| 内容提要 | 第4-5页 |
| 中文摘要 | 第5-10页 |
| abstract | 第10-14页 |
| 第1章 绪论 | 第20-30页 |
| 1.1 前言 | 第20-21页 |
| 1.2 综述 | 第21-30页 |
| 1.2.1 结直肠癌的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.2.2 CEMIP分子结构和功能 | 第22-23页 |
| 1.2.3 CEMIP信号转导与调控 | 第23-26页 |
| 1.2.4 CEMIP与肿瘤 | 第26-28页 |
| 1.2.5 总结 | 第28-30页 |
| 第2章 CEMIP在结直肠癌Wnt/β-catenin/Snail信号通路及上皮间充质化转化(EMT)中的作用 | 第30-60页 |
| 2.1 材料与方法 | 第30-32页 |
| 2.1.1 细胞系和细胞培养 | 第30页 |
| 2.1.2 常规试剂和耗材 | 第30-32页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第32页 |
| 2.2 实验步骤 | 第32-45页 |
| 2.2.1 细胞传代 | 第32-33页 |
| 2.2.2 质粒构建和转染 | 第33-37页 |
| 2.2.3 MTT增殖试验 | 第37-38页 |
| 2.2.4 划痕试验 | 第38页 |
| 2.2.5 Transwell侵袭实验 | 第38页 |
| 2.2.6 荧光定量PCR | 第38-40页 |
| 2.2.7 Westernblot | 第40-44页 |
| 2.2.8 免疫荧光染色 | 第44-45页 |
| 2.2.9 统计学分析 | 第45页 |
| 2.3 结果 | 第45-58页 |
| 2.3.1 在结直肠癌细胞系HCT116和SW480中构建CEMIP降表达的稳定细胞株 | 第45-48页 |
| 2.3.2 沉默CEMIP后结直肠癌HCT116和SW480细胞的增殖能力受到抑制 | 第48-50页 |
| 2.3.3 CEMIPshRNA减弱了结直肠癌HCT116和SW480细胞的迁移能力 | 第50-51页 |
| 2.3.4 CEMIPshRNA抑制了结直肠癌HCT116和SW480细胞的体外侵袭能力 | 第51-52页 |
| 2.3.5 CEMIPshRNA抑制了结直肠癌HCT116和SW480细胞EMT的转换进程 | 第52-54页 |
| 2.3.6 沉默CEMIP能够抑制结直肠癌HCT116和SW480细胞中间质标志物的表达但上调上皮细胞标志物的表达 | 第54-55页 |
| 2.3.7 CEMIPshRNA能够抑制结直肠癌HCT116和SW480细胞中的Wnt/β-catenin/Snail信号通路 | 第55-58页 |
| 2.4 讨论 | 第58-59页 |
| 2.5 小结 | 第59-60页 |
| 第3章 CEMIP对结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响及在内质网应激中的作用机制研究 | 第60-94页 |
| 3.1 材料与方法 | 第60-63页 |
| 3.1.1 细胞系和细胞培养 | 第60页 |
| 3.1.2 常规试剂和耗材 | 第60-62页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第62-63页 |
| 3.2 实验步骤 | 第63-75页 |
| 3.2.1 细胞传代培养 | 第63页 |
| 3.2.2 MTT检测 | 第63页 |
| 3.2.3 克隆形成试验 | 第63-64页 |
| 3.2.4 细胞周期 | 第64页 |
| 3.2.5 Westernblot | 第64-68页 |
| 3.2.6 构建动物模型 | 第68页 |
| 3.2.7 HE染色 | 第68-69页 |
| 3.2.8 TUNEL细胞凋亡检测 | 第69-70页 |
| 3.2.9 免疫组织化学染色 | 第70-72页 |
| 3.2.10 细胞凋亡试验 | 第72-73页 |
| 3.2.11 qRT-PCR | 第73-75页 |
| 3.3 结果 | 第75-92页 |
| 3.3.1 CEMIPshRNA-1和shRNA-2抑制结直肠癌细胞中内源性CEMIP的表达 | 第75-76页 |
| 3.3.2 沉默CEMIP后结肠癌细胞的增殖能力受损 | 第76-77页 |
| 3.3.3 CEMIPshRNA抑制结肠癌细胞的克隆形成 | 第77-78页 |
| 3.3.4 CEMIPshRNA诱导结肠癌细胞周期阻滞在G1期 | 第78-80页 |
| 3.3.5 下调CEMIP能够抑制移植瘤小鼠的肿瘤生长 | 第80-81页 |
| 3.3.6 下调CEMIP能够诱导移植瘤小鼠肿瘤细胞的凋亡 | 第81-82页 |
| 3.3.7 沉默CEMIP后的移植瘤小鼠肿瘤细胞中CEMIP表达降低. | 第82-83页 |
| 3.3.8 沉默CEMIP降低了移植瘤小鼠肿瘤细胞中GRP78蛋白的表达水平 | 第83-84页 |
| 3.3.9 CEMIPshRNA诱导了结直肠癌细胞的凋亡表达 | 第84-87页 |
| 3.3.10 CEMIPshRNA下调了未折叠蛋白反应(unfoldedproteinresponse,UPR)相关蛋白的表达 | 第87-88页 |
| 3.3.11 CEMIPshRNA促进了TG-诱导的细胞凋亡 | 第88-89页 |
| 3.3.12 CEMIPshRNA增加了TG-诱导的细胞凋亡蛋白的表达 | 第89-92页 |
| 3.4 讨论 | 第92-93页 |
| 3.5 小结 | 第93-94页 |
| 第4章 结论 | 第94-96页 |
| 参考文献 | 第96-102页 |
| 作者简介及已在学期间取得的科研成果 | 第102-104页 |
| 致谢 | 第104页 |
