| CONTENTS | 第5-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 1 引言 | 第11-17页 |
| 1.1 大豆疫霉根腐病的研究进展 | 第11-13页 |
| 1.1.1 大豆疫霉根腐病的发现与发展 | 第11页 |
| 1.1.2 大豆疫霉菌的生物学特征 | 第11页 |
| 1.1.3 大豆疫霉菌生活史及致病性研究 | 第11-12页 |
| 1.1.4 大豆疫霉根腐病抗性基因的研究 | 第12-13页 |
| 1.2 HARPIN蛋白研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2.1 Harpin蛋白结构特点及功能 | 第13页 |
| 1.2.2 Harpin蛋白在植物抗病过程中作用的研究 | 第13-14页 |
| 1.2.3 Harpin参与植物抗病的机制 | 第14页 |
| 1.3 植物HIN1研究进展 | 第14-15页 |
| 1.4 研究的目的及意义 | 第15-16页 |
| 1.5 技术路线 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-26页 |
| 2.1 实验材料及试剂 | 第17页 |
| 2.1.1 品种及菌种 | 第17页 |
| 2.1.2 菌种及载体 | 第17页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-26页 |
| 2.2.1 材料的培养与处理 | 第17-18页 |
| 2.2.2 大豆总RNA的提取及cDNA的合成 | 第18页 |
| 2.2.3 Hin1基因的克隆 | 第18-20页 |
| 2.2.4 Hin1基因表达模式分析 | 第20-22页 |
| 2.2.5 Hin1基因的亚细胞定位观察 | 第22-24页 |
| 2.2.6 植物表达载体pCAMBIA3301-Hin1的构建 | 第24页 |
| 2.2.7 烟草遗传转化及功能分析 | 第24-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-42页 |
| 3.1 大豆总RNA的提取 | 第26页 |
| 3.2 HIN1基因序列生物信息学分析 | 第26-29页 |
| 3.2.1 Hin1基因编码蛋白质性质和功能分析 | 第27-28页 |
| 3.2.2 Hin1基因与其它物种的同源性分析 | 第28-29页 |
| 3.2.3 HIN1基因系统进化分析 | 第29页 |
| 3.3 HIN1基因全长序列的获得 | 第29-30页 |
| 3.4 HIN1基因表达模式分析 | 第30-34页 |
| 3.4.1 Hin1基因在大豆各组织器官中的差异表达 | 第30-31页 |
| 3.4.2 Hin1基因在不同非生物胁迫条件下表达分析 | 第31-32页 |
| 3.4.3 Hin1基因在不同激素处理条件下表达分析 | 第32-33页 |
| 3.4.4 Hin1基因在疫霉菌处理条件下表达分析 | 第33-34页 |
| 3.5 HIN1基因的亚细胞定位研究 | 第34-37页 |
| 3.5.1 目的基因的PCR扩增 | 第34页 |
| 3.5.2 重组表达载体pCAMBIA1302-Hin1的构建 | 第34-36页 |
| 3.5.3 荧光显微镜观察洋葱表皮 | 第36-37页 |
| 3.6 植物过量表达载体PCAMBIA3301-HIN1的构建 | 第37-40页 |
| 3.6.1 pCAMBIA3301-Hin1重组载体的构建 | 第38-39页 |
| 3.6.2 重组载体转化农杆菌 | 第39-40页 |
| 3.7 烟草的遗传转化及功能分析 | 第40-42页 |
| 3.7.1 烟草的遗传转化 | 第40页 |
| 3.7.2 PCR检测转基因烟草 | 第40-41页 |
| 3.7.3 转基因烟草的抗性鉴定 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-45页 |
| 4.1 HIN1基因克隆与生物信息学分析 | 第42页 |
| 4.2 HIN1基因亚细胞定位 | 第42页 |
| 4.3 HIN1基因与植物抗病性的关系 | 第42-43页 |
| 4.4 胁迫下HIN1基因在大豆中表达量变化分析 | 第43页 |
| 4.5 关于后续工作 | 第43-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-55页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第55页 |
