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BAK1和SERK1参与调控拟南芥花器官脱落的分子机理

中文摘要第3-4页
Abstract第4页
第一部分 前言第8-18页
    1.1 植物体内类受体激酶第8-11页
        1.1.1 RLK参与植物激素油菜素内酯信号通路,调节生长发育第8-9页
        1.1.2 RLK参与调控植物发育,先天免疫和细胞死亡第9-10页
        1.1.3 BAK1与SERK1的已知功能第10-11页
    1.2 脱落是植物发育的重要环节第11-18页
        1.2.0 脱落部位的形态学观察第12-13页
        1.2.1 影响脱落发生的信号第13页
        1.2.2 IDA-HAE/HSL2第13-16页
        1.2.3 其他已报道的脱落过程相关基因第16-18页
第二部分 实验材料与方法第18-38页
    2.1 拟南芥植物材料的培养第18页
    2.2 分子实验第18-24页
        2.2.1 突变体基因型鉴定第18-20页
        2.2.2 目的基因表达情况鉴定第20-21页
        2.2.3 基因克隆第21-24页
    2.3 遗传实验第24-26页
        2.3.1 遗传杂交第24-25页
        2.3.2 转基因材料构建第25-26页
    2.4 生化实验第26-30页
        2.4.1 植物总蛋白的提取第26页
        2.4.2 WB鉴定标签第26-29页
        2.4.3 GUS染色第29-30页
    2.5 扫描电镜的使用第30页
    2.6 酵母双杂交第30-33页
        2.6.1 载体构建第30-31页
        2.6.2 酵母菌株转化第31页
        2.6.3 酵母双杂交第31-32页
        2.6.4 筛选阳性克隆第32页
        2.6.5 阳性杂交验证第32-33页
    2.7 双分子荧光互补技术(BiFC)第33-34页
        2.7.1 载体的构建第33页
        2.7.2 烟草瞬时表达系统第33-34页
        2.7.3 荧光显微镜观察互作情况第34页
    2.8 Co-IP免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)第34-36页
        2.8.1 烟草瞬时表达系统表达蛋白第35页
        2.8.2 烟草总蛋白的提取第35页
        2.8.3 免疫沉淀(IP)第35-36页
        2.8.4 Western Blot检测IP及Co-IP结果第36页
    2.9 遗传筛选对于Brassinazole不敏感的拟南芥突变体第36-38页
        2.9.1 突变体库的构建第36页
        2.9.2 突变体的筛选第36-38页
第三部分 结果与讨论第38-52页
    3.1 BAK1与SERK1参与调控拟南芥花器官脱落的分子机理第38-48页
        3.1.1 serk1-8, bak1-4,serk1-8 bak1-4花器官脱落情况统计第38页
        3.1.2 SERK1-OX,BAK1-OX花器官脱落情况统计第38-40页
        3.1.3 serk1-8 bak1-4离层区发育异常第40-43页
        3.1.4 SERK1与BAK1的表达谱GUS第43-44页
        3.1.5 酵母双杂交验证SERKs与HSLs的相互作用第44-45页
        3.1.6 BFC验证SERKs与HSLs的相互作用第45-46页
        3.1.7 免疫共沉淀(Co-IP)验证SERK1与HAE的相互作用第46-47页
        3.1.8 构建遗传突变体进行离层区观察第47-48页
    3.2 bak1-4背景下拟南芥BRZ不敏感突变体的筛选第48-52页
        3.2.1 筛选结果统计第48页
        3.2.2 104-I3对BRZ相对不敏感第48-49页
        3.2.3 104-I3对BL超敏感第49-50页
        3.2.4 104-I3发育表型分析以及插入位点克隆分析第50-52页
第四部分 小结第52-56页
    4.1 BAK1与SERK1花器官脱落的完成是必须的第52-55页
    4.2 104-I3可能参与BR信号的转导第55-56页
参考文献第56-60页
致谢第60页

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