| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-19页 |
| 1.1 CDPKs的结构特征与功能 | 第14-15页 |
| 1.2 疟原虫的CDPKs | 第15-16页 |
| 1.3 弓形虫的CDPKs | 第16-17页 |
| 1.4 艾美耳球虫的CDPKs | 第17页 |
| 1.5 展望 | 第17-19页 |
| 第二章 柔嫩艾美耳球虫ZB1-H07、ZB7-C11基因 全长cDNA的克隆与分析 | 第19-45页 |
| 2.1 引言 | 第19页 |
| 2.2 材料与方法 | 第19-33页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第19页 |
| 2.2.2 实验虫株 | 第19页 |
| 2.2.3 实验试剂 | 第19-20页 |
| 2.2.4 主要仪器 | 第20页 |
| 2.2.5 试剂配制 | 第20-22页 |
| 2.2.6 EST来源 | 第22页 |
| 2.2.7 RACE引物设计 | 第22页 |
| 2.2.8 全长cDNA引物设计 | 第22-23页 |
| 2.2.9 柔嫩艾美耳球虫孢子化、未孢子化卵囊、子孢子和第二代裂殖子的制备 | 第23-24页 |
| 2.2.10 柔嫩艾美耳球虫子孢子Total RNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.2.11 ZB1-H07、ZB7-C11基因的3’和5’RACE扩增 | 第25-28页 |
| 2.2.12 PCR产物的回收 | 第28页 |
| 2.2.13 T-easy载体与回收产物连接转化 | 第28-29页 |
| 2.2.14 阳性克隆的鉴定及测序 | 第29页 |
| 2.2.15 拼接全长序列 | 第29页 |
| 2.2.16 扩增全长cDNA序列 | 第29-30页 |
| 2.2.17 全长cDNA的克隆和测序 | 第30页 |
| 2.2.18 ZB1-H07、ZB7-C11基因的生物信息学分析 | 第30页 |
| 2.2.19 ZB1-H07、ZB7-C11基因不同发育阶段表达差异分析 | 第30-33页 |
| 2.3 结果 | 第33-43页 |
| 2.3.1 柔嫩艾美耳球虫未孢子化卵囊、孢子化卵囊、子孢子和第二代裂殖子的纯化 | 第33页 |
| 2.3.2 柔嫩艾美耳球虫未孢子化卵囊、孢子化卵囊、子孢子和第二代裂殖子总RNA提取 | 第33-34页 |
| 2.3.3 ZB1-H07、ZB7-C11的全长cDNA克隆 | 第34-35页 |
| 2.3.4 ZB1-H07、ZB7-C11全长cDNA序列的生物信息学分析 | 第35-42页 |
| 2.3.5 ZB1-H07、ZB7-C11基因在柔嫩艾美耳球虫不同发育阶段的表达差异分析 | 第42-43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-45页 |
| 第三章 ETCDPK和ETC11基因的表达及免疫原性分析 | 第45-65页 |
| 3.1 引言 | 第45页 |
| 3.2 材料与方法 | 第45-57页 |
| 3.2.1 材料 | 第45-50页 |
| 3.2.2 方法 | 第50-57页 |
| 3.3 结果 | 第57-64页 |
| 3.3.1 原核表达质粒的构建 | 第57页 |
| 3.3.2 EtCDPK和EtC11重组蛋白的表达与纯化 | 第57-61页 |
| 3.3.3 EtCDPK蛋白在毕赤酵母中的表达 | 第61-64页 |
| 3.4 讨论 | 第64-65页 |
| 第四章 ETCDPK荧光定位和体外抑制分析 | 第65-75页 |
| 4.1 引言 | 第65页 |
| 4.2 材料与方法 | 第65-68页 |
| 4.2.1 材料 | 第65-67页 |
| 4.2.2 方法 | 第67-68页 |
| 4.3 结果 | 第68-73页 |
| 4.3.1 免疫荧光检测EtCDPK在子孢子入侵宿主过程细胞中的分布 | 第68页 |
| 4.3.2 体外抑制试验分析EtCDPK是否与子孢子入侵宿主细胞有关 | 第68-73页 |
| 4.4 讨论 | 第73-75页 |
| 第五章 全文结论 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 作者简历 | 第83页 |
