摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第12-24页 |
1.1 中国农作物秸秆生物质资源概述 | 第12-14页 |
1.1.1 农作物秸秆生物质储量及其利用现状 | 第12-13页 |
1.1.2 农作物秸秆生物质资源化利用的发展潜力 | 第13页 |
1.1.3 限制农作物秸秆生物质有效利用的主要技术问题 | 第13-14页 |
1.2 农作物秸秆生物质主要成分及其降解转化效率 | 第14页 |
1.3 木质纤维素的阿魏酸化与植物细胞壁抗降解屏障的形成 | 第14-15页 |
1.4 阿魏酰基转移酶在木质纤维素阿魏酸化过程中的作用 | 第15-16页 |
1.5 BAHD酰基转移酶家族的研究现状 | 第16-19页 |
1.5.1 BAHD酰基转移酶序列特征及其亲缘关系 | 第16-18页 |
1.5.2 BAHD酰基转移酶的生物学功能研究 | 第18-19页 |
1.6 禾本科单子叶模式植物二穗短柄草在植物遗传改良中的应用 | 第19-20页 |
1.7 CRISPR/Cas9基因编辑的应用 | 第20-22页 |
1.8 本研究的目的及意义 | 第22-24页 |
1.8.1 研究目的及意义 | 第22-23页 |
1.8.2 技术路线 | 第23-24页 |
第二章 Bra1基因的克隆及表达特征分析 | 第24-51页 |
2.1 材料与方法 | 第24-40页 |
2.1.1 植物材料 | 第24页 |
2.1.2 菌株及质粒 | 第24-25页 |
2.1.3 主要分子试剂及试剂盒 | 第25页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第25-26页 |
2.1.5 培养基及溶液的配制 | 第26-27页 |
2.1.6 PCR引物的设计与合成 | 第27-28页 |
2.1.7 二穗短柄草总RNA的提取及第一链cDNA合成 | 第28-30页 |
2.1.8 Bra1基因的克隆及测序 | 第30-33页 |
2.1.9 Bra1基因的生物信息学分析 | 第33页 |
2.1.10 重组蛋白的原核表达及质谱分析 | 第33-36页 |
2.1.11 同源蛋白系统进化树及Bra1基因表达特征 | 第36-38页 |
2.1.12 Bra1蛋白的亚细胞定位分析 | 第38-40页 |
2.2 结果与分析 | 第40-49页 |
2.2.1 Bra1基因的克隆及其序列的生物信息学分析 | 第40-42页 |
2.2.2 重组蛋白的原核表达及质谱分析 | 第42-44页 |
2.2.3 系统进化树分析 | 第44-45页 |
2.2.4 Bra1基因表达特征 | 第45-47页 |
2.2.5 Bra1蛋白表达的亚细胞定位 | 第47-49页 |
2.3 讨论 | 第49-50页 |
2.4 本章小结 | 第50-51页 |
第三章 二穗短柄草Bra1基因编辑体系的建立 | 第51-62页 |
3.1 材料与方法 | 第51-58页 |
3.1.1 菌株质粒、试剂及来源 | 第51页 |
3.1.2 主要仪器设备 | 第51页 |
3.1.3 培养基及溶液的配制 | 第51-52页 |
3.1.4 CRISPR/Cas9基因编辑表达载体的构建 | 第52-54页 |
3.1.5 二穗短柄草Bra1基因编辑体系的建立 | 第54-56页 |
3.1.6 转基因植株的鉴定 | 第56-57页 |
3.1.7 基因编辑位点的序列分析 | 第57-58页 |
3.2 结果与分析 | 第58-61页 |
3.2.1 打靶位点的选择 | 第58页 |
3.2.2 Targetadaptor引物的设计 | 第58-59页 |
3.2.3 CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建 | 第59页 |
3.2.4 基因编辑再生植株的获得 | 第59-60页 |
3.2.5 抗性植株的分子鉴定 | 第60页 |
3.2.6 基因编辑位点的测序分析 | 第60-61页 |
3.3 讨论 | 第61页 |
3.4 本章小结 | 第61-62页 |
第四章 总结与展望 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
硕士期间发表的论文及其他科研成果 | 第72页 |