摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
引言 | 第10-16页 |
0.1 阿尔茨海默病的研究进展及致病危害 | 第10页 |
0.2 阿尔茨海默病的致病机理及致病蛋白 Aβ的研究现状 | 第10-12页 |
0.3 与阿尔茨海默病相关的基因概述 | 第12-13页 |
0.4 大肠杆菌表达系统 | 第13-15页 |
0.5 表达 Aβ42 肽的目的与意义 | 第15-16页 |
第1章 质粒载体构建及克隆菌株的筛选和表达 | 第16-28页 |
1.1 实验材料 | 第16-23页 |
1.1.1 菌株 | 第16页 |
1.1.2 主要试剂工具酶和试剂盒 | 第16-18页 |
1.1.3 主要仪器 | 第18-19页 |
1.1.4 培养基的配制 | 第19页 |
1.1.5 分子生物学以及生物化学实验的操作 | 第19-23页 |
1.2 实验结果 | 第23-27页 |
1.2.1 基因合成 | 第23页 |
1.2.2 基因操作及诱导表达 | 第23-27页 |
1.3 本章小结 | 第27-28页 |
第2章 Aβ42 肽的大量表达及纯化 | 第28-36页 |
2.1 实验材料 | 第28-29页 |
2.1.1 菌株 | 第28页 |
2.1.2 主要药品、工具酶和试剂盒 | 第28页 |
2.1.3 主要仪器 | 第28页 |
2.1.4 培养基 | 第28-29页 |
2.1.5 实验试剂 | 第29页 |
2.2 实验方法 | 第29-31页 |
2.2.1 使用 IPTG 诱导蛋白表达 | 第29-30页 |
2.2.2 包涵体分离 | 第30页 |
2.2.3 对破壁后的样品的上清和沉淀分别进行纯化 | 第30-31页 |
2.3 实验结果 | 第31-35页 |
2.3.1 IPTG 浓度 | 第31-32页 |
2.3.2 诱导时间 | 第32页 |
2.3.3 诱导温度 | 第32-33页 |
2.3.4 超声破壁 | 第33-34页 |
2.3.5 对超声破碎后样品进行 tricine-SDS-PAGE 电泳 | 第34-35页 |
2.4 本章小结 | 第35-36页 |
第3章 加入不同的盐对于提高大肠杆菌中 Aβ42 肽的表达 量以及促进其可溶性表达的影响 | 第36-42页 |
3.1 实验材料 | 第36页 |
3.1.1 主要试剂 | 第36页 |
3.2 实验方法 | 第36-37页 |
3.2.1 不同盐溶液对大肠杆菌表达 Aβ42 的影响 | 第36-37页 |
3.3 实验结果 | 第37-41页 |
3.3.1 加入 IPTG 诱导同时加入不同的盐诱导 Aβ42 表达影响 | 第37页 |
3.3.2 在加入IPTG 诱导同时加入不同的有机盐溶液诱导Aβ42 肽表达 | 第37-39页 |
3.3.3 不同乙酸钠盐浓度对IPTG 诱导大肠杆菌表达的影响 | 第39-40页 |
3.3.4 加入乙酸钠诱导前后菌液pH 值的变化 | 第40页 |
3.3.5 pH 对大肠杆菌表达Aβ42 肽的影响 | 第40-41页 |
3.4 本章小结 | 第41-42页 |
结论与展望 | 第42-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-49页 |
攻读学位期间发表的学术论文及参加科研情况 | 第49-50页 |