| 致谢 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略词表 | 第12-16页 |
| 1 引言 | 第16-30页 |
| 1.1 园艺作物与灰霉病 | 第16-20页 |
| 1.1.1 园艺作物灰霉病的特点及危害 | 第16-18页 |
| 1.1.2 园艺作物防御灰霉病的研究进展 | 第18-20页 |
| 1.2 植物泛素化系统及其在抗性调控中的研究进展 | 第20-28页 |
| 1.2.1 植物泛素化作用机理 | 第20-23页 |
| 1.2.2 U-box E3泛素连接酶特点及其生物学功能 | 第23-28页 |
| 1.2.2.1 U-box蛋白结构特点及其分类 | 第23-24页 |
| 1.2.2.2 U-box E3泛素连接酶在植物生长发育中的作用 | 第24-26页 |
| 1.2.2.3 U-box E3泛素连接酶在植物非生物逆境胁迫中的作用 | 第26页 |
| 1.2.3.4 U-box E3泛素连接酶在植物抗病中的作用 | 第26-28页 |
| 1.3 本文研究目的与意义 | 第28-30页 |
| 2 番茄PUB基因家族生物信息学分析 | 第30-39页 |
| 2.1 材料与方法 | 第31-32页 |
| 2.1.1 番茄PUB基因家族序列比对与结构域分析 | 第31页 |
| 2.1.2 番茄PUB基因家族成员的核苷酸及蛋白信息获取 | 第31-32页 |
| 2.1.3 系统发育树的构建 | 第32页 |
| 2.2 结果与分析 | 第32-37页 |
| 2.2.1 番茄PUB基因家族及系统发育树分析 | 第32-35页 |
| 2.2.2 番茄PUB基因家族结构域分析 | 第35-37页 |
| 2.3 讨论 | 第37-39页 |
| 3 番茄PUB基因家族成员在防御灰霉病中的作用鉴定 | 第39-56页 |
| 3.1 材料与方法 | 第40-48页 |
| 3.1.1 植物材料及实验方法 | 第40-41页 |
| 3.1.2 载体构建 | 第41-43页 |
| 3.1.3 植物RNA提取及反转录 | 第43页 |
| 3.1.4 实时荧光定量PCR | 第43-46页 |
| 3.1.5 病毒诱导基因沉默 | 第46页 |
| 3.1.6 烟草瞬时过表达 | 第46-47页 |
| 3.1.7 灰霉菌的培养及灰霉病接种方法 | 第47页 |
| 3.1.8 灰霉病抗性检测 | 第47-48页 |
| 3.2 结果与分析 | 第48-55页 |
| 3.2.1 番茄PUB基因对灰霉病菌侵染的响应 | 第48-49页 |
| 3.2.2 过表达番茄PUB基因对灰霉病抗性的影响 | 第49-50页 |
| 3.2.3 过表达番茄PUB基因对灰霉分泌蛋白引起的程序性死亡的影响 | 第50-51页 |
| 3.2.4 PUB33、PUB41、PUB43和PUB56基因沉默对灰霉病抗性的影响 | 第51-53页 |
| 3.2.5 pub41突变体材料对灰霉病抗性的影响 | 第53-55页 |
| 3.3 讨论 | 第55-56页 |
| 4 番茄PUB基因家族在防御灰霉病中的机理研究 | 第56-69页 |
| 4.1 材料与方法 | 第57-61页 |
| 4.1.1 植物材料及实验方法 | 第57-58页 |
| 4.1.2 亚细胞定位 | 第58页 |
| 4.1.3 体外泛素化 | 第58-60页 |
| 4.1.4 蛋白质免疫印迹 | 第60页 |
| 4.1.5 双分子荧光互补 | 第60-61页 |
| 4.1.6 灰霉菌的培养及灰霉病接种方法 | 第61页 |
| 4.1.7 灰霉病抗性测定 | 第61页 |
| 4.2 结果与分析 | 第61-67页 |
| 4.2.1 PSKR1在番茄灰霉病中的作用 | 第61-63页 |
| 4.2.2 TPK1b在番茄灰霉病中的作用 | 第63-65页 |
| 4.2.3 PUBs的亚细胞定位及E3泛素连接酶活性 | 第65-66页 |
| 4.2.4 PUB43与PSKR1/TPK1b蛋白互作 | 第66-67页 |
| 4.3 讨论 | 第67-69页 |
| 5 总结 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-85页 |
