摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第11-26页 |
1.1 ESCRT复合体及其功能 | 第11-18页 |
1.1.1 ESCRT-0 | 第12页 |
1.1.2 ESCRT-I | 第12页 |
1.1.3 ESCRT-II | 第12-13页 |
1.1.4 ESCRT-III | 第13-16页 |
1.1.5 Vps4复合体 | 第16-17页 |
1.1.6 ESCRT系统辅助蛋白(Alix) | 第17-18页 |
1.2 ESCRT复合体与病毒侵染关系 | 第18-21页 |
1.2.1 ESCRT复合体在病毒入侵中的作用 | 第18-19页 |
1.2.2 ESCRT复合体在病毒出芽释放中的作用 | 第19-21页 |
1.3 杆状病毒侵染机理 | 第21-25页 |
1.3.1 杆状病毒概述 | 第21-22页 |
1.3.2 杆状病毒侵染周期(ODV,BV) | 第22-24页 |
1.3.3 ESCRT复合体调控杆状病毒入侵与出芽释放研究进展 | 第24-25页 |
1.4 研究目的与意义 | 第25-26页 |
第二章 材料与方法 | 第26-35页 |
2.1 材料 | 第26-28页 |
2.1.1 昆虫细胞,菌株与质粒 | 第26页 |
2.1.2 常用试剂盒及相关试剂 | 第26页 |
2.1.3 大肠杆菌培养基及其他相关溶液 | 第26-28页 |
2.2 方法 | 第28-35页 |
2.2.1 制备感受态细胞 | 第28页 |
2.2.2 克隆草地滩夜蛾ESCRT-III亚基基因 | 第28-31页 |
2.2.3 瞬时表达质粒构建 | 第31页 |
2.2.4 重组bacmid构建 | 第31页 |
2.2.5 实时定量PCR | 第31-32页 |
2.2.6 瞬时表达质粒提取、转染及激光共聚焦显微镜观察 | 第32页 |
2.2.7 病毒缺失补偿实验 | 第32-33页 |
2.2.8 AcMNPV出芽释放分析 | 第33页 |
2.2.9 AcMNPV启动子指导基因表达及基因组DNA复制分析 | 第33页 |
2.2.10 双分子荧光互补检测 | 第33-34页 |
2.2.11 WesternBlot分析蛋白表达 | 第34-35页 |
第三章 结果与分析 | 第35-50页 |
3.1 草地贪夜蛾IST1、Vps2A、CHMP7基因克隆 | 第35-41页 |
3.2 IST1、Vps2A、CHMP7基因在AcMNPV感染Sf9细胞中的转录水平分析 | 第41-42页 |
3.3 IST1、Vps2A、CHMP7的表达 | 第42-43页 |
3.4 过表达GFP标签的IST1、Vps2A、CHMP7显著降低感染性BV的产量 | 第43-44页 |
3.5 过表达GFP标签的IST1、Vps2AC或CHMP7对病毒早期侵染阶段的影响 | 第44-46页 |
3.6 过表达IST1-GFP、Vps2A-GFP、CHMP7-GFP对AcMNPV出芽释放的影响 | 第46-47页 |
3.7 IST1、Vps2A、CHMP7与AcMNPV侵染关键蛋白的互作 | 第47-50页 |
第四章 结论与讨论 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
作者简介 | 第56页 |