| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 1 引言 | 第10-21页 |
| 1.1 甜瓜 | 第10-11页 |
| 1.2 果实成熟研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2.1 果实成熟的分子机理 | 第11页 |
| 1.2.2 果实成熟与细胞壁 | 第11-12页 |
| 1.3 扩展蛋白研究进展 | 第12-16页 |
| 1.3.1 扩展蛋白的发现 | 第12-13页 |
| 1.3.2 扩展蛋白的结构 | 第13-14页 |
| 1.3.3 扩展蛋白基因的功能 | 第14-16页 |
| 1.4 CRISPR/Cas9的研究进展 | 第16-20页 |
| 1.4.1 通过ZFNs和TALENs进行基因组编辑 | 第17页 |
| 1.4.2 CRISPR/Cas9结构和分解活性 | 第17-18页 |
| 1.4.3 用于植物的CRISPR/Cas9编辑系统 | 第18-20页 |
| 1.5 研究的目的及意义 | 第20-21页 |
| 2 实验材料与方法 | 第21-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第21页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-31页 |
| 2.2.1 甜瓜扩展蛋白基因家族成员鉴定 | 第22页 |
| 2.2.2 甜瓜扩展蛋白基因家族染色体定位与基因结构分析 | 第22页 |
| 2.2.3 甜瓜扩展蛋白家族基因进化分析 | 第22-23页 |
| 2.2.4 目的基因的克隆 | 第23-24页 |
| 2.2.5 基因表达特性分析 | 第24-25页 |
| 2.2.6 超表达载体的构建 | 第25页 |
| 2.2.7 CRISPER/Cas9载体的构建 | 第25-28页 |
| 2.2.8 甜瓜果实瞬时表达 | 第28-29页 |
| 2.2.9 甜瓜果实稳定遗传 | 第29-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-51页 |
| 3.1 甜瓜扩展蛋白家族的鉴定与注释 | 第31-35页 |
| 3.2 甜瓜扩展蛋白家族基因结构分析 | 第35-36页 |
| 3.3 甜瓜扩展蛋白家族的进化分析 | 第36-38页 |
| 3.4 甜瓜CmEXPA8、CmEXPA12基因cDNA克隆 | 第38-40页 |
| 3.4.1 RT-PCR扩增的产物分析 | 第38页 |
| 3.4.2 克隆重组质粒的筛选 | 第38-39页 |
| 3.4.3 测序分析 | 第39-40页 |
| 3.5 甜瓜CmEXPA8、CmEXPA12表达特性分析 | 第40-41页 |
| 3.6 超表达载体的构建 | 第41-42页 |
| 3.6.1 超表达重组质粒的菌体PCR检测 | 第41页 |
| 3.6.2 超表达重组质粒的酶切检测 | 第41-42页 |
| 3.7 CRISPER/Cas9载体的构建 | 第42-44页 |
| 3.7.1 第一轮PCR扩增 | 第42-43页 |
| 3.7.2 第二轮PCR扩增 | 第43-44页 |
| 3.7.3 菌体PCR检测 | 第44页 |
| 3.8 甜瓜果实瞬时表达分析 | 第44-45页 |
| 3.9 甜瓜的遗传转化 | 第45-51页 |
| 3.9.1 转化植株阳性率检测 | 第45-47页 |
| 3.9.2 靶位点测序 | 第47-48页 |
| 3.9.3 T1代植株表型分析 | 第48-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 附录 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
