| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-9页 |
| 第一章 绪论 | 第15-24页 |
| 1.1 引言 | 第15-16页 |
| 1.2 金属配合物抗肿瘤研究进展 | 第16-20页 |
| 1.2.1 铂金属配合物抗肿瘤研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2.2 钌金属配合物抗肿瘤研究进展 | 第17-18页 |
| 1.2.3 铱金属配合物抗肿瘤及生物应用研究进展 | 第18-19页 |
| 1.2.4 其他金属配合物抗肿瘤研究进展 | 第19-20页 |
| 1.3 药物抗肿瘤研究方法 | 第20-23页 |
| 1.3.1 细胞死亡方式 | 第20-21页 |
| 1.3.2 药物体外细胞毒性评价 | 第21-22页 |
| 1.3.3 细胞死亡方式检测 | 第22-23页 |
| 1.4 研究目的及选题意义 | 第23-24页 |
| 第二章 以PTCP为配体的钌(Ⅱ)配合物合成及体外抗肿瘤活性机制研究 | 第24-47页 |
| 2.1 引言 | 第24-25页 |
| 2.2 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第25-26页 |
| 2.2.2 实验器材 | 第26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-36页 |
| 2.3.1 1,10-菲啰啉-5,6-二酮的合成 | 第26-27页 |
| 2.3.2 配体PTCP的合成与表征 | 第27页 |
| 2.3.3 Cis-[Ru(phen)_2Cl_2]?2H_2O的合成 | 第27页 |
| 2.3.4 Cis-[Ru(dmp)_2Cl_2]?2H_2O的合成 | 第27页 |
| 2.3.5 Cis-[Ru(ttbpy)_2Cl_2]?2H_2O的合成 | 第27页 |
| 2.3.6 [Ru(phen)_2(PTCP)](ClO_4)_2(1)的合成 | 第27-28页 |
| 2.3.7 [Ru(dmp)__2(PTCP)](ClO4_)_2(2)的合成 | 第28页 |
| 2.3.8 [Ru(ttbpy)_2(PTCP)](ClO_4)_2(3)的合成 | 第28-29页 |
| 2.3.9 细胞培养 | 第29页 |
| 2.3.10 DNA结合实验 | 第29-30页 |
| 2.3.11 分子对接实验 | 第30页 |
| 2.3.12 配合物的体外毒性检测 | 第30页 |
| 2.3.13 DNA损伤检测 | 第30-32页 |
| 2.3.14 凋亡分布及凋亡率检测 | 第32页 |
| 2.3.15 流式细胞仪检测线粒体膜电位 | 第32-33页 |
| 2.3.16 活性氧含量检测 | 第33页 |
| 2.3.17 细胞周期检测 | 第33页 |
| 2.3.18 侵袭效应评价 | 第33-34页 |
| 2.3.19 自噬作用研究 | 第34页 |
| 2.3.20 蛋白免疫印迹实验 | 第34-36页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第36-46页 |
| 2.4.1 DNA结合实验 | 第36-37页 |
| 2.4.2 粘度测定 | 第37-38页 |
| 2.4.3 与DNA的分子对接实验 | 第38页 |
| 2.4.4 配合物体外毒性检测 | 第38-39页 |
| 2.4.5 流式细胞术检测凋亡 | 第39-40页 |
| 2.4.6 DNA损伤检测 | 第40-41页 |
| 2.4.7 活性氧的分析 | 第41-42页 |
| 2.4.8 线粒体跨膜电位的检测 | 第42-43页 |
| 2.4.9 细胞周期阻滞结果 | 第43-44页 |
| 2.4.10 细胞侵袭能力的探究 | 第44页 |
| 2.4.11 自噬的检测 | 第44-45页 |
| 2.4.12 免疫印迹实验 | 第45-46页 |
| 2.5 小结 | 第46-47页 |
| 第三章 具有抗黑色素瘤活性的铱(Ⅲ)配合物合成及抗肿瘤机制研究 | 第47-63页 |
| 3.1 引言 | 第47-48页 |
| 3.2 实验材料 | 第48-49页 |
| 3.2.1 实验试剂 | 第48页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第48-49页 |
| 3.3 实验方法 | 第49-51页 |
| 3.3.1 配体THPDP的合成与表征 | 第49页 |
| 3.3.2 Cis-[Ir(ppy)_2Cl]_2的合成 | 第49页 |
| 3.3.3 配合物[Ir(ppy)_2(THPDP)]PF_6(Ir-1)合成与表征 | 第49页 |
| 3.3.4 DAPI染色法和AO/EB双染法观察细胞凋亡 | 第49-50页 |
| 3.3.5 线粒体定位实验 | 第50页 |
| 3.3.6 细胞内Ca~(2+)水平检测 | 第50页 |
| 3.3.7 免疫染色法检测细胞色素c的释放 | 第50-51页 |
| 3.4 实验结果及讨论 | 第51-61页 |
| 3.4.1 配合物的紫外、荧光光谱测定 | 第51页 |
| 3.4.2 配合物对细胞增殖的影响 | 第51-52页 |
| 3.4.3 Ir-1对B16细胞形态学影响 | 第52-53页 |
| 3.4.4 DNA损伤检测 | 第53页 |
| 3.4.5 Ir-1引起细胞内活性氧变化检测 | 第53-54页 |
| 3.4.6 亚细胞定位及线粒体膜电位检测 | 第54-55页 |
| 3.4.7 细胞内Ca~(2+)水平检测 | 第55-56页 |
| 3.4.8 细胞色素c释放检测 | 第56-57页 |
| 3.4.9 Ir-1对B16细胞侵袭能力的影响 | 第57-58页 |
| 3.4.10 Ir-1对B16自噬作用的影响 | 第58-59页 |
| 3.4.11 Ir-1阻滞细胞周期在G2/M期 | 第59-60页 |
| 3.4.12 Ir-1,NAC和3-MA对caspase-3、Bcl-2家族及cleaved-PARP表达影响 | 第60页 |
| 3.4.13 Ir-1抑制PI3K/Akt/mTOR通路的活性 | 第60-61页 |
| 3.5 小结 | 第61-63页 |
| 第四章 具有抗非小细胞肺癌活性的铱(Ⅲ)配合物合成及抗肿瘤机制研究 | 第63-76页 |
| 4.1 引言 | 第63-64页 |
| 4.2 实验材料 | 第64页 |
| 4.2.1 实验试剂 | 第64页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第64页 |
| 4.3 实验方法 | 第64-66页 |
| 4.3.1 Cis-[Ir(bzq)_2Cl]_2的合成 | 第64页 |
| 4.3.2 Cis-[Ir(piq)_2Cl]_2的合成 | 第64页 |
| 4.3.3 配体adppz的合成与表征 | 第64-65页 |
| 4.3.4 [Ir(ppy)_2(adppz)]PF_6(Ir-1)的合成与表征 | 第65页 |
| 4.3.5 [Ir(bzq)_2(adppz)]PF_6(Ir-2)的合成与表征 | 第65-66页 |
| 4.3.6 [Ir(piq)_2(adppz)]PF_6(Ir-3)的合成与表征 | 第66页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第66-75页 |
| 4.4.1 配合物的体外毒性 | 第66-67页 |
| 4.4.2 细胞凋亡结果分析 | 第67-68页 |
| 4.4.3 活性氧的定性与定量 | 第68-70页 |
| 4.4.4 线粒体膜电位的变化 | 第70-71页 |
| 4.4.5 细胞内Ca~(2+)稳态 | 第71页 |
| 4.4.6 细胞色素c的释放 | 第71-72页 |
| 4.4.7 彗星实验结果 | 第72-73页 |
| 4.4.8 细胞周期分布检测结果 | 第73页 |
| 4.4.9 配合物抑制细胞侵袭 | 第73-74页 |
| 4.4.10 免疫印迹结果分析 | 第74-75页 |
| 4.5 小结 | 第75-76页 |
| 第五章 铱(Ⅲ)配合物合成及长循环制剂的体外、体内抗肿瘤活性研究 | 第76-94页 |
| 5.1 前言 | 第76-77页 |
| 5.2 实验材料 | 第77-78页 |
| 5.2.1 实验试剂 | 第77页 |
| 5.2.2 实验仪器 | 第77-78页 |
| 5.3 实验方法 | 第78-82页 |
| 5.3.1 配体及配合物合成路线 | 第78页 |
| 5.3.2 配体CPIP合成 | 第78页 |
| 5.3.3 配体DCPIP合成 | 第78-79页 |
| 5.3.4 配体TCPIP合成 | 第79页 |
| 5.3.5 [Ir(ppy)_2(CPIP)]PF_6(Ir-1)的合成与表征 | 第79页 |
| 5.3.6 [Ir(ppy)_2(DCPIP)]PF_6(Ir-2)的合成与表征 | 第79页 |
| 5.3.7 [Ir(ppy)_2(TCPIP)]PF_6(Ir-3)的合成与表征 | 第79-80页 |
| 5.3.8 负载配合物的PEG化脂质体的合成 | 第80页 |
| 5.3.9 脂质体的表征 | 第80页 |
| 5.3.10 包封率及载药量分析 | 第80-81页 |
| 5.3.11 溶酶体通透性检测 | 第81页 |
| 5.3.12 亚细胞定位实验 | 第81页 |
| 5.3.13 免疫荧光染色检测微管变化 | 第81页 |
| 5.3.14 体内抑瘤实验 | 第81-82页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第82-93页 |
| 5.4.1 配合物和脂质体的紫外及荧光光谱 | 第82页 |
| 5.4.2 脂质体的表征 | 第82-84页 |
| 5.4.3 体外细胞毒性检测 | 第84页 |
| 5.4.4 Ir-Lipo的细胞内定位 | 第84-85页 |
| 5.4.5 溶酶体通透性检测 | 第85-86页 |
| 5.4.6 线粒体膜电位的改变 | 第86-87页 |
| 5.4.7 活性氧水平升高 | 第87页 |
| 5.4.8 彗星实验结果 | 第87-88页 |
| 5.4.9 凋亡检测结果 | 第88-89页 |
| 5.4.10 细胞周期阻滞结果 | 第89页 |
| 5.4.11 Ir-Lipo引起细胞自噬 | 第89-90页 |
| 5.4.12 免疫印迹实验结果 | 第90-91页 |
| 5.4.13 免疫荧光检测微管蛋白变化 | 第91-92页 |
| 5.4.14 体内抑瘤效果评价 | 第92-93页 |
| 5.5 小结 | 第93-94页 |
| 第六章 总结与展望 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
| 硕士期间发表学术论文情况 | 第117页 |
