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香豆素类化合物抗鲤春病毒血症病毒活性及作用机制研究

摘要第6-9页
abstract第9-11页
第一章 文献综述第16-34页
    1.1 SVC简介第17-20页
        1.1.1 病症和病理变化第17-18页
        1.1.2 流行情况第18-19页
        1.1.3 SVC的诊断与防治第19-20页
    1.2 SVCV研究进展第20-23页
        1.2.1 生物学特征第20-21页
        1.2.2 结构蛋白特征第21-23页
        1.2.3 分类地位第23页
        1.2.4 SVCV毒株的遗传多样性第23页
    1.3 抗病毒药物研究进展第23-27页
        1.3.1 抗病毒药物的类型第23-26页
        1.3.2 抗病毒药物作用机制研究第26-27页
    1.4 香豆素类化合物简介第27-33页
        1.4.1 香豆素类化合物的分类第28-29页
        1.4.2 香豆素类化合物的生物活性第29-33页
    1.5 本研究的目的和意义第33-34页
第二章 香豆素类化合物离体抗SVCV活性研究第34-55页
    2.1 材料与方法第34-44页
        2.1.1 细胞和病毒第34-35页
        2.1.2 香豆素类化合物第35-39页
        2.1.3 试剂和仪器第39页
        2.1.4 细胞培养、病毒增殖及滴度检测第39页
        2.1.5 香豆素毒性检测第39-40页
        2.1.6 香豆素抗SVCV活性初筛检测第40-42页
        2.1.7 抗SVCV香豆素活性复筛检测第42页
        2.1.8 香豆素C4、D5在EPC细胞内的药物代谢检测第42-43页
        2.1.9 香豆素C4、D5前、后处理细胞抗SVCV活性检测第43-44页
    2.2 结果与分析第44-51页
        2.2.1 香豆素抗SVCV活性初筛检测结果第44页
        2.2.2 抗SVCV香豆素复筛检测结果第44-46页
        2.2.3 香豆素(B4/C2/C4/D5)对SVCVN、P以及M蛋白表达的作用结果第46-47页
        2.2.4 EPC细胞形态学观察结果第47-49页
        2.2.5 香豆素对病毒滴度的作用结果第49-50页
        2.2.6 香豆素C4、D5细胞内代谢检测结果第50-51页
        2.2.7 香豆素C4、D5前、后处理细胞的抗SVCV活性检测结果第51页
    2.3 讨论第51-54页
        2.3.1 药物构效关系分析第51-53页
        2.3.2 香豆素类化合物的抗病毒作用第53-54页
    2.4 小结第54-55页
第三章 香豆素C4、D5抗SVCV诱导的细胞凋亡活性研究第55-70页
    3.1 材料与方法第55-59页
        3.1.1 细胞和病毒第55-56页
        3.1.2 药物第56页
        3.1.3 试剂和仪器第56页
        3.1.4 香豆素C4、D5对SVCV诱导的细胞凋亡形态学作用第56-57页
        3.1.5 细胞超微结构观察第57-58页
        3.1.6 AnnexinV-FITC/PI凋亡双染检测第58-59页
        3.1.7 Caspase酶活性分析第59页
    3.2 结果与分析第59-68页
        3.2.1 细胞核损伤观察结果第59-61页
        3.2.2 细胞骨架损伤观察结果第61-63页
        3.2.3 细胞表面超微结构观察结果第63-64页
        3.2.4 细胞内部超微结构观察结果第64-65页
        3.2.5 AnnexinV-FITC/PI凋亡双染检测结果第65-67页
        3.2.6 Caspase酶活性检测结果第67-68页
    3.3 讨论第68-69页
        3.3.1 病毒感染引起的细胞凋亡第68页
        3.3.2 病毒对细胞骨架的影响第68页
        3.3.3 Caspase家族的作用第68-69页
    3.4 小结第69-70页
第四章 香豆素C4通过PKC-Nrf2/ARE通路抗SVCV研究第70-92页
    4.1 材料与方法第71-76页
        4.1.1 细胞和病毒第71页
        4.1.2 药物第71页
        4.1.3 试剂、抗体和仪器第71页
        4.1.4 香豆素C4对SVCV感染过程的作用第71-72页
        4.1.5 香豆素C4对细胞抗病毒反应的作用第72-76页
    4.2 结果与分析第76-89页
        4.2.1 香豆素C4对SVCV感染过程的作用结果第76-79页
        4.2.2 抗氧化酶活性及ROS检测结果第79页
        4.2.3 Nrf2表达及核转运检测结果第79-83页
        4.2.4 PKC激活剂和抑制剂抗SVCV检测结果第83-84页
        4.2.5 PKC激活剂和抑制剂对Nrf2蛋白和下游靶基因HO-1表达的作用结果第84-86页
        4.2.6 香豆素C4对PKCα/β亚基磷酸化的作用结果第86-87页
        4.2.7 香豆素C4对HO-1表达的作用结果第87页
        4.2.8 siHO-1对干扰素表达的作用结果第87-88页
        4.2.9 香豆素C4对干扰素基因表达的作用结果第88-89页
    4.3 讨论第89-91页
        4.3.1 Nrf2-ARE信号通路与病毒的关系第89-90页
        4.3.2 PKC对Nrf2-ARE信号通路的调控作用第90页
        4.3.3 HO-1的抗病毒作用第90-91页
    4.4 小结第91-92页
第五章 香豆素D5对SVCVG蛋白功能的作用研究第92-110页
    5.1 材料与方法第93-95页
        5.1.1 细胞和病毒第93页
        5.1.2 药物第93页
        5.1.3 试剂、抗体和仪器第93页
        5.1.4 香豆素D5对SVCV感染过程的作用第93-94页
        5.1.5 香豆素D5对细胞抗病毒反应的作用第94-95页
    5.2 结果与分析第95-106页
        5.2.1 香豆素D5对病毒感染过程的作用结果第95-97页
        5.2.2 超速离心检测结果第97-99页
        5.2.3 香豆素D5对G蛋白重组质粒细胞内表达的作用结果第99-100页
        5.2.4 Erk抑制剂抗SVCV检测结果第100-102页
        5.2.5 香豆素D5和Erk抑制剂对细胞自噬的作用结果第102-105页
        5.2.6 香豆素D5和Erk抑制剂对Erk1/2、Akt和mTor磷酸化的作用结果第105-106页
    5.3 讨论第106-108页
        5.3.1 抗病毒药物的作用靶点第106-107页
        5.3.2 细胞自噬与病毒的关系第107页
        5.3.3 PI3K-Akt-mTor信号通路对细胞自噬的调控作用第107-108页
    5.4 小结第108-110页
第六章 香豆素C4、D5在体抗SVCV活性研究第110-117页
    6.1 材料与方法第110-111页
        6.1.1 病毒和实验鱼第110页
        6.1.2 药物第110页
        6.1.3 病毒攻毒浓度检测第110页
        6.1.4 香豆素C4、D5在体抗病毒活性检测第110-111页
    6.2 结果与分析第111-115页
        6.2.1 SVCV攻毒模型构建结果第111-112页
        6.2.2 香豆素C4、D5在体抗病毒活性检测结果第112-113页
        6.2.3 香豆素C4、D5诱导干扰素基因表达检测结果第113-114页
        6.2.4 香豆素C4、D5在体抗氧化检测结果第114-115页
    6.3 讨论第115-116页
    6.4 小结第116-117页
结论第117-118页
参考文献第118-135页
附录第135-141页
致谢第141-143页
作者简介第143页

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