| 摘要 | 第4-10页 |
| Abstract | 第10-17页 |
| 英文缩略语 | 第18-23页 |
| 第一部分 RKIP蛋白在GIST中表达及其对临床和预后的意义 | 第23-47页 |
| 1 前言 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-31页 |
| 2.1 研究对象 | 第25-27页 |
| 2.2 主要试剂和仪器 | 第27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-31页 |
| 2.3.1 免疫组化染色 | 第27-28页 |
| 2.3.2 结果判定 | 第28页 |
| 2.3.3 随访 | 第28-29页 |
| 2.3.4 统计学分析 | 第29页 |
| 2.3.5 附录 | 第29-31页 |
| 3 结果 | 第31-41页 |
| 3.1 免疫组化结果与临床资料关系 | 第31页 |
| 3.2 随访结果 | 第31-33页 |
| 3.3 RKIP表达与GIST预后关系 | 第33页 |
| 3.4 GIST预后的多因素分析 | 第33-36页 |
| 3.5 RKIP蛋白与GIST危险度分级 | 第36-41页 |
| 4 讨论 | 第41-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 第二部分 RKIP表达对GISTs细胞生物学特性的影响 | 第47-77页 |
| 1 前言 | 第47-49页 |
| 2 材料与方法 | 第49-62页 |
| 2.1 主要仪器和试剂 | 第49-52页 |
| 2.2 研究对象和分组 | 第52页 |
| 2.3 实验方法 | 第52-62页 |
| 2.3.1 GIST-T1的培养 | 第52-53页 |
| 2.3.2 GIST-T1的复苏和冻存 | 第53页 |
| 2.3.3 GIST-T1细胞计数和生长曲线绘制 | 第53页 |
| 2.3.4 应用RKIP Activation Plasmid/Control CRISPR Plasmid 转染GIST-T1细胞 | 第53-54页 |
| 2.3.5 嘌呤霉素筛选稳定转染RKIP Activation/CRISPR CONTROL质粒GIST-T1细胞系 | 第54页 |
| 2.3.6 实时荧光定量PCR检测mRNA表达 | 第54-56页 |
| 2.3.7 WesternBlotting检测蛋白表达 | 第56-58页 |
| 2.3.8 CCK-8发检测GIST-T1细胞增殖 | 第58-59页 |
| 2.3.9 GIST-T1细胞平板集落形成实验 | 第59页 |
| 2.3.10 Transwell小室实验检测各组GIST-T1细胞的侵袭和迁移能力 | 第59-60页 |
| 2.3.11 流式细胞仪检测细胞周期并分析细胞增殖 | 第60页 |
| 2.3.12 流式细胞仪检测各组GIST-T1细胞凋亡 | 第60-61页 |
| 2.3.13 统计学处理方法 | 第61-62页 |
| 3 结果 | 第62-72页 |
| 3.1 qRT-PCR分析RKIPmRNA表达 | 第62-65页 |
| 3.2 WesternBlotting分析RKIP蛋白表达 | 第65-66页 |
| 3.3 CCK-8发检测GIST-T1细胞增殖 | 第66-67页 |
| 3.4 GIST-T1细胞平板集落形成实验 | 第67-68页 |
| 3.5 Transwell小室实验检测各组GIST-T1细胞的侵袭和迁移能力 | 第68-69页 |
| 3.6 流式细胞仪检测细胞周期并分析细胞增殖和凋亡 | 第69-72页 |
| 4 讨论 | 第72-76页 |
| 4.1 RKIP蛋白对GIST-T1细胞增殖的影响分析 | 第72-73页 |
| 4.2 RKIP蛋白对GIST-T1细胞侵袭和转移能力的影响 | 第73-74页 |
| 4.3 流式细胞仪检测GIST-T1细胞周期并分析细胞增殖和凋亡 | 第74-76页 |
| 5 结论 | 第76-77页 |
| 第三部分 RKIP蛋白通过ERK\MAPK通路影响GISTs肿瘤转移增殖的机制研究 | 第77-114页 |
| 1 前言 | 第77-79页 |
| 2 材料与方法 | 第79-89页 |
| 2.1 研究方法概述 | 第79页 |
| 2.2 研究对象 | 第79-81页 |
| 2.3 主要试剂和仪器 | 第81-84页 |
| 2.4 实验方法 | 第84-89页 |
| 3 结果 | 第89-106页 |
| 3.1 WesternBlotting检测相关蛋白结果 | 第89-93页 |
| 3.2 免疫组化部分结果分析 | 第93-106页 |
| 3.2.1 P-ERK在GIST中的表达 | 第93-94页 |
| 3.2.2 P-ERK的表达与预后关系 | 第94-95页 |
| 3.2.3 P-MEK在GIST中的表达 | 第95-96页 |
| 3.2.4 P-MEK的表达与预后关系 | 第96-98页 |
| 3.2.5 MMP-2在GIST中的表达 | 第98页 |
| 3.2.6 MMP-2的表达与预后关系 | 第98-101页 |
| 3.2.7 Cyclin-D1在GIST中的表达 | 第101页 |
| 3.2.8 Cyclin-D1的表达与预后关系 | 第101-103页 |
| 3.2.9 RKIP蛋白共表达 | 第103-105页 |
| 3.2.10 RKIP、P-ERK、P-MEK、Cyclin-D1、MMP-2与OS的COX多因素预后分析 | 第105-106页 |
| 4 讨论 | 第106-113页 |
| 4.1 RKIP蛋白和MAPK通路 | 第106-107页 |
| 4.2 WB分析RKIP蛋白通过ERK\MAPK通路影响GIST增殖和转移的功能及效应位点 | 第107-108页 |
| 4.3 免疫组化验证ERK\MAPK相关蛋白在GIST组织中表达和意义 | 第108-111页 |
| 4.4 分析归纳RKIP蛋白通过ERK\MAPK通路影响GIST增殖、转移侵袭的机制 | 第111-113页 |
| 5 结论 | 第113-114页 |
| 全文小结 | 第114-115页 |
| 论文创新性和自我评述 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-124页 |
| 综述 RKIP蛋白在胃肠间质瘤(GIST)中作用和功能的研究进展 | 第124-143页 |
| 参考文献 | 第136-143页 |
| 个人成果 | 第143-144页 |
| 致谢 | 第144-145页 |
| 个人简介 | 第145页 |
