摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
引言 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-20页 |
1.1 鲤疱疹病毒Ⅱ型 | 第13-16页 |
1.1.1 鲤疱疹病毒Ⅱ型的流行病学 | 第13页 |
1.1.2 鲤疱疹病毒Ⅱ型的病原学 | 第13-14页 |
1.1.3 鲤疱疹病毒Ⅱ型的检测技术 | 第14-16页 |
1.2 抗病毒中草药 | 第16-18页 |
1.2.1 抗病毒中草药的作用机制 | 第16-17页 |
1.2.2 抗病毒中草药的活性成分 | 第17页 |
1.2.3 中草药在水产养殖中的应用 | 第17-18页 |
1.3 研究展望 | 第18-20页 |
第二章 鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF92的基因克隆、原核表达和多克隆抗体的制备及初步检测 | 第20-31页 |
2.1 实验材料 | 第20-21页 |
2.1.1 实验材料和试剂 | 第20页 |
2.1.2 仪器设备 | 第20-21页 |
2.1.3 软件 | 第21页 |
2.2 试验方法 | 第21-26页 |
2.2.1 PCR法获取ORF92的基因序列 | 第21-22页 |
2.2.2 重组质粒构建及原核表达 | 第22-24页 |
2.2.3 目的蛋白的纯化 | 第24-25页 |
2.2.4 多克隆抗体制备 | 第25页 |
2.2.5 血清特异性分析 | 第25页 |
2.2.6 免疫组织化学检测 | 第25-26页 |
2.3 结果与分析 | 第26-30页 |
2.3.1 扩增ORF92基因 | 第26页 |
2.3.2 重组蛋白rORF92的诱导表达 | 第26-27页 |
2.3.3 重组蛋白rORF92表达条件的优化 | 第27-28页 |
2.3.4 重组ORF92蛋白纯化 | 第28页 |
2.3.5 多克隆抗体的制备及特异性分析 | 第28-29页 |
2.3.6 免疫组织化学检测 | 第29-30页 |
2.4 讨论 | 第30-31页 |
第三章 鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF92单克隆抗体的制备及对异育银鲫出血病的初步检测 | 第31-44页 |
3.1 实验材料 | 第31-32页 |
3.1.1 实验动物及细胞系 | 第31页 |
3.1.2 实验材料与仪器设备 | 第31页 |
3.1.3 实验药品及试剂配制 | 第31-32页 |
3.2 试验方法 | 第32-37页 |
3.2.1 抗鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF92单克隆抗体的制备 | 第32-34页 |
3.2.2 腹水制备及纯化 | 第34页 |
3.2.3 抗体亚型的鉴定 | 第34-35页 |
3.2.4 单克隆抗体在CyHV-2检测中的应用 | 第35-37页 |
3.3 结果与分析 | 第37-42页 |
3.3.1 rORF92单克隆抗体的制备及筛选 | 第37页 |
3.3.2 rORF92单克隆抗体1B7细胞株腹水制备 | 第37-38页 |
3.3.3 1B7细胞株抗体亚型的鉴定及腹水效价检测 | 第38页 |
3.3.4 rORF92单克隆抗体1B7细胞株IFA检测 | 第38-42页 |
3.4 讨论 | 第42-44页 |
第四章 中草药饲料添加剂对鲤疱疹病毒Ⅱ型的影响 | 第44-51页 |
4.1 材料 | 第44页 |
4.1.1 实验材料及仪器设备 | 第44页 |
4.1.2 试验饲料 | 第44页 |
4.2 试验方法 | 第44-46页 |
4.2.1 试验设计与饲养管理 | 第44页 |
4.2.2 CyHV-2感染异育银鲫 | 第44-45页 |
4.2.3 CyHV-2病毒鉴定 | 第45-46页 |
4.2.4 异育银鲫血液中CyHV-2滴度测定 | 第46页 |
4.3 结果与分析 | 第46-49页 |
4.3.1 CyHV-2病毒鉴定 | 第46-47页 |
4.3.2 感染CyHV-2后异育银鲫临床症状 | 第47-48页 |
4.3.3 异育银鲫死亡率及相对免疫保护率 | 第48页 |
4.3.4 感染CyHV-2后各实验组同时间点的病毒滴度情况 | 第48-49页 |
4.4 讨论 | 第49-51页 |
结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
附录:论文发表情况 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |