| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 前言 | 第12-21页 |
| 1.1 昆虫的嗅觉感受机制 | 第12-13页 |
| 1.2 昆虫的触角感受器 | 第13-14页 |
| 1.3 昆虫的OBPs | 第14-17页 |
| 1.3.1 OBPs的类型 | 第14-15页 |
| 1.3.2 OBPs在昆虫触角中的分布 | 第15-16页 |
| 1.3.3 OBPs的功能研究 | 第16页 |
| 1.3.4 OBPs的结构 | 第16-17页 |
| 1.4 昆虫的性信息素 | 第17-18页 |
| 1.5 小菜蛾寄主植物与忌避植物的研究概况 | 第18-20页 |
| 1.5.1 小菜蛾寄主植物与寄主植物挥发物 | 第18-19页 |
| 1.5.2 小菜蛾忌避植物与番茄挥发物 | 第19页 |
| 1.5.3 植物挥发物对小菜蛾行为的影响 | 第19-20页 |
| 1.6 本研究的意义和目的 | 第20页 |
| 1.7 技术路线 | 第20-21页 |
| 第二章 小菜蛾普通气味结合蛋白基因的克隆与序列分析 | 第21-36页 |
| 2.1 材料与方法 | 第21-26页 |
| 2.1.1 供试昆虫、菌株和载体 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂及工具酶 | 第21-22页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第22页 |
| 2.1.4 缓冲液及培养基 | 第22页 |
| 2.1.5 实验方法 | 第22-26页 |
| 2.1.5.1 总RNA提取 | 第22-23页 |
| 2.1.5.2 cDNA合成 | 第23页 |
| 2.1.5.3 引物设计与合成 | 第23-24页 |
| 2.1.5.4 小菜蛾GOBP基因的RT-PCR扩增 | 第24页 |
| 2.1.5.5 PCR产物纯化回收 | 第24-25页 |
| 2.1.5.6 连接及转化 | 第25页 |
| 2.1.5.7 阳性克隆的筛选 | 第25-26页 |
| 2.1.5.8 序列测定与分析 | 第26页 |
| 2.2 结果与分析 | 第26-34页 |
| 2.2.1 总RNA的提取 | 第26-27页 |
| 2.2.2 目的基因的RT-PCR扩增 | 第27页 |
| 2.2.3 阳性克隆子鉴定 | 第27-28页 |
| 2.2.4 小菜蛾GOBPs氨基酸序列分析 | 第28-34页 |
| 2.2.4.1 小菜蛾GOBPs的基本信息 | 第28-30页 |
| 2.2.4.2 小菜蛾普通气味结合蛋白保守结构域分析 | 第30-32页 |
| 2.2.4.3 小菜蛾GOBPs氨基酸序信号肽及疏水性分析 | 第32-33页 |
| 2.2.4.4 进化树分析 | 第33-34页 |
| 2.3 讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 小菜蛾普通气味结合蛋白的表达与结构分析 | 第36-50页 |
| 3.1 材料与方法 | 第36-43页 |
| 3.1.1 材料 | 第36-38页 |
| 3.1.1.1 供试昆虫、菌株和载体 | 第36页 |
| 3.1.1.2 主要试剂 | 第36-37页 |
| 3.1.1.3 主要实验仪器 | 第37页 |
| 3.1.1.4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及常用缓冲液配方 | 第37-38页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第38-43页 |
| 3.1.2.1 引物设计与合成 | 第38页 |
| 3.1.2.2 PCR扩增 | 第38-39页 |
| 3.1.2.3 连接转化 | 第39页 |
| 3.1.2.4 表达载体构建 | 第39-40页 |
| 3.1.2.5 原核表达与纯化 | 第40-43页 |
| 3.1.2.6 蛋白的二级结构分析 | 第43页 |
| 3.2 结果与分析 | 第43-48页 |
| 3.2.1 目的片段的PCR扩增 | 第43-44页 |
| 3.2.2 原核表达载体的构建 | 第44-45页 |
| 3.2.3 蛋白的诱导表达及分离纯化 | 第45-47页 |
| 3.2.4 重组蛋白PxylGOBPs的二级结构分析 | 第47-48页 |
| 3.3 讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 小菜蛾气味结合蛋白结合特性分析 | 第50-61页 |
| 4.1 材料与方法 | 第50-52页 |
| 4.1.1 材料 | 第50-51页 |
| 4.1.2 方法 | 第51-52页 |
| 4.2 结果与分析 | 第52-58页 |
| 4.2.1 PxylGOBPs与1-NPN的结合特性 | 第52-53页 |
| 4.2.2 PxylGOBPs与性信息素成分的结合特性 | 第53-55页 |
| 4.2.3 PxylGOBPs与醇类的结合特性 | 第55-56页 |
| 4.2.4 PxylGOBPs与醛酮类的结合特性 | 第56页 |
| 4.2.5 PxylGOBPs与酯类的结合特性 | 第56-57页 |
| 4.2.6 PxylGOBPs与烯烃类的结合特性 | 第57-58页 |
| 4.2.7 PxylGOBPs与其他化合物的结合特性 | 第58页 |
| 4.3 讨论 | 第58-61页 |
| 第五章 小菜蛾普通气味结合蛋白在触角中的定位 | 第61-66页 |
| 5.1 材料与方法 | 第61-63页 |
| 5.1.1 供试昆虫 | 第61页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第61-62页 |
| 5.1.3 主要实验仪器 | 第62页 |
| 5.1.4 方法 | 第62-63页 |
| 5.1.4.1 Western blot检测 | 第62-63页 |
| 5.1.4.2 PxylGOBPs的免疫荧光定位 | 第63页 |
| 5.2 结果与分析 | 第63-65页 |
| 5.2.1 Western blot检测 | 第63-64页 |
| 5.2.2 PxylGOBPs在小菜蛾触角中的荧光定位 | 第64-65页 |
| 5.3 讨论 | 第65-66页 |
| 第六章 总结与展望 | 第66-68页 |
| 6.1 小菜蛾普通气味结合蛋白基因克隆与序列分析 | 第66页 |
| 6.2 小菜蛾普通气味结合蛋白的原核表达与结构分析 | 第66页 |
| 6.3 小菜蛾普通气味结合蛋白结合特性分析 | 第66-67页 |
| 6.4 小菜蛾普通气味结合蛋白在触角中的定位 | 第67页 |
| 6.5 展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
