| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第11-19页 |
| 1.1 研究的目的和意义 | 第11页 |
| 1.2 文献综述 | 第11-17页 |
| 1.2.1 植物WRKY转录因子研究进展 | 第11-15页 |
| 1.2.2 RNAi干扰研究进展 | 第15-17页 |
| 1.3 本研究的课题来源及研究内 | 第17-19页 |
| 1.3.1 本研究的课题来源 | 第17页 |
| 1.3.2 本研究的研究内容及技术路线 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-31页 |
| 2.1 GmWRKY20基因RNAi片段设计 | 第19页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第19页 |
| 2.1.2 试验方法 | 第19页 |
| 2.2 GmWRKY20基因沉默植物表达载体构建 | 第19-23页 |
| 2.2.1 试验材料 | 第19-20页 |
| 2.2.2 试验方法 | 第20-23页 |
| 2.3 GmWRKY20i对大豆遗传转化及抗性植株获得 | 第23-26页 |
| 2.3.1 试验材料 | 第23-24页 |
| 2.3.2 试验方法 | 第24-26页 |
| 2.4 抗性植株的PCR检测 | 第26-27页 |
| 2.4.1 试验材料 | 第26页 |
| 2.4.2 试验方法 | 第26-27页 |
| 2.5 抗性植株RNAi效果的分子生物学验证 | 第27-31页 |
| 2.5.1 试验材料 | 第27-28页 |
| 2.5.2 试验方法 | 第28-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-48页 |
| 3.1 GmWRKY20基因RNAi片段设计 | 第31-34页 |
| 3.2 GmWRKY20基因沉默植物表达载体构建 | 第34-39页 |
| 3.2.1 RNAi片段的克隆 | 第34-35页 |
| 3.2.2 RNAi载体构建 | 第35-39页 |
| 3.3 GmWRKY20i对大豆遗传转化 | 第39-43页 |
| 3.3.1 pBWR植物表达载体对农杆菌的转化 | 第39-41页 |
| 3.3.2 植物表达载体pBWR对大豆转化及抗性植株获得 | 第41-43页 |
| 3.4 抗性植株的PCR检测 | 第43-45页 |
| 3.4.1 转pBWR载体T_0代植株的PCR检测 | 第43-44页 |
| 3.4.2 转pBWR载体T_2代植株的PCR检测 | 第44-45页 |
| 3.5 抗性植株RNAi效果的分子生物学验证 | 第45-48页 |
| 3.5.1 转pBWR载体T_2代植株的RT-PCR检测 | 第45-46页 |
| 3.5.2 PCR阳性植株real-time PCR检测 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-53页 |
| 4.1 基因敲除技术方法的选择 | 第48-50页 |
| 4.2 RNAi技术介导基因沉默需要注意的问题 | 第50-51页 |
| 4.3 GmWRKY20基因介导ABA信号调控抗旱、早花的生理与分子机理 | 第51-52页 |
| 4.4 下一步工作展望 | 第52-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 5.1 设计出了GmWPKY20基因沉默的RNAi片段并将其转化到大豆东农50中 | 第53页 |
| 5.2 获得了四个GmWRKY20基因沉默株系 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第62页 |
