| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词列表 | 第8-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-35页 |
| 第一节 被子植物的雄配子体形成过程 | 第14-16页 |
| 1.1 花粉形成过程 | 第14-15页 |
| 1.2 花粉粘附、水合与萌发 | 第15-16页 |
| 第二节 花粉管的极性生长 | 第16-30页 |
| 2.1 RhoGTP酶、细胞骨架和囊泡运输 | 第17-20页 |
| 2.2 Ca~(2+)、H~+和ROS | 第20-22页 |
| 2.3 花粉管细胞壁多糖 | 第22-27页 |
| 2.3.1 果胶 | 第22-25页 |
| 2.3.2 胼胝质 | 第25-26页 |
| 2.3.3 纤维素 | 第26页 |
| 2.3.4 半纤维素 | 第26-27页 |
| 2.4 花粉管细胞壁蛋白 | 第27-30页 |
| 2.4.1 阿拉伯半乳聚糖蛋白AGPs | 第27-28页 |
| 2.4.2 伸展蛋白EXTs | 第28-29页 |
| 2.4.3 富含脯氨酸的蛋白PRPs | 第29-30页 |
| 第三节 植物LRX家族研究进展和现状 | 第30-34页 |
| 第四节 本论文的研究目的和意义 | 第34-35页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第35-56页 |
| 第一节 实验材料 | 第35-42页 |
| 2.1 植物材料 | 第35页 |
| 2.2 菌株 | 第35页 |
| 2.3 载体 | 第35-36页 |
| 2.4 实验仪器 | 第36-38页 |
| 2.5 实验试剂 | 第38-40页 |
| 2.6 实验引物 | 第40-42页 |
| 第二节 实验方法 | 第42-56页 |
| 2.7 拟南芥植株的培养 | 第42-43页 |
| 2.8 拟南芥总DNA提取 | 第43-44页 |
| 2.9 基因型鉴定 | 第44页 |
| 2.10 拟南芥总RNA提取 | 第44-45页 |
| 2.11 RT-PCR鉴定转录本 | 第45页 |
| 2.12 拟南芥人工杂交与传递效率计算 | 第45-46页 |
| 2.13 花粉亚历山大染色 | 第46页 |
| 2.14 花粉DAPI染色 | 第46-47页 |
| 2.15 花粉FDA染色 | 第47-48页 |
| 2.16 花粉体外固体萌发 | 第48页 |
| 2.17 花粉体内萌发 | 第48-49页 |
| 2.18 胚胎发育观察 | 第49页 |
| 2.19 GUS组织化学染色 | 第49-50页 |
| 2.20 花粉管的免疫组织化学染色 | 第50-51页 |
| 2.21 大肠杆菌感受态制备 | 第51-52页 |
| 2.22 大肠杆菌感受态的转化 | 第52-53页 |
| 2.23 大肠杆菌质粒提取 | 第53页 |
| 2.24 DNA片段胶回收 | 第53页 |
| 2.25 限制性内切酶酶切反应 | 第53页 |
| 2.26 目的片段与载体的连接反应 | 第53页 |
| 2.27 农杆菌感受态的制备 | 第53-54页 |
| 2.28 农杆菌感受态的转化 | 第54页 |
| 2.29 农杆菌介导的转化拟南芥方法 | 第54-55页 |
| 2.30 本课题所涉及到的基因 | 第55-56页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第56-98页 |
| 第一节 拟南芥花粉中特异表达的LRXs的生物信息学分析 | 第56-59页 |
| 3.1 LRX蛋白的进化树分析 | 第56-57页 |
| 3.2 LRX8-11的氨基酸序列分析 | 第57-59页 |
| 第二节 LRX8-11基因的表达模式分析 | 第59-63页 |
| 3.3 LRX8-11主要在开放的花和花序中表达 | 第59-61页 |
| 3.4 LRX8-11在成熟的三核期花粉粒和伸长的花粉管中高表达 | 第61-63页 |
| 第三节 LRX8-11转录本缺失纯合突变体的鉴定及植株生长发育观察 | 第63-68页 |
| 3.5 lrx8,lrx9,lrx10和lrx11纯合突变体的鉴定 | 第63-64页 |
| 3.6 单突变体、双突变体、三突变体和四突变体营养生长正常 | 第64-66页 |
| 3.7 单突变体的角果结实率与野生型无显著的差异,双突变体中只有lrx8lrx9和lrx8lrx10结实率略有下降,三突变体和四变体的结实率严重下降 | 第66-68页 |
| 第四节 突变体的互交实验和遗传学分析 | 第68-74页 |
| 3.8 四突变体与野生型互交 | 第68-69页 |
| 3.9 单突变体lrx8(+/-)、双突变体lrx8(+/-)lrx9(-/-)和lrx8(-/-)lrx9(+/-)及四突变体的雄配子体传递效率显著下降 | 第69-74页 |
| 第五节 三突变体和四突变体的胚胎发育正常 | 第74-78页 |
| 第六节 突变体花粉发育及花粉管体内外生长 | 第78-86页 |
| 3.10 单突变体、双突变体、三突变体和四突变体花粉发育未见异常 | 第78-79页 |
| 3.11 单突变体花粉萌发正常,双突变体中只有lrx8lrx9和lrx8lrx10花粉萌发率与野生型有显著的差异,三突变体和四突变体在体外花粉萌发和花粉管生长上都存在严重的缺陷 | 第79-83页 |
| 3.12 三突变体和四突变体的花粉管在体内生长缓慢 | 第83-84页 |
| 3.13 突变体花粉管导向正常 | 第84-86页 |
| 第七节 突变体的表型互补及LRX8,LRX10和LRX11的亚细胞定位分析 | 第86-93页 |
| 3.14 突变体的表型互补 | 第86-91页 |
| 3.15 LRX8,LRX10和LRX11融合GFP定位于花粉管的胞质和细胞壁上 | 第91-93页 |
| 第八节 突变体lrx8lrx9lrx11花粉管壁上的多糖沉积发生改变 | 第93-96页 |
| 第九节 LRX1能部分互补lrx8lrx9lrx10的花粉萌发率及角果结实率 | 第96-98页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第98-104页 |
| 第一节 讨论 | 第98-102页 |
| 4.1 LRX8-11功能冗余地在花粉萌发和花粉管的伸长中发挥重要的作用 | 第98页 |
| 4.2 LRX8-11定位于花粉管细胞壁上,LRX8在这四个成员中发挥最重要功能 | 第98-99页 |
| 4.3 LRX8-11参与花粉粒和花粉管细胞壁完整性的维持 | 第99-100页 |
| 4.4 LRX8-11基因缺失导致花粉管细胞壁上多糖的沉积发生改变 | 第100-101页 |
| 4.5 花粉特异表达的LRXs可能作为果胶或其他多糖的模板,通过调节多糖的沉积影响花粉萌发和花粉管伸长 | 第101-102页 |
| 第二节 结论 | 第102-104页 |
| 参考文献 | 第104-113页 |
| 个人简历 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
