中文摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
文献综述 | 第12-21页 |
1 引言 | 第12-19页 |
1.1 土壤盐渍化概述 | 第12-14页 |
1.2 盐生植物 | 第14-15页 |
1.3 盐腺简介 | 第15-16页 |
1.4 囊泡运输相关基因概述 | 第16-18页 |
1.5 CRISPR-Cas9介导的基因编辑技术 | 第18-19页 |
2 本论文的目的和意义 | 第19-21页 |
第一章 二色补血草囊泡运输相关基因的克隆 | 第21-47页 |
1 试验材料 | 第21页 |
1.1 植物材料 | 第21页 |
1.2 材料培养与处理 | 第21页 |
2 试验方法 | 第21-30页 |
2.1 RNA的提取 | 第21-22页 |
2.2 从总RNA合成第一链cDNA | 第22-23页 |
2.3 中间片段的获得 | 第23-24页 |
2.4 3’RACE目的片段的获得 | 第24-27页 |
2.5 5’RACE目的片段的获得 | 第27-29页 |
2.6 基因全长的获得及验证 | 第29-30页 |
3 结果 | 第30-45页 |
3.1 中间片段的获得 | 第30-31页 |
3.2 3'和5'RACE目的片段的获得 | 第31-32页 |
3.3 RACE后全长基因片段的获得 | 第32-39页 |
3.4 进化树分析 | 第39-40页 |
3.5 二色补血草囊泡运输相关蛋白一级结构分析 | 第40-41页 |
3.6 二色补血草囊泡运输相关蛋白的疏水性分析 | 第41-42页 |
3.7 二色补血草囊泡运输相关蛋白二级结构分析 | 第42-43页 |
3.8 二色补血草囊泡运输相关蛋白的三级结构分析 | 第43-44页 |
3.9 二色补血草囊泡运输蛋白的保守性分析 | 第44-45页 |
4 讨论 | 第45-47页 |
第二章 二色补血草囊泡运输基因的功能分析 | 第47-63页 |
1 试验材料 | 第47页 |
2 试验方法 | 第47-54页 |
2.1 过量表达载体的构建 | 第47-49页 |
2.2 基因组序列的获得 | 第49-51页 |
2.3 CRISPR-Cas9载体的构建 | 第51-53页 |
2.4 二色补血草叶片的侵染 | 第53-54页 |
3 结果 | 第54-62页 |
3.1 过量表达载体的构建 | 第54-55页 |
3.2 二色补血草囊泡运输基因过表达株系的获得 | 第55-57页 |
3.3 囊泡运输基因的基因组序列扩增 | 第57页 |
3.4 基因组序列与CDS序列比对 | 第57-59页 |
3.5 CRISPR-Cas9载体的构建 | 第59-60页 |
3.6 二色补血草囊泡运输基因敲除株系的获得 | 第60-62页 |
4 讨论 | 第62-63页 |
第三章 二色补血草囊泡运输基因在拟南芥中功能研究 | 第63-79页 |
1 试验材料 | 第63-64页 |
1.1 植物材料 | 第63页 |
1.2 材料培养与处理 | 第63-64页 |
1.3 软件与数据处理 | 第64页 |
2 试验方法 | 第64-68页 |
2.1 拟南芥囊泡运输基因过量表达植株的获得 | 第64-65页 |
2.2 拟南芥突变体纯合的筛选 | 第65-67页 |
2.3 NaCl处理下拟南芥的野生型、过表达植株、突变体种子的萌发试验 | 第67页 |
2.4 拟南芥幼苗主根长度的测定 | 第67-68页 |
3 结果 | 第68-77页 |
3.1 潮霉素筛选过表达株系 | 第68页 |
3.2 DNA水平上鉴定过表达植株 | 第68-69页 |
3.3 拟南芥突变体纯合体的筛选 | 第69-70页 |
3.4 NaCl处理下拟南芥的野生型、过表达植株、突变体种子的萌发情况 | 第70-77页 |
4 讨论 | 第77-79页 |
参考文献 | 第79-85页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第85-86页 |
致谢 | 第86页 |