| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 前言 | 第8-16页 |
| 1.1 C一反应蛋白概述 | 第8页 |
| 1.2 CRP结构 | 第8-10页 |
| 1.3 CRP受体 | 第10-11页 |
| 1.3.1 PCh结合位点 | 第10页 |
| 1.3.2 Ca离子结合位点 | 第10-11页 |
| 1.3.3 Clq结合位点 | 第11页 |
| 1.4 CRP生理功能 | 第11-14页 |
| 1.4.1 CRP与心血管疾病关系 | 第11-12页 |
| 1.4.2 CRP与炎症关系 | 第12-14页 |
| 1.5 蛋白质结构形成及稳定 | 第14-15页 |
| 1.6 大肠杆菌中表达外源蛋白 | 第15-16页 |
| 第二章 材料和实验方法 | 第16-26页 |
| 2.1 主要仪器 | 第16页 |
| 2.2 试剂 | 第16页 |
| 2.3 重组mCRP纯化方法 | 第16-17页 |
| 2.4 蛋白表达及检测 | 第17页 |
| 2.5 膜蛋白提取 | 第17-18页 |
| 2.6 周质蛋白提取 | 第18页 |
| 2.7 蛋白染色 | 第18-19页 |
| 2.8 蛋白免疫印记(Western Blotting,WB ) | 第19-20页 |
| 2.9 酶联免疫吸附(ELISA)实验 | 第20-21页 |
| 2.10 菌中总RNA提取 | 第21-22页 |
| 2.11 RT-PCR及产物检测 | 第22-23页 |
| 2.12 质粒提取 | 第23-24页 |
| 2.13 部分试剂的配置 | 第24-26页 |
| 第三章 实验结果及分析 | 第26-57页 |
| 3.1 Strep-CRP菌中表达情况 | 第26-37页 |
| 3.1.1 Strep-CRP△1-99的RT-PCR分析 | 第29-30页 |
| 3.1.2 CRP的N端序列对其表达影响的细化工作 | 第30-32页 |
| 3.1.3 可溶性组分分析 | 第32-33页 |
| 3.1.4 菌内二硫键形成情况 | 第33-34页 |
| 3.1.5 包涵体变性复性后二硫键形成情况 | 第34-37页 |
| 3.2 CRP可溶性表达摸索 | 第37-46页 |
| 3.2.1 CRP与促可溶蛋白TRX及分子伴侣PDI共表达 | 第37-38页 |
| 3.2.2 表达蛋白是否与膜组分结合摸索 | 第38-39页 |
| 3.2.3 CRP融合信号肽及与kil基因共表达 | 第39-42页 |
| 3.2.4 分泌蛋白ELISA检测分析 | 第42-43页 |
| 3.2.5 Trypsin酶解实验 | 第43-44页 |
| 3.2.6 钙离子对CRP合成分泌的影响 | 第44-46页 |
| 3.3 sALP-CRPs突变体表达情况 | 第46-57页 |
| 3.3.1 菌内sALP-CRPs表达量检测 | 第47-48页 |
| 3.3.2 sALP-CRPs分泌蛋白检测 | 第48页 |
| 3.3.3 sALP-CRPs分泌蛋白ELISA检测 | 第48-51页 |
| 3.3.4 sALP-CRPs周质蛋白二硫键形成比例分析 | 第51-54页 |
| 3.3.5 sALP-CRPs分泌蛋白二硫键形成比例分析 | 第54-57页 |
| 第四章 讨论 | 第57-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 在学期间的研究成果 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
