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OsLSR:一个调控免疫反应和花发育的水稻基因

致谢第6-7页
摘要第7-10页
abstract第10-13页
英文缩略词第19-20页
第一章 文献综述第20-38页
    1.1 植物免疫系统简述第20-21页
    1.2 植物NLR基因的研究进展第21-28页
        1.2.1 植物NLR蛋白的生物学功能及序列特征第22-23页
        1.2.2 NLR蛋白各结构域的功能第23-28页
            1.2.2.1 NLR蛋白N端的功能第23-25页
            1.2.2.2 NB-ARC结构域的功能第25-26页
            1.2.2.3 LRR结构域的功能第26-28页
    1.3 NLR蛋白的识别模式第28-29页
    1.4 NLR蛋白激活模式第29-32页
    1.5 NLR蛋白的亚细胞分布特性第32-34页
    1.6 NLR蛋白的其它生理生化功能第34-35页
    1.7 植物花发育研究第35-37页
    1.8 项目的研究意义第37-38页
第二章 材料与方法第38-47页
    2.1 材料第38-39页
        2.1.1 植物材料第38页
        2.1.2 菌株和质粒第38页
        2.1.3 主要酶和试剂第38页
        2.1.4 主要培养基和溶液第38-39页
    2.2 方法第39-47页
        2.2.1 植物材料种植第39页
        2.2.2 RNA提取第39页
        2.2.3 cDNA合成第39-40页
        2.2.4 OsLSR的克隆及相关载体构建第40-43页
        2.2.5 实时荧光定量PCR第43页
        2.2.6 农杆菌介导的烟草瞬时表达第43-44页
        2.2.7 GUS组织化学染色第44页
        2.2.8 H_2O_2 DAB染色第44页
        2.2.9 农杆菌介导的水稻愈伤遗传转化第44-45页
        2.2.10 酵母转化第45-47页
第三章 OsLSR表达上调激活水稻免疫应答导致生长弱势第47-58页
    3.1 转Bt基因低结实率插入突变体T51-1的发现和表型鉴定第47-48页
        3.1.1 T51-1的突变体来源第47页
        3.1.2 T51-1的表型特征第47-48页
    3.2 外源Bt基因插入位点确认及OsLSR基因克隆第48-52页
        3.2.1 OsLSR编码一个CC-NB-LRR抗病蛋白第49-50页
        3.2.3 OsLSR N端氨基酸序列分析第50-52页
    3.3 OsLSR表达上调激活水稻免疫应答导致生长弱势第52-54页
        3.3.1 外源Bt基因插入导致OsLSR在T51-1叶片中表达上调第52-53页
        3.3.2 OsLSR表达上调激活了T51-1的免疫应答导致弱势第53-54页
    3.4 OsLSR的过表达研究第54-56页
    3.5 讨论第56-58页
第四章 RNAi干扰OsLSR导致水稻小花分化异常第58-67页
    4.1 OsLSR的时空表达模式第58-61页
        4.1.1 OsLSR在水稻各个组织中的表达分析第58-59页
        4.1.2 OsLSR启动子驱动的GUS报告基因的表达特性第59-61页
    4.2 通过RNA干扰的OsLSR基因沉默的研究第61-65页
        4.2.1 OsLSR基因沉默对水稻生长发育的影响第61-65页
            4.2.1.1 OsLSR基因沉默导致转基因水稻根发育异常第61-62页
            4.2.1.2 OsLSR基因沉默导致水稻花器官分化紊乱第62-65页
    4.3 讨论第65-67页
第五章 OsLSR的亚细胞定位研究第67-77页
    5.1 瞬时表达OsLSR的eGFP融合蛋白诱导烟草叶片HR第67-68页
    5.2 OsLSR三个功能域荧光融合蛋白的亚细胞分布特点第68-74页
        5.2.1 OsLSR蛋白N端的亚细胞分布特性第69-71页
        5.2.2 OsLSR蛋白NB功能域eGFP融合蛋白表现为核质共分布第71页
        5.2.3 OsLSR蛋白C端的亚细胞分布特性第71-74页
    5.3 讨论第74-77页
第六章 过表达OsLSR各个功能域对水稻育性和花分化的影响第77-90页
    6.1 过量表达OsLSR的单独功能域或片段显著降低育性第78页
    6.2 过量表达OsLSR的功能域或片段影响水稻小花分化第78-82页
    6.3 过量表达OsLSR的功能域或片段对内源OsLSR转录水平的影响第82-83页
    6.4 OsLSR分子内互作研究第83-87页
        6.4.1 LSR1-178和LSR428-894在酵母中互作第84-85页
        6.4.2 LSR428-546负责了与完整LSR1-178的互作第85-86页
        6.4.3 LSR1-178在酵母中能形成二聚体并与完整OsLSR蛋白互作第86-87页
    6.5 讨论第87-90页
第七章 融合外源信号肽对OsLSR功能的影响第90-100页
    7.1 外源信号肽改变了LSRl-178::eGFP的亚细胞分布第90-91页
    7.2 外源信号肽对OsLSR诱导烟草叶片HR及水稻免疫应答的影响第91-94页
    7.3 过量表达LSR::eGFP~(NES)和LSR::eGFP~(NLS)对水稻育性及小花分化的影响第94-96页
    7.4 过量表达LSR::eGFP~(NES)和LSR::eGFP~(NLS)对水稻内源OsLSR转录水平的影响第96-98页
    7.5 讨论第98-100页
第八章 OsLSR1-178与OsSO和OsMT2b在酵母中存在互作第100-108页
    8.1 LSR1-178在酵母中与OsSO和OsMT2b存在互作第100-102页
    8.2 OsLSR对OsSO和OsMT2b的表达具有负调控作用第102页
    8.3 过量表达OsLSR的功能域对OsSO和OsMT2b转录水平的影响第102-104页
    8.4 OsLSR对OsSO和OsMT2b转录负调控的信号主要来源于细胞质第104-105页
    8.5 讨论第105-108页
全文总结第108-112页
参考文献第112-125页
附录第125-136页
    附录1 实验中用到的植物表达载体结构示意图第125-127页
    附录2 实验中用于载体构建和实时荧光定量PCR所用引物信息第127-130页
    附录3 OsLSR,OsSO,OsMT2b的mRNA序列信息第130-133页
    附录4 实验中用到的培养基配方第133-136页

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