摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第11-13页 |
第一章 引言 | 第13-25页 |
1.1 前言 | 第13页 |
1.2 口蹄疫 | 第13-19页 |
1.2.1 口蹄疫的流行现状 | 第13-14页 |
1.2.2 口蹄疫病毒的结构特点及其致病性 | 第14-16页 |
1.2.3 宿主抗口蹄疫病毒感染的免疫机理研究 | 第16-17页 |
1.2.4 口蹄疫的防控现状 | 第17-19页 |
1.3 miRNAs和RNAi | 第19-24页 |
1.3.1 miRNAs的特点及研究进展 | 第19-21页 |
1.3.2 RNAi在常见猪病中的研究进展 | 第21-24页 |
1.4 总结与展望 | 第24-25页 |
第二章 材料与方法 | 第25-32页 |
2.1 实验材料 | 第25-26页 |
2.1.1 质粒、菌株、毒株和细胞系 | 第25页 |
2.1.2 实验试剂 | 第25页 |
2.1.3 实验仪器 | 第25页 |
2.1.4 常用试剂配置 | 第25-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-32页 |
2.2.1 细胞培养 | 第26页 |
2.2.2 口蹄疫病毒的繁殖 | 第26页 |
2.2.3 口蹄疫病毒TCID_(50)的测定 | 第26-27页 |
2.2.4 病毒感染实验 | 第27-28页 |
2.2.5 芯片杂交及数据分析 | 第28页 |
2.2.6 细胞转染 | 第28页 |
2.2.7 miRNAs的提取及定量 | 第28-29页 |
2.2.8 miR-1307过量表达细胞株的构建 | 第29页 |
2.2.9 RT-qPCR | 第29-30页 |
2.2.10 Western blot | 第30页 |
2.2.11 双荧光素酶报告实验 | 第30-31页 |
2.2.12 乳鼠攻毒实验 | 第31-32页 |
第三章 实验结果与分析 | 第32-41页 |
3.1 口蹄疫病毒感染差异调控miRNAs的鉴定 | 第32页 |
3.2 口蹄疫病毒感染诱导miR-1307的表达 | 第32-33页 |
3.3 转染miR-1307的模拟物显著抑制口蹄疫病毒的复制 | 第33-34页 |
3.4 过量表达miR-1307抑制口蹄疫病毒的复制 | 第34-35页 |
3.5 过量表达miR-1307特异性地降低VP1和VP3的蛋白表达水平 | 第35-36页 |
3.6 miR-1307特异性地降低VP1和VP3的RNA稳定性 | 第36-38页 |
3.7 miR-1307可能间接调控VP1和VP3的RNA稳定性 | 第38-39页 |
3.8 miR-1307能够显著延缓口蹄疫病毒对乳鼠的致死效应 | 第39-41页 |
第四章 讨论 | 第41-43页 |
4.1 猪源miR-1307抑制口蹄疫病毒的复制 | 第41页 |
4.2 miR-1307降低口蹄疫病毒基因组VP1和VP3编码序列的RNA稳定性 | 第41-42页 |
4.3 miR-1307在口蹄疫防控方面有临床应用前景 | 第42-43页 |
第五章 全文结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简历 | 第51页 |