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几丁质结合蛋白在卤虫休眠卵形成过程中的功能研究

常用缩略词表第5-6页
致谢第6-7页
前言第7-9页
摘要第9-11页
Abstract第11-12页
目录第13-17页
第一章 绪论第17-23页
    1 卤虫的特征和生态习性第17页
    2 卤虫的生活史第17-18页
    3 卤虫休眠卵的抗逆机制第18-20页
        3.1 海藻糖第19页
        3.2 p26第19页
        3.3 Artemin第19-20页
    4 休眠卵壳的结构第20-21页
    5 几丁质和几丁质结合蛋白的特点第21-22页
    6 展望第22-23页
第二章 Arp-CBPs的获得和表达特征分析第23-45页
    摘要第23页
    1 引言第23-24页
    2 材料和仪器第24-25页
        2.1 实验材料第24页
        2.2 实验试剂第24-25页
        2.3 实验仪器第25页
    3 实验方法第25-33页
        3.1 卤虫养殖第25-26页
        3.2 获取Arp-CBPs序列及分析第26-27页
        3.3 Real-time RT-PCR方法对Arp-CBPs基因表达特征分析第27-28页
        3.4 原位杂交方法检测Arp-CBPs基因的表达部位第28-33页
            3.4.1 制备原位杂交的探针第28-30页
            3.4.2 冷冻切片的制备第30-31页
            3.4.3 原位杂交第31-33页
    4 实验结果第33-43页
        4.1 Arp-CBPs基因和蛋白序列分析第33-37页
        4.2 Arp-CBPs的氨基酸序列比对和CBDs分析第37-39页
        4.3 Arp-CBPs的mRNA在不同生殖卤虫中的表达差异第39-40页
        4.4 Arp-CBPs的mRNA在卤虫休眠卵形成过程中的表达特征第40-42页
        4.5 Arp-CBPs是在卤虫休眠卵的胚胎细胞中表达第42-43页
    5 讨论第43-45页
第三章 Arp-CBPs的蛋白表达特征和定位第45-55页
    摘要第45页
    1 引言第45-46页
    2 材料和仪器第46页
        2.1 实验材料第46页
        2.2 实验试剂第46页
        2.3 实验仪器第46页
    3 实验方法第46-50页
        3.1 样品总蛋白质的抽提第46-47页
        3.2 Arp-CBPs的抗体制备第47-48页
        3.3 Western blotting检测Arp-CBPs的表达特征第48-49页
        3.4 胶体金偶联免疫组化第49-50页
            3.4.1 冷冻切片的制备第49页
            3.4.2 胶体金偶联的免疫组化第49-50页
    4 实验结果第50-53页
        4.1 Arp-CBPs在卤虫休眠卵形成过程中的表达特征第50-51页
        4.2 Arp-CBPs在卤虫休眠卵壳上的分布第51-53页
    5 讨论第53-55页
第四章 Arp-CBPs的功能研究第55-67页
    摘要第55页
    1 引言第55-56页
    2 材料与仪器第56-57页
        2.1 实验材料第56页
        2.2 实验试剂第56页
        2.3 实验仪器第56-57页
    3 实验方法第57-60页
        3.1 dsRNA的制备及干涉第57-58页
            3.1.1 制备dsRNA第57-58页
            3.1.2 dsRNA注射和培养第58页
        3.2 干涉效率检测第58-59页
            3.2.1 Real-time PCR检测mRNA干涉效率第58-59页
            3.2.2 Western blotting分析蛋白的干涉结果第59页
        3.3 透射电子显微镜下观察干涉现象第59页
        3.4 体外检测Arp-CBPs蛋白的糖结合活性第59-60页
    4 实验结果第60-65页
        4.1 干涉效率的检测第60-62页
        4.2 干涉结果观察第62-64页
        4.3 Arp-CBPs蛋白的糖结合活性第64-65页
    5 讨论第65-67页
结论第67-69页
参考文献第69-75页
附录一 常用试剂配制一览表第75-83页
    1 分子克隆常用试剂第75页
    2 感受态细胞制备常用试剂第75-76页
    3 核酸电泳常用试剂第76页
    4 Northern blotting分析常用试剂第76-78页
    5 Western blotting常用试剂第78-79页
    6 原位杂交常用试剂第79-81页
    7 质粒提取试剂第81页
    8 蛋白抽提和纯化试剂第81-82页
    9 体外结合的试剂第82-83页
附录二 引物清单第83-84页
附录三 作者简介第84页

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