| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-21页 |
| 1.1 异育银鲫的生物学特性 | 第9-10页 |
| 1.1.1 异育银鲫的形态学特征 | 第9页 |
| 1.1.2 异育银鲫的食性及生长特性 | 第9页 |
| 1.1.3 异育银鲫的生活习性和繁殖习性 | 第9-10页 |
| 1.2 异育银鲫的常见病害 | 第10-13页 |
| 1.2.1 细菌性疾病 | 第10-11页 |
| 1.2.2 真菌性疾病 | 第11-12页 |
| 1.2.3 寄生虫病 | 第12-13页 |
| 1.2.4 病毒性疾病 | 第13页 |
| 1.3 疱疹病毒Ⅱ型的国内外流行现状 | 第13-14页 |
| 1.4 疱疹病毒Ⅱ型的生物学特性及流行特征 | 第14页 |
| 1.5 异育银鲫鳃出血病的临床症状特征及病理特征 | 第14-15页 |
| 1.6 异育银鲫鳃出血病的研究方法及其进展 | 第15-19页 |
| 1.6.1 电镜观察方法的应用状况 | 第15页 |
| 1.6.2 细胞培养分离技术在研究CyHV-2中的应用 | 第15-16页 |
| 1.6.3 PCR技术在检测CyHV-2中的应用 | 第16-18页 |
| 1.6.4 CyHV-2的免疫学检测方法的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.7 本论文的研究目的、研究内容和意义以及实验技术路线 | 第19-21页 |
| 本论文的主要研究内容 | 第19页 |
| 本论文的实验技术路线 | 第19-21页 |
| 第2章 异育银鲫中鲤疱疹病毒Ⅱ型载量测定方法的建立 | 第21-31页 |
| 2.1 材料与方法 | 第21-23页 |
| 2.1.1 实验鱼和病毒来源 | 第21-22页 |
| 2.1.2 主要的实验仪器和设备 | 第22页 |
| 2.1.3 生物实验试剂 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-25页 |
| 2.2.1 病毒的分离与纯化 | 第23页 |
| 2.2.2 病毒回感和病鱼组织的获取 | 第23页 |
| 2.2.3 DNA的提取 | 第23-24页 |
| 2.2.4 普通PCR检测 | 第24页 |
| 2.2.5 荧光定量PCR | 第24-25页 |
| 2.3 实验结果 | 第25-29页 |
| 2.3.1 普通PCR检测结果 | 第25-26页 |
| 2.3.2 疾病感染症状 | 第26-27页 |
| 2.3.3 溶解曲线 | 第27页 |
| 2.3.4 荧光定量PCR标准曲线的绘制 | 第27-28页 |
| 2.3.5 QRT-PCR检测CyHV-16的组织分布 | 第28-29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-31页 |
| 第3章 鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF72基因的克隆、蛋白表达和抗体制备 | 第31-41页 |
| 3.1 材料 | 第31-33页 |
| 3.1.1 用到的仪器设备 | 第31-32页 |
| 3.1.2 载体、菌株及病毒来源 | 第32页 |
| 3.1.3 用到的主要生物试剂 | 第32页 |
| 3.1.4 引物的设计与合成 | 第32-33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-36页 |
| 3.2.1 提取患病异育银鲫体内组织总DNA | 第33页 |
| 3.2.2 CyHV-2-ORF72的PCR扩增 | 第33页 |
| 3.2.3 CyHV-2-ORF72基因序列与pET-28a载体连接 | 第33页 |
| 3.2.4 重组质粒在感受态细胞中的转化 | 第33-34页 |
| 3.2.5 筛选菌落PCR阳性克隆和测序分析 | 第34页 |
| 3.2.6 重组质粒的原核表达 | 第34-35页 |
| 3.2.7 重组蛋白的纯化 | 第35页 |
| 3.2.8 CyHV-2-ORF72蛋白的多克隆抗体的制备 | 第35-36页 |
| 3.2.9 Western blot验证ORF72蛋白多克隆抗体 | 第36页 |
| 3.3 结果 | 第36-39页 |
| 3.3.1 目的基因的PCR扩增 | 第36-37页 |
| 3.3.2 CyHV-2 ORF72重组蛋白的表达 | 第37-38页 |
| 3.3.3 CyHV-2 ORF72重组蛋白的纯化 | 第38页 |
| 3.3.4 CyHV-2 ORF72纯化蛋白的多克隆抗体的Western blot验证 | 第38-39页 |
| 3.4 讨论 | 第39-41页 |
| 第4章 CyHV-2感染对异育银鲫血液生化指标、血象指标及血清酶活的影响分析 | 第41-51页 |
| 4.1 材料 | 第41-42页 |
| 4.1.1 主要仪器设备 | 第41-42页 |
| 4.1.2 生物试剂 | 第42页 |
| 4.2 实验方法 | 第42-43页 |
| 4.2.1 鱼血的采集和鱼血清的分离 | 第42-43页 |
| 4.2.2 血清酶活的测定 | 第43页 |
| 4.2.3 鱼血象指标和生化指标的测定 | 第43页 |
| 4.2.4 数据的处理 | 第43页 |
| 4.3 结果 | 第43-47页 |
| 4.3.1 CyHV-2病毒的感染对异育银鲫血清酶活的影响 | 第43-44页 |
| 4.3.2 CyHV-2病毒的感染对异育银鲫血象指标的影响 | 第44-46页 |
| 4.3.3 CyHV-2病毒的感染对异育银鲫血液生化指标的影响 | 第46-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-51页 |
| 全文小结 | 第51-52页 |
| 进一步研究方向 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-62页 |
| 在读期间发表的论文 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-65页 |
