| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 摘要 | 第7-13页 |
| 1 Introduction | 第13-16页 |
| 2 Literature review | 第16-36页 |
| 2.1 Yak,cattle, cattleyak and significance of the hybridization | 第16-19页 |
| 2.1.1 Yak | 第16-17页 |
| 2.1.2 Cattle | 第17-18页 |
| 2.1.3 Cattleyak | 第18-19页 |
| 2.2 Approaches for spermatogenic cells isolation | 第19-21页 |
| 2.2.1 Cell isolation by using Surface antigen/ immunophenotype | 第20页 |
| 2.2.2 Cell isolation by using biological properties | 第20页 |
| 2.2.3 Cell isolation by using physical properties | 第20-21页 |
| 2.3 Brief introduction of microRNAs (miRNAs) | 第21-23页 |
| 2.3.1 Biogenesis and mechanism of action of miRNAs | 第22-23页 |
| 2.4 Spermatogenesis and microRNAs involvement | 第23-32页 |
| 2.4.1 MicroRNAs and primordial germ cells | 第25-26页 |
| 2.4.2 MicroRNAs and spermatogonial stem cells | 第26-28页 |
| 2.4.3 MicroRNAs and differentiation of spermatogonia | 第28-29页 |
| 2.4.4 MicroRNAs and meiosis of spermatocytes | 第29-31页 |
| 2.4.5 MicroRNAs and spermiogenesis | 第31-32页 |
| 2.5 Research background on cattleyak infertility | 第32-34页 |
| 2.5.1 Research objectives | 第34页 |
| 2.6 Experimental layout | 第34-36页 |
| 3 Materials and methods | 第36-61页 |
| 3.1 Ethical statement for samples collection | 第36页 |
| 3.2 TUNEL-POD analysis | 第36-39页 |
| 3.2.1 Samples | 第36-37页 |
| 3.2.2 Experimental regents and equipments | 第37-39页 |
| 3.2.3 Protocol | 第39页 |
| 3.3 Isolation and characterization of spermatogenic cells | 第39-51页 |
| 3.3.1 Samples | 第39页 |
| 3.3.2 Required equipments and chemicals | 第39-42页 |
| 3.3.3 Required solutions | 第42页 |
| 3.3.4 Required primers for (PCR) Polymerize Chain Reaction | 第42-43页 |
| 3.3.5 Methodology for cell isolation | 第43-49页 |
| 3.3.6 Methodology for identification of isolated cells | 第49-51页 |
| 3.4 Cellular microRNAs expression profiling | 第51-55页 |
| 3.4.1 Samples | 第51页 |
| 3.4.2 Experimental reagents and instruments | 第51-52页 |
| 3.4.3 MiRNA microarrays protocol | 第52-55页 |
| 3.5 Bioinformatics analysis | 第55-58页 |
| 3.5.1 In silico target genes prediction for DE miRNAs | 第56-57页 |
| 3.5.2 GO and KEGG enrichment of the targeted genes | 第57-58页 |
| 3.6 RT-Q PCR validation | 第58-60页 |
| 3.6.1 Samples and required equipments | 第58页 |
| 3.6.2 Required primers | 第58-59页 |
| 3.6.3 Protocol of RT-Q PCR | 第59-60页 |
| 3.7 Statistical analysis | 第60-61页 |
| 4 Results and discussion | 第61-99页 |
| 4.1 Results | 第61-88页 |
| 4.1.1 Cell apoptosis in cattleyak compared with yak | 第61-64页 |
| 4.1.2 Morphological characterization of spermatogenic cells | 第64-67页 |
| 4.1.3 Phenotypic characterization of spermatogenic cells | 第67-70页 |
| 4.1.4 MicroRNAs expression profile in spermatogenic cells | 第70-77页 |
| 4.1.5 Targeted genes for differentially expresses miRNAs | 第77-81页 |
| 4.1.6 GO and KEGG enrichment of the targeted genes | 第81-87页 |
| 4.1.7 RT q-PCR validation results | 第87-88页 |
| 4.2 Discussion | 第88-99页 |
| 4.2.1 Isolation and characterization of spermatogenic cells | 第88-93页 |
| 4.2.2 Cellular microRNA expression profiles and cell apoptosisanalysis | 第93-99页 |
| 5 Conclusion | 第99-101页 |
| 5.1 Suggestions | 第100-101页 |
| 6 Acknowledgement | 第101-103页 |
| Special thank | 第102-103页 |
| 7 References | 第103-119页 |
| Dedicated to my parents | 第119-120页 |
| 8 Appendix | 第120-139页 |
| 8.1 Table. S1 Top 3/239 listed GO term BP, MF, CC of targetedgenes for DE miRNAs of CY vs CL | 第120-127页 |
| 8.2 Table. S2 Top 3/243 listed GO term BP, MF, CC of targetedgenes for DE miRNAs of CY vs YK | 第127-135页 |
| 8.3 Table. S3 KEGG top 5/35 listed pathways of targeted genes forDE miRNAs of CY vs CL | 第135-137页 |
| 8.4 Table. S4 KEGG top 5/46 listed pathways of targeted genes forDE miRNAs of CY vs YK | 第137-139页 |
| 9 Publications | 第139页 |
