酶基因gluE的克隆和序列分析 | 第61-75页 |
| ·引言 | 第61页 |
| ·材料与方法 | 第61-65页 |
| ·主要仪器设备 | 第61-62页 |
| ·工具酶和试剂 | 第62页 |
| ·菌株、培养基及培养条件 | 第62页 |
| ·PCR引物的设计与合成 | 第62-63页 |
| ·基因组DNA和总RNA的抽提 | 第63页 |
| ·gluE 基因DNA序列和cDNA序列的扩增 | 第63-65页 |
| ·DNA核苷酸序列测定 | 第65页 |
| ·氨基酸序列分析及三维结构预测 | 第65页 |
| ·结果与分析 | 第65-74页 |
| ·CICIM F0088 基因组DNA和总RNA的抽提 | 第65-66页 |
| ·gluE DNA序列和cDNA序列的扩增 | 第66-70页 |
| ·葡萄糖淀粉酶GA E的系统进化树分析 | 第70-71页 |
| ·GA E与来源于毛霉科的葡萄糖淀粉酶一级结构的同源性比较 | 第71-72页 |
| ·葡萄糖淀粉酶GA E二级结构的预测与分析 | 第72页 |
| ·葡萄糖淀粉酶GA E淀粉结合区和催化区的三维结构预测 | 第72-74页 |
| ·本章小结 | 第74-75页 |
| 第六章 葡萄糖淀粉酶基因gluE在大肠杆菌中的异源表达及功能分析 | 第75-86页 |
| ·引言 | 第75页 |
| ·材料与方法 | 第75-77页 |
| ·菌株与质粒 | 第75-76页 |
| ·培养基及培养条件 | 第76页 |
| ·目的基因的扩增及大肠杆菌重组表达载体的构建 | 第76页 |
| ·诱导产酶及重组酶的纯化 | 第76-77页 |
| ·重组酶的性质研究 | 第77页 |
| ·结果与分析 | 第77-85页 |
| ·大肠杆菌表达载体的构建和gluE基因的表达 | 第77-80页 |
| ·重组酶在大肠杆菌中表达条件的优化 | 第80-82页 |
| ·重组酶的纯化 | 第82页 |
| ·重组酶的性质研究 | 第82-84页 |
| ·重组酶的LTQ质谱分析及蛋白质鉴定 | 第84-85页 |
| ·本章小结 | 第85-86页 |
| 论文结论与展望 | 第86-88页 |
| 论文创新点 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-98页 |
| 附录一 作者在攻读博士学位期间发表(含待发表)的论文 | 第98-99页 |
| 附录二 附图 | 第99-107页 |
