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基于琼脂磁珠分离的核酸信标配基-PCR检测技术的研究

中文摘要第3-4页
ABSTRACT第4-5页
第一章 综述第10-23页
    1.1 SELEX技术第10-16页
        1.1.1 SELEX技术简介第10页
        1.1.2 SELEX技术的发展第10-13页
        1.1.3 核酸适配体的应用第13-15页
        1.1.4 核酸信标配基第15-16页
    1.2 磁性微球第16-21页
        1.2.1 磁性微球简介第16页
        1.2.2 磁性微球在生物学方面的应用第16-19页
        1.2.3 磁性微球的制备与表面官能基团的修饰第19-21页
        1.2.4 琼脂磁性微球第21页
    1.3 目的与意义第21-23页
第二章 琼脂磁珠的制备及活性鉴定第23-33页
    2.1 材料与仪器第23-24页
        2.1.1 主要试剂第23-24页
        2.1.2 溶液配制第24页
        2.1.3 主要仪器第24页
    2.2 实验方法第24-27页
        2.2.1 以油酸作为分散剂制备Fe_3O_4磁流体第25页
        2.2.2 反相聚合包埋法制备琼脂糖磁性微球(AMM)第25页
        2.2.3 环氧基化磁性微球(EMM)的制备及基团检测第25-26页
        2.2.4 羧基化磁性微球(CMM)的制备及基团检测第26页
        2.2.5 滴定分析法定量检测环氧基第26页
        2.2.6 滴定分析法定量检测羧基第26-27页
        2.2.7 磁性微球结合乙肝表面抗原ELISA检测第27页
        2.2.8 磁性微球结合抗体IgG后ELISA检测第27页
    2.3 结果分析第27-32页
        2.3.1 磁性微球的显微镜观察第27-29页
        2.3.2 磁性微球的环氧基化修饰第29页
        2.3.3 磁性微球的羧基化修饰第29-30页
        2.3.4 磁性微球环氧基含量的测定第30页
        2.3.5 磁性微球羧基含量的测定第30页
        2.3.6 磁性微球包被乙肝表面抗原ELISA检测第30-31页
        2.3.7 磁性微球包被乙肝表面抗体ELISA检测第31-32页
    2.4 讨论第32-33页
第三章 琼脂磁珠电泳分离核酸信标配基条件的优化第33-50页
    3.1 材料与仪器第33-35页
        3.1.1 主要试剂第33-34页
        3.1.2 溶液配制第34页
        3.1.3 主要仪器第34-35页
    3.2 实验方法第35-38页
        3.2.1 磁分离与电泳分离的选择第35-36页
        3.2.2 复合体磁性微球热稳定性测试第36页
        3.2.3 电泳离子强度优化第36-37页
        3.2.4 电泳温度优化第37页
        3.2.5 电泳电压电流的优化第37-38页
        3.2.6 电泳时间的优化第38页
    3.3 结果分析第38-48页
        3.3.1 磁分离与电泳分离的选择第39-40页
        3.3.2 复合体磁性微球热稳定性测试第40-42页
        3.3.3 电泳离子强度的优化第42-44页
        3.3.4 电泳温度优化第44-45页
        3.3.5 电泳电压电流的优化第45-47页
        3.3.6 电泳时间的优化第47-48页
    3.4 讨论第48-50页
第四章 琼脂磁珠电泳分离核酸信标配基-PCR蛋白检测第50-61页
    4.1 材料与方法第50-52页
        4.1.1 主要试剂第50-51页
        4.1.2 溶液配制第51页
        4.1.3 主要仪器第51-52页
    4.2 实验方法第52-55页
        4.2.1 羧基琼脂磁性微球包被靶蛋白第52页
        4.2.2 琼脂磁珠电泳分离核酸信标配基-PCR蛋白检测的特异性检测第52-53页
        4.2.3 琼脂磁珠电泳分离核酸信标配基-PCR蛋白检测的灵敏度检测第53页
            4.2.3.1 靶蛋白ELISA检测第53页
            4.2.3.2 琼脂磁珠电泳分离核酸信标配基-PCR蛋白检测第53页
        4.2.4 琼脂磁珠电泳分离核酸信标配基-PCR蛋白检测的重复性检测第53-55页
    4.3 结果分析第55-60页
        4.3.1 检测方法对靶蛋白特异性识别的验证第55-56页
        4.3.2 通过不同浓度梯度的靶蛋白的检测验证灵敏度第56-59页
            4.2.3.1 靶蛋白ELISA检测结果第56-57页
            4.2.3.2 琼脂磁珠电泳分离核酸信标配基-PCR蛋白检测第57-59页
        4.3.3 蛋白检测结果的重复性验证第59-60页
    4.4 讨论第60-61页
结语与展望第61-62页
参考文献第62-66页
在学期间的研究成果第66-67页
致谢第67-68页
附录A第68页

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