| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第9-18页 |
| 1.1 影响果实成熟因素的研究概况 | 第9-11页 |
| 1.1.1 高温对果实成熟的影响 | 第9-10页 |
| 1.1.2 转录因子对果实成熟的调控 | 第10-11页 |
| 1.2 热激蛋白家族的研究进展 | 第11-13页 |
| 1.2.1 热激蛋白的种类和功能 | 第11-13页 |
| 1.2.2 热激蛋白的表达调控 | 第13页 |
| 1.3 NAC家族的研究进展 | 第13-15页 |
| 1.4 转录组测序与生物信息学 | 第15-16页 |
| 1.4.1 转录组测序 | 第15页 |
| 1.4.2 生物信息学 | 第15-16页 |
| 1.5 基因编辑技术的研究概况 | 第16-17页 |
| 1.6 甜瓜简介 | 第17-18页 |
| 1.7 本研究的目的及意义 | 第18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-31页 |
| 2.1 植物材料 | 第18-19页 |
| 2.2 菌种与质粒 | 第19页 |
| 2.3 主要试剂 | 第19页 |
| 2.4 差异表达基因的选取 | 第19-20页 |
| 2.5 甜瓜Hsp90家族成员的鉴定 | 第20页 |
| 2.6 CmNAC34和CmHsp83基因的表达特性分析 | 第20-22页 |
| 2.7 CmNAC34和CmHsp83基因的cDNA克隆 | 第22-24页 |
| 2.7.1 cDNA序列的PCR扩增 | 第22-24页 |
| 2.7.2 连接与转化 | 第24页 |
| 2.7.3 重组质粒的筛选及测序 | 第24页 |
| 2.8 超表达载体的构建 | 第24-25页 |
| 2.8.1 超表达重组质粒的菌体PCR实验 | 第24-25页 |
| 2.8.2 超表达重组质粒的酶切验证实验 | 第25页 |
| 2.9 基因编辑载体构建 | 第25-28页 |
| 2.9.1 sgRNA靶位点的选择及接头引物的设计 | 第25-26页 |
| 2.9.2 sgRNA表达盒的构建 | 第26-27页 |
| 2.9.3 双靶点pYLCRISPR/Cas9载体的构建 | 第27-28页 |
| 2.10 构建成功的载体在甜瓜果实中的瞬时表达 | 第28-29页 |
| 2.10.1 农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第28-29页 |
| 2.10.2 侵染液的制备 | 第29页 |
| 2.10.3 甜瓜的田间种植 | 第29页 |
| 2.11 甜瓜的遗传转化 | 第29-31页 |
| 2.11.1 子房注射法转化甜瓜 | 第30页 |
| 2.11.2 甜瓜T1代转化植株的检测及测序 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-51页 |
| 3.1 差异表达基因CmNAC34和CmHsp | 第31页 |
| 3.2 甜瓜CmHsp90基因家族5个成员的结构分析 | 第31-32页 |
| 3.3 CmHsp90家族5个成员蛋白的保守基序分析 | 第32页 |
| 3.4 CmHsp90家族5个成员蛋白的系统进化分析 | 第32-33页 |
| 3.5 甜瓜CmHsp83和CmNAC34基因启动子 | 第33-34页 |
| 3.6 CmNAC和CmHsp83的表达模式 | 第34-35页 |
| 3.7 CmNAC34和CmHsp83基因cDNA克隆的检测 | 第35-39页 |
| 3.8 超表达载体的检测 | 第39-41页 |
| 3.9 基因编辑载体的检测 | 第41-44页 |
| 3.10 甜瓜果实的瞬时表达结果分析 | 第44-45页 |
| 3.11 遗传转化的T1代甜瓜植株的检测 | 第45-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 在读期间发表论文情况 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
