摘要 | 第6-9页 |
abstract | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第16-34页 |
1.1 SVC简介 | 第17-20页 |
1.1.1 病症和病理变化 | 第17-18页 |
1.1.2 流行情况 | 第18-19页 |
1.1.3 SVC的诊断与防治 | 第19-20页 |
1.2 SVCV研究进展 | 第20-23页 |
1.2.1 生物学特征 | 第20-21页 |
1.2.2 结构蛋白特征 | 第21-23页 |
1.2.3 分类地位 | 第23页 |
1.2.4 SVCV毒株的遗传多样性 | 第23页 |
1.3 抗病毒药物研究进展 | 第23-27页 |
1.3.1 抗病毒药物的类型 | 第23-26页 |
1.3.2 抗病毒药物作用机制研究 | 第26-27页 |
1.4 香豆素类化合物简介 | 第27-33页 |
1.4.1 香豆素类化合物的分类 | 第28-29页 |
1.4.2 香豆素类化合物的生物活性 | 第29-33页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第33-34页 |
第二章 香豆素类化合物离体抗SVCV活性研究 | 第34-55页 |
2.1 材料与方法 | 第34-44页 |
2.1.1 细胞和病毒 | 第34-35页 |
2.1.2 香豆素类化合物 | 第35-39页 |
2.1.3 试剂和仪器 | 第39页 |
2.1.4 细胞培养、病毒增殖及滴度检测 | 第39页 |
2.1.5 香豆素毒性检测 | 第39-40页 |
2.1.6 香豆素抗SVCV活性初筛检测 | 第40-42页 |
2.1.7 抗SVCV香豆素活性复筛检测 | 第42页 |
2.1.8 香豆素C4、D5在EPC细胞内的药物代谢检测 | 第42-43页 |
2.1.9 香豆素C4、D5前、后处理细胞抗SVCV活性检测 | 第43-44页 |
2.2 结果与分析 | 第44-51页 |
2.2.1 香豆素抗SVCV活性初筛检测结果 | 第44页 |
2.2.2 抗SVCV香豆素复筛检测结果 | 第44-46页 |
2.2.3 香豆素(B4/C2/C4/D5)对SVCVN、P以及M蛋白表达的作用结果 | 第46-47页 |
2.2.4 EPC细胞形态学观察结果 | 第47-49页 |
2.2.5 香豆素对病毒滴度的作用结果 | 第49-50页 |
2.2.6 香豆素C4、D5细胞内代谢检测结果 | 第50-51页 |
2.2.7 香豆素C4、D5前、后处理细胞的抗SVCV活性检测结果 | 第51页 |
2.3 讨论 | 第51-54页 |
2.3.1 药物构效关系分析 | 第51-53页 |
2.3.2 香豆素类化合物的抗病毒作用 | 第53-54页 |
2.4 小结 | 第54-55页 |
第三章 香豆素C4、D5抗SVCV诱导的细胞凋亡活性研究 | 第55-70页 |
3.1 材料与方法 | 第55-59页 |
3.1.1 细胞和病毒 | 第55-56页 |
3.1.2 药物 | 第56页 |
3.1.3 试剂和仪器 | 第56页 |
3.1.4 香豆素C4、D5对SVCV诱导的细胞凋亡形态学作用 | 第56-57页 |
3.1.5 细胞超微结构观察 | 第57-58页 |
3.1.6 AnnexinV-FITC/PI凋亡双染检测 | 第58-59页 |
3.1.7 Caspase酶活性分析 | 第59页 |
3.2 结果与分析 | 第59-68页 |
3.2.1 细胞核损伤观察结果 | 第59-61页 |
3.2.2 细胞骨架损伤观察结果 | 第61-63页 |
3.2.3 细胞表面超微结构观察结果 | 第63-64页 |
3.2.4 细胞内部超微结构观察结果 | 第64-65页 |
3.2.5 AnnexinV-FITC/PI凋亡双染检测结果 | 第65-67页 |
3.2.6 Caspase酶活性检测结果 | 第67-68页 |
3.3 讨论 | 第68-69页 |
3.3.1 病毒感染引起的细胞凋亡 | 第68页 |
3.3.2 病毒对细胞骨架的影响 | 第68页 |
3.3.3 Caspase家族的作用 | 第68-69页 |
3.4 小结 | 第69-70页 |
第四章 香豆素C4通过PKC-Nrf2/ARE通路抗SVCV研究 | 第70-92页 |
4.1 材料与方法 | 第71-76页 |
4.1.1 细胞和病毒 | 第71页 |
4.1.2 药物 | 第71页 |
4.1.3 试剂、抗体和仪器 | 第71页 |
4.1.4 香豆素C4对SVCV感染过程的作用 | 第71-72页 |
4.1.5 香豆素C4对细胞抗病毒反应的作用 | 第72-76页 |
4.2 结果与分析 | 第76-89页 |
4.2.1 香豆素C4对SVCV感染过程的作用结果 | 第76-79页 |
4.2.2 抗氧化酶活性及ROS检测结果 | 第79页 |
4.2.3 Nrf2表达及核转运检测结果 | 第79-83页 |
4.2.4 PKC激活剂和抑制剂抗SVCV检测结果 | 第83-84页 |
4.2.5 PKC激活剂和抑制剂对Nrf2蛋白和下游靶基因HO-1表达的作用结果 | 第84-86页 |
4.2.6 香豆素C4对PKCα/β亚基磷酸化的作用结果 | 第86-87页 |
4.2.7 香豆素C4对HO-1表达的作用结果 | 第87页 |
4.2.8 siHO-1对干扰素表达的作用结果 | 第87-88页 |
4.2.9 香豆素C4对干扰素基因表达的作用结果 | 第88-89页 |
4.3 讨论 | 第89-91页 |
4.3.1 Nrf2-ARE信号通路与病毒的关系 | 第89-90页 |
4.3.2 PKC对Nrf2-ARE信号通路的调控作用 | 第90页 |
4.3.3 HO-1的抗病毒作用 | 第90-91页 |
4.4 小结 | 第91-92页 |
第五章 香豆素D5对SVCVG蛋白功能的作用研究 | 第92-110页 |
5.1 材料与方法 | 第93-95页 |
5.1.1 细胞和病毒 | 第93页 |
5.1.2 药物 | 第93页 |
5.1.3 试剂、抗体和仪器 | 第93页 |
5.1.4 香豆素D5对SVCV感染过程的作用 | 第93-94页 |
5.1.5 香豆素D5对细胞抗病毒反应的作用 | 第94-95页 |
5.2 结果与分析 | 第95-106页 |
5.2.1 香豆素D5对病毒感染过程的作用结果 | 第95-97页 |
5.2.2 超速离心检测结果 | 第97-99页 |
5.2.3 香豆素D5对G蛋白重组质粒细胞内表达的作用结果 | 第99-100页 |
5.2.4 Erk抑制剂抗SVCV检测结果 | 第100-102页 |
5.2.5 香豆素D5和Erk抑制剂对细胞自噬的作用结果 | 第102-105页 |
5.2.6 香豆素D5和Erk抑制剂对Erk1/2、Akt和mTor磷酸化的作用结果 | 第105-106页 |
5.3 讨论 | 第106-108页 |
5.3.1 抗病毒药物的作用靶点 | 第106-107页 |
5.3.2 细胞自噬与病毒的关系 | 第107页 |
5.3.3 PI3K-Akt-mTor信号通路对细胞自噬的调控作用 | 第107-108页 |
5.4 小结 | 第108-110页 |
第六章 香豆素C4、D5在体抗SVCV活性研究 | 第110-117页 |
6.1 材料与方法 | 第110-111页 |
6.1.1 病毒和实验鱼 | 第110页 |
6.1.2 药物 | 第110页 |
6.1.3 病毒攻毒浓度检测 | 第110页 |
6.1.4 香豆素C4、D5在体抗病毒活性检测 | 第110-111页 |
6.2 结果与分析 | 第111-115页 |
6.2.1 SVCV攻毒模型构建结果 | 第111-112页 |
6.2.2 香豆素C4、D5在体抗病毒活性检测结果 | 第112-113页 |
6.2.3 香豆素C4、D5诱导干扰素基因表达检测结果 | 第113-114页 |
6.2.4 香豆素C4、D5在体抗氧化检测结果 | 第114-115页 |
6.3 讨论 | 第115-116页 |
6.4 小结 | 第116-117页 |
结论 | 第117-118页 |
参考文献 | 第118-135页 |
附录 | 第135-141页 |
致谢 | 第141-143页 |
作者简介 | 第143页 |