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二穗短柄草(Brachypodium distachyon)Bra1基因的克隆、表达特征分析及其基因编辑体系的建立

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第一章 绪论第12-24页
    1.1 中国农作物秸秆生物质资源概述第12-14页
        1.1.1 农作物秸秆生物质储量及其利用现状第12-13页
        1.1.2 农作物秸秆生物质资源化利用的发展潜力第13页
        1.1.3 限制农作物秸秆生物质有效利用的主要技术问题第13-14页
    1.2 农作物秸秆生物质主要成分及其降解转化效率第14页
    1.3 木质纤维素的阿魏酸化与植物细胞壁抗降解屏障的形成第14-15页
    1.4 阿魏酰基转移酶在木质纤维素阿魏酸化过程中的作用第15-16页
    1.5 BAHD酰基转移酶家族的研究现状第16-19页
        1.5.1 BAHD酰基转移酶序列特征及其亲缘关系第16-18页
        1.5.2 BAHD酰基转移酶的生物学功能研究第18-19页
    1.6 禾本科单子叶模式植物二穗短柄草在植物遗传改良中的应用第19-20页
    1.7 CRISPR/Cas9基因编辑的应用第20-22页
    1.8 本研究的目的及意义第22-24页
        1.8.1 研究目的及意义第22-23页
        1.8.2 技术路线第23-24页
第二章 Bra1基因的克隆及表达特征分析第24-51页
    2.1 材料与方法第24-40页
        2.1.1 植物材料第24页
        2.1.2 菌株及质粒第24-25页
        2.1.3 主要分子试剂及试剂盒第25页
        2.1.4 主要仪器设备第25-26页
        2.1.5 培养基及溶液的配制第26-27页
        2.1.6 PCR引物的设计与合成第27-28页
        2.1.7 二穗短柄草总RNA的提取及第一链cDNA合成第28-30页
        2.1.8 Bra1基因的克隆及测序第30-33页
        2.1.9 Bra1基因的生物信息学分析第33页
        2.1.10 重组蛋白的原核表达及质谱分析第33-36页
        2.1.11 同源蛋白系统进化树及Bra1基因表达特征第36-38页
        2.1.12 Bra1蛋白的亚细胞定位分析第38-40页
    2.2 结果与分析第40-49页
        2.2.1 Bra1基因的克隆及其序列的生物信息学分析第40-42页
        2.2.2 重组蛋白的原核表达及质谱分析第42-44页
        2.2.3 系统进化树分析第44-45页
        2.2.4 Bra1基因表达特征第45-47页
        2.2.5 Bra1蛋白表达的亚细胞定位第47-49页
    2.3 讨论第49-50页
    2.4 本章小结第50-51页
第三章 二穗短柄草Bra1基因编辑体系的建立第51-62页
    3.1 材料与方法第51-58页
        3.1.1 菌株质粒、试剂及来源第51页
        3.1.2 主要仪器设备第51页
        3.1.3 培养基及溶液的配制第51-52页
        3.1.4 CRISPR/Cas9基因编辑表达载体的构建第52-54页
        3.1.5 二穗短柄草Bra1基因编辑体系的建立第54-56页
        3.1.6 转基因植株的鉴定第56-57页
        3.1.7 基因编辑位点的序列分析第57-58页
    3.2 结果与分析第58-61页
        3.2.1 打靶位点的选择第58页
        3.2.2 Targetadaptor引物的设计第58-59页
        3.2.3 CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建第59页
        3.2.4 基因编辑再生植株的获得第59-60页
        3.2.5 抗性植株的分子鉴定第60页
        3.2.6 基因编辑位点的测序分析第60-61页
    3.3 讨论第61页
    3.4 本章小结第61-62页
第四章 总结与展望第62-63页
参考文献第63-71页
致谢第71-72页
硕士期间发表的论文及其他科研成果第72页

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